佐剂性膝关节炎的实验研究范文

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《世界中医药杂志》2015年第一期

1材料和方法

1.1足肿胀度的测定3组动物均于实验当天测量右足趾关节以下部位的容积，连续3次，取平均值为右足容积，计算各组动物足肿胀度。前后容积之差值为肿胀程度，计算足肿百公率：足肿胀度（％）＝（造模后容积－造模前容积）／造模前容积×100％，记录各组动物消肿时间。

1.2IL1β及HA检测方法参照文献采用酶标双抗体夹心ELISA法标记所收集关节液中的IL1β计算IL1β含量［5］。用透明质酸放免试剂盒进行序列加样，按试剂盒说明严格操作，加样完毕，离心后取沉渣，放射免疫γ射线计数分析关节液标本HA含量。

1.3动物存活情况观察观察动物是否存活，有无动物死亡，动物的一般情况（包括自洁情况、摄食、饮水量等）。

1.4数据统计采用SPSS150软件处理，实验数据以表示，指标比较采用单因素方差分析（onewayANOVA），组间差异采用Dunnett检验，P＜005为差异有统计学意义［6］。

2结果

2.1大鼠一般情况的变化术后14d，对照组大鼠体毛有光泽，反应敏捷，饮食正常，无死亡。模型组大鼠体毛无光泽、竖毛、反应迟钝、蜷缩少动、大鼠体重减轻明显，死亡1例。治疗组在第2周后显著改善以上症状，但与对照组大鼠比较稍差，35％鼠体毛无光泽，反应一般，饮食正常，无死亡。

2.2治疗前后骨关节炎白细胞介素1β亚型（IL1β）、透明质酸（HA）含量治疗组IL1B含量在治疗2周后开始降低，与治疗前及模型组比较差异有统计学意义（P＜005），治疗组透明质酸（HA）含量在治疗2周后开始明显升高，与治疗前及模型组比较差异均有统计学意义（P＜005）。说明通痹外敷散能有效降低白细胞介素1β亚型（IL1β），升高透明质酸（HA）的作用。

2.3治疗前后各组动物足肿胀度（％）对比情况治疗组在通痹外敷散治疗后1周开始消肿，3周后已接近正常，与模型组比较差异有统计学意义（P＜005），说明通痹外敷散治疗效果显著。

3讨论

膝关节炎的病理变化主要为软骨的破坏与变性，以及继发的滑膜与滑液炎症性改变，是软骨分解与合成代谢失衡的结果。中医学认为，膝关节受损后，局部气滞血瘀，湿浊痹阻于膝关节，治则当利湿除痹、舒筋通络、活血化瘀、行气止痛［8－10］。方中生草乌、生川乌散寒祛湿，祛风止痹；没药、乳香为骨伤科要药，乳香调气活血，没药活血祛瘀，但乳香偏于行气、伸筋，而没药善于散血化瘀，两者合用能增强行气活血止痛之功。土鳖虫破血逐瘀，续筋接骨；樟脑、山柰、胡椒、松香辛香走窜、行气止痛；三棱、三七散瘀止血；马钱子、洋金花通络散结、消肿定痛；大黄攻积导滞、通经行瘀；诸药合用共起通痹止痛、散瘀消肿、化湿行气之功效。通过药物外敷，在局部保持一定的浓度，能促进局部组织新陈代谢而达“通则不痛”的功效，并且药物置于体表患部，药力直达病所，起效迅速，痛苦较少，不良反应降低，安全可靠。

本研究结果表明通痹外敷散治疗膝关节炎能有效降低白细胞介素1β亚型（IL1β），升高透明质酸（HA）的作用。机制可能为：通过抑制ILlβ产生，减轻关节软骨和滑膜的炎性反应，减轻软骨细胞正常结构和功能的破坏、基质的降解，减轻骨的吸收以及关节软骨周围骨赘的形成，从而减轻关节疼痛的临床症状以及关节软骨的破坏，改善关节功能。正常的关节滑液中仅含有微量的IL1β，但在骨性关节炎（Osteoarthritis，OA）关节液中IL1β的含量则异常增高。IL1β作为重要的炎性递质具有细胞破坏能力，其在退行性骨关节病中发挥着重要作用。HA是由D葡萄糖醛酸和N乙酰氨基葡萄糖胺二糖单位有规律重复构成的大分子链状多糖，化学本质为糖胺多糖，广泛分布于人及动物的结缔组织、眼玻璃体、软骨和滑液中，是关节滑液和软骨基质的重要组成部分。HA可减少OA关节内炎性递质的扩散，减少滑膜的通透性及关节内渗液。

我们认为滑液中HA含量升高是由于中药进入机体吸收以后，促使滑膜内衬B型滑膜细胞和单核吞噬细胞产生分泌HA，从而起到润滑关节、保护关节软骨、延缓软骨退变的作用。这是一种“内源性”HA，相对于外源性的HA关节腔内注射，其作用时间更为长久。中医学认为该病属“骨痹”范畴，人至中老年或大病后，精气亏耗，腠理疏松，骨节失密，风寒湿邪入侵而致气滞血瘀寒凝，经络不通，精血不能荣筋主骨，痹阻骨节筋脉而发为骨痹，中药外敷可祛风除湿散寒［14］，活血化瘀通络，消肿止痛，清除关节内炎性因子，改善关节腔内环境从而达到治疗目的。

作者：邹佩霞李莉刘兴林陈德森单位：上海交通大学医学院附属新华医院中医科