痰标本涂阳培阴结果影响范文

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《中国卫生检验杂志》2015年第二十四期

摘要:

目的探究影响痰标本涂阳培阴结果的因素。方法对1191份涂阳痰标本进行培养，从痰检阳性级别、患者就诊服药情况、标本保存时间进行统计分析。结果1191份涂阳痰标本的涂阳培阴率为20．07%，镜检报告级别≤8条、1+、2+、3+、4+痰标本的涂阳培阴率分别为37．50%、26．06%、22．06%、14．81%、8．08%，镜检级别越低涂阳培阴率越高，4+痰标本涂阳培阴率与≤8条、1+、2+、3+相比，差异有统计学意义(P＜0．05)。痰标本保存时间≤3d、3d～7d、＞7d的涂阳培阴率分别为14．75%、39．93%、45．95%，≤3d与3d～7d及＞7d的痰标本的涂阳培阴率比较，差异有统计学意义(P＜0．05)。结论痰培养标本的选择、患者就诊治疗史、标本保存时间都直接影响到痰培养结果。

关键词:

结核病;痰标本;涂阳培阴;影响因素

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病，控制传染源是预防肺结核病的重要途径，传染源主要是排菌的肺结核病患者，尤其是痰涂片和培养阳性者［1］。结核分枝杆菌痰检查对于发现传染源、确定诊断和化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义［2］，是实施全面监督化疗策略(DOTS)的重要要素之一，对结核病防控工作起着重要的作用。其中痰培养检测具有灵敏度高的特点［3］，极大地增加患者发现率，分离菌株可进行后续的药敏检测、菌种鉴定和分子流行病学分析等。探讨影响痰培养结果的因素，保证痰培养质量就显得尤为重要［4］。本文主要从痰标本镜检报告阳性级别、患者就诊治疗史、标本保存时间方面进行比对分析，为提高结核病实验室工作质量提供数据参考。

1资料与方法

1．1资料信息来源于结核病信息管理系统(专报网)、肺结核患者登记本、肺结核患者随访登记本、结核病实验室痰检登记本、结核病实验室痰培养登记本等。标本来自全市9所耐药监测哨点及淄博市第一医院结核病实验室2014年1月－12月收集的1191份涂阳痰标本，保存于4℃冰箱。萋－尼染色试剂(批号:BA415031)、酸性改良罗氏培养基由山东省结核病防治中心统一制备。

1．2方法

1．2．1痰涂片镜检方法实验室采用萋－尼染色法，镜检结果参照《中国结核病防治规划•痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》进行。

1．2．2痰培养方法视痰标本性状做标本前处理，加1倍～2倍体积的4%NaOH消化液于痰瓶中，拧紧螺旋盖，涡旋振荡器上振荡，使痰液充分匀化，室温放置15min。用无菌吸管取去污染处理后的标本0．1ml，均匀接种在酸性改良罗氏培养基斜面上，每份标本接种2支酸性罗氏培养基。接种后斜面向上，于37℃环境中平放，24h后检查培养基有无污染，如无污染，拧紧瓶盖，直立放置，37℃继续培养。

1．2．3结果报告方法接种后第3d、第7d各观察一次菌落生长情况。发现菌落生长者，经抗酸染色涂片镜检证实后，可报告快速生长分枝杆菌阳性。如未发现快速生长分枝杆菌菌落生长，此后每周观察一次，记录菌落生长及污染情况。阳性生长物经抗酸染色涂片镜检证实后，可报告分枝杆菌生长。培养满8周后未见菌落生长者方可报告培养阴性。观察发现非抗酸杆菌生长时报告污染。

1．3统计学处理将数据录入MicrosoftOffice2003建立数据库，采用SPSS17．0软件进行统计学处理分析，组间比较采用χ2检验，以P＜0．05为差异具有统计学意义。

2结果

2．1痰标本选择与涂阳培阴结果对1191份涂阳痰标本按照镜检阳性级别进行分类统计，发现≤8条、1+、2+、3+、4+的涂阳培阴率分别为37．50%、26．06%、22．06%、14．81%、8．08%，总涂阳培阴率为20．07%。镜检级别越低涂阳培阴率越高(表1)。同时选择4+痰标本的涂阳培阴率作为基准，其他镜检级别痰标本的涂阳培阴率与其比对，≤8条、1+、2+、3+涂阳培阴率差异均有统计学意义(χ2值分别为28．073、26．027、17．502、4．757，P＜0．05)。

2．2患者就诊治疗史对涂阳培阴率的影响从结核病信息管理系统(专报网)、肺结核患者登记本、肺结核患者随访登记本等获取初诊患者与复治患者的信息，进行汇总分析显示，1191份标本中初诊患者与复治患者的涂阳培阴率分别为16．07%和30．53%，复治患者涂阳培阴率高于初诊患者涂阳培阴率，差异具有统计学意义(χ2=35．094，P=0．000)。

2．3痰标本保存时间对涂阳培阴率的影响≤3d、3d～7d、＞7d的痰标本对应的涂阳培阴率分别为14．75%、39．93%、45．95%。3d～7d、＞7d的痰标本的涂阳培阴率高于≤3d的痰标本，差异有统计意义(P＜0．05)(表3)。

3讨论

涂阳培阴率是考核痰标本培养质量的重要指标，影响痰标本培养结果的因素较多，通过对1191份标本进行分析发现，在选择培养对象方面，应尽量选取镜检报告级别高的痰标本作为培养对象，越是阳性级别高的痰标本说明结核分枝杆菌检出越多，也反映了痰标本留取质量符合要求，是合格的痰标本，在培养过程中会出现较高的阳性率，充分表明了痰标本的质量对于培养具有重要影响［5］。在实际工作中做好正确引导患者留取肺部咳出的合格痰标本;提高实验室人员涂片与镜检能力，避免定性错误与误差出现，准确的读取镜检结果;按照3涂2培的要求，在选择痰标本进行培养时必须考虑阳性级别高的纳入培养对象，提高检出率。

本研究发现复治患者标本的涂阳培阴率显著高于初治患者，具有统计学意义，可能与患者服用抗结核药物有关，复治患者经过一段时间的抗结核药物治疗后，药效发挥作用杀死体内结核杆菌，患者病情有所好转，排菌减少及菌株活力低所致，也反映出其治疗效果较好［6］。而初诊患者没有服用抗结核药物治疗史，活菌比例较高，因此标本的涂阳培阴率显著高于复治患者。痰标本留取后保存时间较长，使得标本中的活菌数目以及结核杆菌的活力下降，进而使痰培养的涂阳培阴率降低，该结果与Paramasivan等报道的结果类似。综合考虑痰培养标本的选择、患者就诊治疗史、标本保存时间都直接影响到痰培养结果。建议结核病实验室在开展痰培养时应注重选择合格痰标本，在留取痰标本后的3d内尽早培养，对镜检报告级别低及复治患者的痰标本需要改进培养方法，确保培养质量。

参考文献

［1］张敦熔．现代结核病学［M］．北京:人民军医出版社，2000:699－710．

［2］中华人民共和国卫生部疾病预防控制局，中华人民共和国卫生部医政司，中国疾控预防控制中心．中国结核病防治规划实施工作指南［M］．北京:中国协和医科大学，2009:12－13．

［3］刘剑君，姜世闻，成诗明．中国结核病控制现状分析及对策［J］．中国防痨杂志，2003，25(3):129－131．

［4］高风华，冯谦谨，江丽凤，等．中国大陆2002－2010年法定传染病疫情分析［J］．现代预防医学，2013，4(4):756－759．

［5］黄石凤．2007－2008年宜章县919例活动性肺结核病人痰检检测结果分析［J］．中国卫生检验杂志，2009，19(12):2914－2915．

［6］全国第五次结核病流行病学抽样调查技术指导组/办公室．2010年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告［J］．中国防痨杂志，2012，34(8):485－507．

作者：李源 高风华 单位：淄博市疾病预防控制中心