生化血清标本储存条件的临床实用范文

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摘要:目的探讨血清标本在不同放置时间及温度条件下对30项常规生化检测结果的影响。方法留取2017年5—7月哈尔滨医科大学附属第一医院的200份生化检测患者的血液标本。分为时间组和温度组，时间组100份血清标本，每个分装成4份，一份于1h检测，三份放置2～8℃冰箱内于24、48、72h检测;温度组100份血清标本，每个分成3份，一份在室温1h检测，两份分别放置－15℃、－70℃冰箱内于1周后检测，检测30项生化指标。结果与放置1h相比，24h、48h、72h的天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶(ALT)、白蛋白、K+、Na+、Cl－、总胆汁酸、α羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、胱抑素C(CysC)升高(P＜0．05)，直接胆红素(DBil)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)降低(P＜0．05);与室温相比，24h、48h、72h的ALT、DBil、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、CK-MB、α-HBDH、CysC均降低，肌酐、β2微球蛋白升高(P＜0．05)。结论针对不同的生化项目选择血清标本的储存温度和时间，确保检测结果的真实性，可为临床的诊断和科研工作提供可靠的检测数据，保证工作顺利进行。

关键词:血清标本;温度;时间;生化结果

血液标本的检测对临床诊断和治疗是必不可少的辅助手段，结果是否准确直接影响临床工作。虽然生化检测由早期的半手工操作发展到现代的全自动分析仪大大提高了工作效率和准确性，但是自动生化分析仪在检测前需耗费时间对仪器进行日常维护、校准和质控，而患者采血时间偏早，血标本从病房或门诊送到实验室后再对标本进行离心、分类、编号等操作，需检测的标本数量多等因素使血液采集后不能即刻检测［1-2］。直接影响血液检测结果的因素包括患者采血前的饮食和生活方式，采血方法及采血管的选择，物流运输条件，检验仪器的状态及血清储存时间和温度等［3-6］。文献研究结果显示，血液标本放置时间及温度的不同会对部分生化项目的检测结果产生影响，所以需要对血液的储存方式进行探讨［7-9］。本实验通过设置时间和温度两个变量分别进行研究，明确临床血清标本储存的合适温度及时间，以期为生化指标检测前的准确度和检测后的精密度提供一定的临床价值，从而更好地为临床和科研工作服务。

1资料与方法

1．1一般资料

留取2017年5—7月哈尔滨医科大学附属第一医院的200份生化检测患者的血液标本，其中男96例，女104例，年龄20～75岁，平均(43．6±15．5)岁。

1．2方法

200份血液均为晨起空腹静脉血3mL，无溶血，无黄疸，无乳糜。离心取血清加盖放置，分为时间组和温度组，时间组由100份血清标本组成，每个标本分装成4份，一份于1h检测，另外3份放置2～8℃冰箱内于24、48、72h检测;温度组由100份血清标本组成，每个标本分成3份放置，一份在室温即刻检测，两份分别放置－15℃、－70℃冰箱内于1周后检测，检测30项生化指标。仪器采用日本OLYMPUSAU-5400全自动生化分析仪;试剂与校准品、质控品均为AU-5400适用试剂。对日本OLYM-PUSAU-5400全自动生化分析仪进行日常维护，校准和质控，质控合格后，严格执行操作步骤进行检测。

1．3观察指标

检测天冬氨酸转氨酶(aspartateaminotransferase，AST)、丙氨酸转氨酶(alanineamin-otransferase，ALT)、总蛋白(totalprotein，TP)、白蛋白(albumin，ALB)、总胆红素(totalbilirubin，TBil)、直接胆红素(directbilirubin，DBil)、γ谷氨酰转氨酶(γ-glutamyltransferase，γ-GGT)、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，AKP)、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase，LDH)、肌酐(creatinine，Cr)、尿酸(uricacid，UA)、葡萄糖(glucose，GLU)、K+、Na+、Cl－、总胆固醇(totalcholesterol，CHO)、三酰甘油(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoproteincholes-terol，HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-densitylipoproteincholesterol，LDL-C)、肌酸激酶(creatinekinase，CK)、肌酸激酶同工酶(creatinekinaseisoenzymes，CK-MB)、总胆汁酸(totalbileacid，TBA)、胆碱酯酶(cholinesterase，CHE)、α羟丁酸脱氢酶(alpha-hydroxybutyricdehydrogenase，α-HBDH)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、胱抑素C(cystatinC，CysC)、视黄醇结合蛋白(retinol-bindingprotein，RBP)、脂蛋白a(lipoprotein(a)，LPa)、β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)、血尿素氮(bloodureanitrogen，BUN)30项生化指标。

1．4统计学方法

采用SPSS20．0统计学软件对数据进行分析，计量资料用均数±标准差(x珋±s)表示，不同时间和温度比较采用单因素方差分析，两两比较使用LSD-t检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1血清不同放置时间生化指标测定值比较

与放置1h相比，24h、48h、72h的AST、ALT、ALB、K+、Na+、Cl－、TBA、α-HBDH、CysC升高(P＜0．05)，DBil、CK-MB降低(P＜0．05)，不同放置时间的TP、TBil、γ-GGT、AKP、LDH、CREA、UA、GLU、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、CHE、Hcy、RBP、Lpa、β2-MG、BUN比较差异无统计学意义(P＞0．05)。

2．2血清不同放置温度生化指标测定值比较

与室温相比，ALT、DBil、AKP、LDH、CK-MB、α-HBDH、CysC均降低，CREA、β2-MG升高(P＜0．05)，不同放置温度AST、TP、ALB、TBil、γ-GGT、UA、GLU、K+、Na+、Cl－、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、TBA、CHE、Hcy、RBP、Lpa、BUN比较差异无统计学意义(P＞0．05)。

3讨论

血液检测指标能够直观地反映人体的生理变化，而生化检测是医院常见的血液检验项目，检测结果的准确性受患者身体状态、生化分析仪、血液标本采集及前处理等因素的影响［10-11］，其中血清分离胶适用于生化血清的分离［12］，可以很好地保持血清成分的性状和稳定性，其他采血管会对生化结果有不同程度的影响，如乙二胺四乙酸盐、草酸盐抗凝血不能用于血钙测定，用草酸盐或氟化物作抗凝剂会抑制LDH、α-HBDH的活力等。血液标本放置时间延长后，红细胞消耗葡萄糖使血糖含量降低［13］，血细胞中的钾离子及酶类含量比血清高，所以在血液采集后应及时离心，分离血清，排除血细胞对生化指标的影响［14］。等待检测时，分离后的血清应加盖密封，否则血清水分蒸发使结果偏大［15］。根据以往文献结果显示，血清相对血液的影响因素更少，稳定性更好，检测结果偏差更小，更适合储存［16-18］。本研究结果显示，与放置1h相比，24h、48h、72h的AST、ALT、ALB、K+、Na+、Cl－、TBA、α-HBDH、CysC升高(P＜0．05)，DBil、CK-MB降低(P＜0．05);与室温相比，ALT、DBil、AKP、LDH、CK-MB、α-HBDH、CysC均降低，CREA、β2-MG升高(P＜0．05)。离子指标可冰冻保存［19］，在冰冻复融后对血清检测，酶类指标的检测值前后变化幅度较大，可知冻融对ALT、HBDH等酶类指标检测结果的影响很大［20］。排除血细胞对血糖的代谢，血糖在冷藏时可稳定保存3d，在冰冻条件时可保存1周。医院保存血清的温度通常为2～8℃，检测后的血清一般放置1周，以便复检及防止临床纠纷的发生。本研究结果显示，放置后的部分生化项目的检测数值的变化差异有统计学意义，即使数值变化在实验室允许范围内，但其酶活性不再稳定，检测前的准确度和检测后的精密度受到影响，当临床或科研工作需要对血清标本进行重测时，应根据所需具体生化项目判断结果是否可用，必要时应重新采取患者血液标本进行检测，以保证结果的真实性［21］。保存血清要耗费人力及物力，实现针对不同项目选择具体的保存方法，不仅能使资源利用达到最优化，也可减轻检验人员的负担。规范化管理血清标本是实验室工作的重点，从根本上减少误差，使血液检验能更真实地反映患者的情况。本实验选取的样本量大，使研究结果具有足够的可信度;检测项目多，对样本储存时间以及温度的设置具有科学性和创新性，这对指导生化室标本储存具有重要意义;实验条件设置更符合医院实际储存血清的情况。在实际工作中，针对不同项目选择具体的保存方法对临床或科研工作具有很大的实用价值，至于更详尽的保存方法仍需更大样本研究方可确定。

作者：王丹凤；冯磊光；马学华；王丹；宋志伟；计春辉；石国欣单位：哈尔滨医科大学附属第一医院检验科