精子核成熟度与妊娠结局相关性分析范文
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摘要:目的分析精子核成熟度与妊娠结局之间的相关性。方法分析2014年1月至2016年12月间108例配偶受孕的男性不育患者的临床资料，根据其配偶妊娠的临床结局分为正常生育组和异常妊娠组，比较两组间精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、精子核成熟度等指标的差异，分析精子核成熟度与妊娠结局的相关性。结果108例配偶受孕的不育症患者中，正常生育74人，异常妊娠（包括生化妊娠、早期流产、晚期引产等）34例，两组间精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率无明显差异（P＞0.05），正常生育组精子核成熟度显著高于异常妊娠组（P＜0.01），精子核成熟度与妊娠结局呈正相关（r=0.413，P=0.000）。结论精子核成熟度可能与妊娠结局密切相关，在评估和预测女方妊娠结局时，有必要了解和分析男方精子核成熟度的高低。
关键词:不育,男性;精子核成熟度;妊娠结局;相关性
环境污染的恶化和社会压力的增加，很大程度上对人类的繁衍产生了不可低估的影响，尤其是对妊娠结局的影响和干扰，更是值得生殖医学工作者关注的焦点。有学者[1,2]认为男性精子的核成熟度与精子的体外受精能力密切相关，可以影响辅助生殖包括夫精人工授精（AIH）、体外受精（IVF）、卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）的妊娠结局；也有学者[3]认为女性ICSI的受精率和妊娠率与精子核成熟度没有任何关系，辅助生殖结局不受影响。精子的细胞核是保持精子遗传物质的重要构成部分，它是否会影响妊娠结局尚有待于更多的论证和观察。笔者分析了108例配偶妊娠的男性不育患者的临床资料，观察了正常生育者和异常妊娠者之间的精子参数以及精子核成熟度的差异，分析了精子核成熟度与妊娠结局之间的相关性，现将结果汇报如下。
资料与方法
一、一般资料
所有研究对象均来源于我院生殖专科门诊，因不孕不育而进行辅助生殖助孕，其中行宫腔内人工授精（IUI）助孕81例，体外受精-胚胎移植（IVF-ET）助孕27例，其配偶在我院确诊为早孕，均签署知情同意书，能配合全身体格检查，生殖器发育正常；能按照WHO第五版《人类精液检查与处理实验室手册》[4]的规范和标准收集精液标本；愿意配合并接受相关检查和随访。并排除染色体核型异常及Y染色体微缺失等遗传性疾病；排除先天性疾病及全身系统性疾病史；排除生殖道感染、传染性疾病史；排除睾丸外伤、隐睾等手术史；排除长期药物、毒性物质接触史。
二、分组方法
根据12个月的随访结果分为正常生育组和异常妊娠组，其中正常生育组74人，以正常生育小孩为标准。异常妊娠组34人，以未正常生育小孩为标准，其中包含配偶生化妊娠、早期流产、晚期终止妊娠等。
三、检测方法
（一）精子常规分析参照WHO第五版《人类精液检查与处理实验室手册》[4]标准，采用手淫法收集研究对象禁欲2~7d后的新鲜精液样本，置于37℃恒温水浴箱，待精液完全液化后应用计算机辅助精液分析仪（CASA）在双人核对下进行精子浓度、前向运动精子百分率等指标的检测。
（二）精子形态学分析参照WHO第五版《人类精液检查与处理实验室手册》[4]标准，采用改良巴氏染色法进行精子染色，在双人核对制度下由2位实验室专业人员进行阅片，每片计数200个精子，计算正常形态精子百分率。
（三）精子成熟度检测由专人负责采用苯胺蓝染色分析法进行精子核成熟度的分析，具体操作步骤参照精子成熟度检测试剂盒（深圳博锐德生物医学工程有限公司）。
四、随访方法
有专人进行跟踪随访，从妇科确诊其配偶妊娠后开始定期随访，于其配偶妊娠1个月内、3个月、6个月、9个月、12个月进行定期随访，记录其配偶身体健康指标及胚胎发育情况。五、统计方法采用SPSS18.0软件进行统计分析，所得计量数据用均值加减标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结果
一、一般人口学特征比较
108例配偶受孕的不育症患者中，正常生育74人，异常妊娠（包括生化妊娠、早期流产、晚期引产等）34例，两组对象在年龄、体质量指数（BMI）、配偶年龄、配偶BMI等一般人口学指标无差异，具有可比性，结果见表1。
二、两组精子参数比较
两组间精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率无明显差异（P＞0.05），正常生育组精子核成熟度显著高于异常妊娠组（P＜0.01），精子核成熟度与妊娠结局呈正相关（r=0.413,P=0.000），结果见表2、表3。核的成熟是评估其稳定程度的标志，尤其是保障精子所携带的生物遗传物质能够得到延续的重要手段。当精子核内的染色物质包装不完善时候，精子的生物学特性比如精子数量、活动能力、精子顶体功能、精子形态以及DNA碎片等都会受到一定的影响[5,6]。Mantas等[7]利用TUNEL法检测精子DNA碎片率时候发现，精子DNA碎片指数高的患者，其精子核的成熟度显著低于对照组。Piomboni等[8]通过透射电子显微镜将精子的核放大到数万倍后发现，发育差的精子，其核内染色质的致密程度显著低于发育良好的精子。因此，精子的核成熟程度对于精子的生物学特性有着一定的影响。Bareh等[9]发现精子的DNA碎片数量与不明原因复发性流产密切相关，它是导致女性复发性流产的一个重要因素。刘瑜等[10]在孕早期自发性流产与胚胎停育男性因素的病例对照研究中发现，精子的核成熟程度是影响女性早期自发性流产与胚胎停育的一个重要因素，在对女性妊娠结局的预测和评估时，建议检测男方的精子核成熟度，以了解男方精子的DNA损伤情况。我们通过对比研究也发现，108例研究对象的妊娠配偶，在排除了女方年龄、BMI等干扰因素后，正常生育组与异常妊娠组在精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率等方面都没有差异，但异常妊娠组的精子核成熟度却显著低于正常生育组，这可能是导致异常妊娠组胚胎发育不良的一个因素，值得我们作进一步大量本、多中心的观察和研究。Soderlund等[11]研究表明，精子核成熟度低的男性精子在与卵子结合形成受精卵后，仍然会干扰受精卵的着床和早期发育。Henkel等[12]发现，精子核成熟度甚至会影响囊胚期的胚胎发育，而导致囊胚停育。白文俊等[13]在重视妊娠失败中的男性因素评估中表明，男性精子核成熟度对于妊娠失败的影响不可忽视。杜江平等[14]应用枸杞子、淫羊藿联合维生素C、维生素E和精氨酸对少弱畸形精子症综合治疗后发现，精子染色质结构得到明显改善，精子核成熟度有显著提高。王霞等[15]应用尿卵泡刺激素联合人绒毛膜促性腺激素治疗也能够使精子核成熟度增加。我们通过双变量相关分析表明，精子核成熟度与妊娠结局呈正相关（r=0.413,P=0.000），因此，在评估和预测女方妊娠结局时，我们也建议有必要了解和分析男方精子核成熟度的高低，当发现男方精子核成熟度偏低的状态下配偶出现意外或者计划怀孕时，有必要进行适当的保胎治疗，以保障胚胎发育的质量。育龄期男性在备育前最好进行精子核成熟度的检测，当发现精子核成熟度低下，可以应用抗氧化剂、中医中药等有效手段进行改善，以保证配偶受孕后胚胎的优质。
参考文献
2邓天勤,邓敏芝,,等.精子核成熟度与早期不明原因复发性流产的相关性研究.中国性科学2017;26(5):116-118
5熊承良,商学军,刘继红,主编.人类精子学.北京:人民卫生出版社,2013:68
6谷龙杰,陈振文.人类精子核成熟度检测及其临床意义.国际生殖健康/计划生育杂志2008;27(4):224-227
10刘瑜,陈晓兰,陈小蔓,等.孕早期自发性流产与胚胎停育男性因素病例对照研究.中国男科学杂志2010;24(7):21-25
13白文俊,耿冲.重视妊娠失败中的男性因素评估.中国男科学杂志2014;28(1):3-8
14杜江平,杨书文,门金娥,等.少弱畸精子综合征治疗前后精子染色质流式细胞术分析.中华男科学杂志2008;14(4):334-337
15王霞,杜江平,李艳,等.尿卵泡刺激素联合人绒毛膜促性腺素治疗少弱畸精子综合征疗效观察.生殖医学杂志2008;17(5):376-377
作者：陈亮 林永锴 张晓艳 王英 刘晃 刘兴章 单位：南方医科大学附属东莞广济医院