金花茶叶的薄层色谱鉴别范文

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《中国民族民间医药杂志》2014年第二十一期

1方法与结果

1.1齐墩果酸TLC鉴别

1.1.1对照品溶液的制备称取齐墩果酸标准品适量置于5ml容量瓶中，纯甲醇溶解，制得每毫升约含0.04mg齐墩果酸的对照品溶液。

1.1.2供试品溶液的制备分别称取1g普通金花茶、东兴金花茶、显脉金花茶药材，置于具塞锥形瓶中，加入95%乙醇50ml，静置浸泡30min，超声提取1h;过滤，取续滤液，蒸干，残渣用甲醇溶解，置于5ml容量瓶中，定容，得供试品A(普通金花茶)、B(东兴金花茶)、C(显脉金花茶)。

1.1.3薄层色谱鉴别方法普通硅胶板点样，取齐墩果酸对照品溶液、供试品A、供试品B、供试品C点样，点样量为9μl，石油醚－乙酸乙酯－丙酮(7∶2∶1)为展开剂，预饱和10min，10%硫酸乙醇溶液显色，105℃的烘箱中烘7min，紫外灯(365nm)下检视。结果见图1。在齐墩果酸对照品斑点相同位置上，三个品种中普通金花茶齐墩果酸斑点明显，显脉金花茶齐墩果酸斑点较淡，东兴金花茶齐墩果酸未见明显斑点。

1.2芦丁TLC鉴别

1.2.1对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品适量置于5ml容量瓶中，纯甲醇溶解，制得每毫升约含0.04mg芦丁的对照品溶液。

1.2.2供试品溶液的制备分别称取1g普通金花茶、东兴金花茶、显脉金花茶药材，置于具塞锥形瓶中，加40ml氯仿溶液，60℃恒温水浴锅中加热回流1h，过滤，弃去氯仿液，挥干药渣，0.5ml蒸馏水搅拌润湿，加入10ml水饱和正丁醇溶液，超声处理30min，过滤，取滤液蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5ml容量瓶中制得供试品D(普通金花茶)、E(东兴金花茶)、F(显脉金花茶)。

1.2.3薄层色谱鉴别方法GF254硅胶板点样，点样量9μL，乙酸乙酯－甲醇－水－甲酸(9∶2∶1∶0.1)为展开剂，预饱和10min，展毕除去展开剂后于紫外灯光(254nm)下检视。结果见图2。在芦丁对照品斑点相同位置上，三个品种中普通金花茶芦丁斑点明显，显脉金花茶芦丁斑点较淡，东兴金花茶芦丁未见斑点。

1.3人参皂苷TLC鉴别

1.3.1对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品适量，纯甲醇溶解，制得每毫升约含0.04mg人参皂苷Rg1的对照品溶液。

1.3.2供试品溶液的制备分别精密称取1g普通金花茶、东兴金花茶、显脉金花茶药材，置于具塞锥形瓶中，加50%乙醇50ml，静置浸泡30min，超声提取1h;过滤，取续滤液，蒸干，残渣用甲醇溶解，置于5ml容量瓶中，定容，得供试品G(普通金花茶)、H(东兴金花茶)、I(显脉金花茶)。

1.3.3薄层色谱鉴别方法普通硅胶板点样，点样量为12μl，氯仿－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶4.4∶1.6)为展开剂，预饱和10min，10%硫酸乙醇溶液显色，105℃的烘箱中烘10min，紫外灯(365nm)下检视。结果见图3。在人参皂苷Rg1对照品斑点相同位置上，三个品种中普通金花茶人参皂苷Rg1斑点明显，显脉金花茶人参皂苷Rg1斑点较淡，东兴金花茶人参皂苷Rg1未见明显斑点。

2讨论

2.1展开剂的选择在齐墩果酸TCL鉴别展开剂的选择中，分别考察了石油醚－乙酸乙酯－丙酮(7∶2∶1)、正己烷－乙酸乙酯(10∶3)、氯仿－甲醇－冰醋酸(20∶1∶0.2)为展开剂，结果以石油醚－乙酸乙酯－丙酮(7∶2∶1)为展开剂展开斑点成点、清晰、圆整，干扰少;在芦丁TCL鉴别展开剂选择中，分别考察了乙酸乙酯－甲醇－水－甲酸(9∶2∶1∶0.1)、乙醇－丙酮－水(7∶5∶6)、乙酸乙酯－甲酸－水(8∶1∶1)为展开剂，结果以乙酸乙酯－甲醇－水－甲酸(9∶2∶1∶0.1)为展开剂展开斑点成点、清晰、圆整，干扰少;在人参皂苷Rg1的TCL鉴别展开剂选择中，分别考察了氯仿－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶4.4∶1.6)、氯仿－乙酸乙酯－甲醇－丙酮－甲酸(5∶1∶1∶1∶0.2)、氯仿－甲醇－水(13∶7∶2)为展开剂，结果以氯仿－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶4.4∶1.6)为展开剂展开斑点成点、清晰、圆整，干扰少。

2.2显色剂的选择在齐墩果酸和人参皂苷Rg1显色剂的选择中，分别以10%硫酸乙醇溶液、3%香草醛～5%硫酸乙醇溶液显色，结果均显示以10%硫酸乙醇溶液显色斑点清晰，检视效果好。

2.3提取方法的选择在齐墩果酸提取条件的选择中，取普通金花茶叶分别用50%乙醇、95%乙醇、50%甲醇、95%甲醇超声提取，制得4份供试品溶液，同一薄层色谱条件展开，结果显示95%乙醇提取的样品溶液中齐墩果酸斑点最为清晰、明显;在芦丁提取条件的选择中，取普通金花茶叶分别用50%乙醇、95%乙醇、50%甲醇、95%甲醇超声提取，另按照2.2.2样品溶液的制备的方法提取，共制得5份样品溶液，同一薄层色谱条件展开，结果以2.2.2样品溶液制备的方法所得的斑点成点、最清晰、干扰少;在人参皂苷Rg1提取条件的选择中，取普通金花茶叶分别用50%乙醇、95%乙醇、50%甲醇、95%甲醇超声提取，另按《中国药典》中人参的人参皂苷Rg1薄层鉴别［10］方法提取，共制得5份供试品溶液，同一薄层色谱条件展开，结果显示50%乙醇提取的样品溶液中人参皂苷Rg1斑点最为清晰、明显、干扰斑点少。

2.4薄层板的选择在芦丁薄层板的选择中，分别考察了普通硅胶板、GF254硅胶板、聚酰胺薄膜进行比较，结果以GF254硅胶板上芦丁斑点成点、清晰、圆整，干扰少，故以GF254硅胶薄层层析板作为金花茶叶中芦丁鉴别的薄层板。

3结论

本实验薄层色谱结果显示，不同品种的金花茶中化学成分基本相似，但相同成分的含量相差较大，这三种成分均以普通金花茶中含量最高，东兴金花茶中含量最低。但是，这三种成分是否为金花茶的主要药效成分及这些成分含量的高低与金花茶的药理作用相关性，还有待于进一步研究。

作者：梁霄莫建光刘布鸣黄艳高微黎凯群黎奕良单位：广西中医药大学广西分析测试研究中心广西中药质量标准研究重点实验室