产缬草的生药学研究范文

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1方法与结果

1.1根、茎、叶（过中脉）横切面的显微鉴别缬草的根横切面呈类圆形。表皮为1列类圆形或类长方形细胞，细胞较大，多切向延长，排列紧密，壁木栓化。下皮细胞1～2层，类椭圆形或不规则形，壁稍厚。皮层较宽，细胞内含有众多淀粉粒，油细胞散在。内皮层细胞1层，细胞切向排列，凯氏点明显。中柱鞘细胞1～2层，切向排列。维管束外韧型。韧皮部狭窄，形成层不明显，木质部排列成环状，导管类圆形或多角形。中部有髓（图2A）。缬草的茎横切面呈类圆形，有波状棱脊14～20个。表皮为1列较小类方形或长方形细胞，外被角质层和非腺毛。表皮下为数列厚角细胞，在棱脊内侧厚角组织较发达。内皮层明显。维管束外韧型；形成层成环；木质部外侧为2～6层木纤维细胞，多角形，排列成环，导管多角形或类圆形，数个径向排列。髓部宽广，中央破裂成空洞状（图2B）。缬草叶的上、下表皮均为1列切向延长的细胞，类圆形；非腺毛2～5细胞，先端细胞较长，表面有疣状突起。栅栏细胞1列，不过中脉。海绵细胞类圆形，排列疏松。中脉上下表皮细胞下均有厚角组织，下部厚角组织较发达，中脉远轴面顶端凸起。中脉维管束新月形，外韧型。导管多角形或类圆形，数个径向或成群排列。

1.2粉末的特征缬草粉末呈灰绿色。非腺毛较多，多断碎，具明显的疣状突起。石细胞较多，类圆形、长椭圆形，壁厚，孔沟明显。花冠裂片顶端表皮细胞外壁突起呈乳头状。花粉粒类圆形，直径48～65μm，表面有圆颗粒状雕纹，具3孔沟。可见草酸钙晶体，呈方块状或类簇晶状。木纤维成束，直径12～24μm。孔纹导管多见，直径19～41μm；螺纹导管直径10～32μm。淀粉粒极多，多为单粒，呈圆形或椭圆形，脐点点状，层纹不明显（图3）。

1.3薄层鉴别取缬草粉末3g，加甲醇60mL，超声30min，过滤，挥去滤液中的甲醇，残渣中加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液。照《中国药典》2010年版附录VIB薄层色谱法，吸取供试品溶液各15μL，分别条状点样于同一硅胶GF254薄层板，以石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯－丙酮（50．51）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。各供试品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点（图4）。

1.4浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、水分的测定照《中国药典》2010年版附录XA项下浸出物测定法中的冷浸法、附录IXK项下总灰分测定法和附录IXH项下水分测定法第二法，分别测定样品中浸出物、总灰分、酸不溶性灰分和水分。计算10批样品中的浸出物为2．36％～8．72％，平均5．08％；总灰分为852％～10．94％，平均9．66％；酸不溶性灰分为0．59％～2．42％，平均1．28％；水分为10．34％～11．57％，平均10．92％（表1）。

2讨论

缬草的显微鉴别要点为：根横切面主要从表皮细胞、内皮层细胞的特征，皮层的宽度、油细胞的分布等进行鉴别；茎横切面主要从棱脊的数目、维管束的形状、皮层和髓部的宽度进行鉴别；叶横切面主要从非腺毛、中脉维管束的特征进行鉴别；粉末主要从石细胞、花粉粒、草酸钙晶体的形状、大小进行鉴别。

缬草三酯和缬草烯酸是缬草具镇静作用的主要有效成分，缬草三酯是缬草属的特征性化合物。但实验中发现：缬草根及根茎的薄层色谱在与上述对照品相对应的位置上，斑点清晰；而缬草全草的薄层色谱无相应斑点。经HPLC验证，缬草全草中缬草三酯的含量极微，与文献报道一致，缬草烯酸的含量亦极微。鉴于此，文中建立的TLC法暂无对照品。曾分别考察了石油醚（30～60℃）－丙酮、三氯甲烷－甲醇、乙酸乙酯－甲醇、石油醚（60～90℃）－丙酮、石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯、石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯－丙酮等展开剂系统，其中，石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯－丙酮（5051）系统下展开时，各特征斑点分离度良好，Rf值适中，因此确定为展开系统。分别使用乙醚和甲醇提取供试品，两种溶剂提取的供试品的特征斑点差异小，因此，选用甲醇作为提取溶剂。对展开环境条件的耐用性进行了考察，不同饱和时间下缬草的特征斑点均无拖尾，可不饱和直接点样展开。对展开的温度、湿度分别进行了考察，最佳相对湿度为32％～65％，最佳展开温度为5～25℃。

作者：钟世红 古锐 黄明贵 马贞 曹赟 单位：成都医学院药学院 成都中医药大学