中耳和内耳细微结构标本制作方法范文

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［摘要］目的探索显示中耳和内耳细微结构直视标本的标准化制作方法。方法使用人颞骨材料，在颅内和颅底面画出标准锯路的标志线，选择细齿窄条钢弓锯，沿标志线锯开颞骨显示中耳结构。再用手握式玉石磨钻分别研磨显示内耳结构。最后完成对鼓膜、听小骨、面神经、鼓索神经和颈内动脉等结构的仿真复原，并用合页连结锯开的两半颞骨。结果在锯开的颞骨内可清晰显示中耳鼓室的6个壁，以及锥状隆起、咽鼓管、前庭窗和蜗窗等细微结构。磨制后的内耳可见3个打开的骨半规管和耳蜗的剖面。复原后的听骨链、面神经、鼓索神经、颈内动脉和鼓膜等结构，均以三维方式显示原有结构的特征和位置关系。由合页连结的颞骨标本，既可打开观察内部结构，也可合拢显示整体形态。结论采用锯开和研磨技术制作耳标本可以取得满意的结果，标准化的锯路标志和标准的定位研磨是成功制作的关键。

［关键词］耳;中耳;内耳;解剖学;标本制作;人

耳是听觉和平衡觉的感受器官，结构复杂、精细。由于中耳和内耳都埋在颞骨内很难解剖显示;每当讲到耳部局解时，因为颞骨既小又坚硬，加之缺少标准化的解剖指导而无从下手;同学们都感到理解很困难［1，2］。因此，建立国人耳标本制作的规范和标准化的操作程序十分必要。经过多次的实践、比较和分析，我们总结出一套行之有效的标准化操作方法，取得了比较满意的结果。

材料和方法

1．解剖材料

干燥的分离颞骨和固定后的湿性颞部标本材料。

2．使用工具

细齿窄条钢弓锯，锯路不超过1mm，锯条宽度在5mm内的钢锯条(不可使用木工锯条)。手握式玉石磨钻，市售有多种类型，选择有可调转速并配备各式金钢砂磨头1套。小型台钳，电烙铁和强力胶水等。

3．操作程序

3.1锯开颞骨显示中耳结构:

经清洗晾干的颞骨按体位位置摆好，在颅内(上)面和颅底(下)面分别画出上、下锯路标志线。上锯路选择3个标志点:A前点为骨性咽鼓管的最前端的凹窝处;C后点为颞骨鳞部与岩部后方的交汇处，即顶骨切迹的凹陷处;B中点位于前、后点直线距离间的中点，距颞骨岩嵴向外1.3cm处。将此3点自前向后用马克笔连成一条略向外凸的孤线，即为上锯路标志线(图1)。下锯路标志点:前点为骨性咽鼓管最前端的凹窝下方处;后点为颞骨乳突的下端;中点为茎乳孔。将此3点相连即为下锯路标志线。将颞骨前端(岩鳞缝)向上，后端朝下固定于台钳，在骨与台钳接触部用毛巾分隔保护，固定时不要夹太紧，应留有少量活动空间，以便随时调整颞骨的姿态。用钢弓锯自上而下锯开颞骨，操作时动作要轻柔，用力要均衡，锯速保持稳定一致，眼睛要同时盯住上、下两条标志线，使之尽量重合在1条锯路中。为防止夹锯损伤骨质，可在锯缝中插入硬纸板作为楔子将锯路撑开。如因锯路较长很难一锯完成，也可由前、后两端分头锯的方法，最后在茎乳孔处交汇。将锯开的颞骨分开后，检查是否有听小骨，如有可收集起来备用。用毛刷清洁锯开颞骨的剖面，仔细检查中耳鼓室的6个壁和相关的细微结构，包括外半规管凸、面神经管凸、锥隆突、前庭窗、蜗窗，鼓膜张肌半管和咽鼓管半管等，这些结构只有通过锯开才能看到。

3.2研磨内耳半规管和耳蜗结构

3.2.1研磨、打开半规管:首先在锯开颞骨内侧半剖面的上部外半规管凸的中部，用手握式磨钻、选用纺锤形磨头钻开一小洞，即进入外半规管的管腔，沿管凸的走向分别向前、后研磨扩展磨开此管，管的前端膨大处为壶腹部，开口于前庭的下部，管的后部向内向前方弯曲也通入前庭。第2步，磨开前半规管，在岩部上面的最高点确定前半规管的走行方位，此管位于岩部上方骨质内，其冠状走行的平面恰与岩嵴的长轴呈直角。自岩嵴的前端向后3cm处用笔画1条向外的横线达岩鳞缝，此线与岩嵴相垂直约1cm长，向内越过岩嵴达岩部内侧面的上部(图1)。选用尖锥形磨钻头在横线中点处研磨，深度达1.5mm便可进入前半规管的管腔。沿此腔的标志线向内外扩展研磨，其外端的膨大即为壶腹，开放于前庭的上部，管的内端与后半规管的前脚融合成为总脚，开口于前庭的内上部。第3步，打开后半规管，此管位于前半规管的后方，其平面与岩部内侧面平行，而与前半规管呈直角状。自前半规管内端的总脚处沿岩部内面向后下方画出一“C”形孤线，该孤线的上端距岩嵴4～5mm，后端自总脚向后约7mm，自总脚沿C形孤线研磨扩展后半规管，位于管下端的壶腹位置较深，在骨面下3～4mm处，开口于前庭的下部。为了突出3个半规管的立体构型，可用尖锥形磨头在每个半规管孤形弯曲中间的骨质处，向深处研磨，并将每个半规管管壁外多余的骨质研磨掉，使3个半规管呈现相互垂直的立体镂空构型(图2)。3.2.2研磨耳蜗结构:耳蜗位于岩部上面3个半规管前方的骨质内，为准确找到耳蜗要做好骨面标志，自内耳门的后缘垂直向上达岩嵴交点，向外越过岩嵴达岩大神经沟最后端的面神经裂孔处，画1条横向连线约1.5cm长，自岩嵴向外约7mm处画1条与岩嵴平行的纵线，后方与横连线相交，自该交点沿纵线向前8mm处，再画1条向外的横线，恰与后方的横连线平行达岩大神经沟，沿岩大神经沟向内2mm画1条纵线与该沟平行。至此，在岩部上面岩大神经沟的内侧形成一长方形的框，框内即埋有骨性耳蜗。框内侧的纵线恰为耳蜗基底部的投影，以此纵线作为底线，画一等腰三角形，顶点朝外达框的外侧边中点，表示耳蜗顶的位置，此三角形称耳蜗三角D(图1)。选择钝圆形磨头，在三角区内向深部研磨约3mm深的骨质，便可磨出一椭圆形小洞，此为基底部的骨螺旋管腔，此时可换用细砂质的球形磨头，向前方和两侧扩展研磨耳蜗的骨螺旋板和蜗轴，注意研磨的速度和力度要严格控制，不可操之过急以免损伤菲薄脆弱的骨螺旋板结构。

3.3完善整体标本:

为完整显示耳的结构和相关血管、神经的位置关系，还需进行以下操作:3.3.1显示面神经走行:选用直径1mm细铜丝，自内耳道底的面神经管口穿入，向外达面神经膝，再经面神经管向后、向下经茎乳孔出颞骨。在面神经膝处用电烙铁焊接一小段细铜线作为岩大神经，沿岩大神经沟向前达岩部尖端处，焊点表示膝状神经节。在面神经出茎乳孔前约1cm处，再焊1摞细的铜丝，呈锐角向上方返回鼓室，1～1.5cm长，代表鼓索神经自面神经发出的近端，另外一段(鼓索神经远端)位于锯开颞骨的外侧半内，用10cm长同样的细铜丝夹在已做好鼓膜和锤骨、砧骨之间，代表鼓索神经的远端穿岩鼓裂出颅，用胶水粘牢固定。3.3.2安装鼓膜和听骨链:首先用纸片盖在鼓膜的位置上，用拇指按住纸片轻轻揉动，使纸片留下鼓膜缘的压痕，沿压痕剪出鼓膜轮廓，用透明塑料薄片剪成鼓膜，将塑料鼓膜片左右和上下各对折1次，展开后的鼓膜呈漏斗状，沿鼓膜环沟涂上胶水，将塑料鼓膜片凸面向内粘牢。待胶水干燥后将锤骨粘在鼓膜内面，锤骨柄末端粘在漏斗形凸起(表示鼓膜脐)处，锤骨头粘于鼓室上隐窝的骨面上，再将砧骨的关节面与锤骨头粘在一起，注意用镊子调整砧骨的方位，使其短脚朝向鼓室的上后壁、长脚与锤骨柄相平行，并将鼓索神经的远端部分穿过长脚与锤骨柄之间的空隙，再向前上方穿过岩鼓裂出鼓室，用胶水将上述结构粘牢固定即可。最后将镫骨粘于前庭窗上，由于前庭窗的粘膜已去除，镫骨基底无法粘在窗的周缘，可在前庭窗内填充少量棉丝使之与窗口平齐，再用胶水将镫骨粘坐在窗上。3.3.3安装颈内动脉:取6～8cm长直径3mm粗的红色塑料管1段，用打火机烘烤，边烤边转动使塑料管受热均匀，后在管内插入1段铁丝，将其与塑料管一起弯成近直角形状，在流水中冲洗冷却，使塑料管弯曲定型。自颈动脉管下口穿入由内(上)口穿出，在塑料管与骨面间涂上胶水粘牢即可(图2)。3.3.4安装环形合页:将锯开的两半颞骨合并，沿后面锯缝的两旁选择上、下两点，距锯缝旁开5mm处，分别用细钻头各打一小孔。用细铜丝分别穿过两对小孔并焊接成环形合页，使两半颞骨可任意开合即可(图2)。

结果

1．显示中耳结构

将锯开颞骨的两半展开，可见中耳鼓室的6个壁完整、清晰显示，尤其是内壁在没有锯开的情况下，是很难理解也无法看到的。与鼓室相关的细微结构如:锤、砧、镫3个听小骨组成的听骨链，以及与鼓膜、鼓索神经的位置关系;面神经在中耳内的走行;鼓膜张肌、镫骨肌的位置及相关的骨性结构，鼓膜张肌半管和锥隆突;鼓室岬、前庭窗、蜗窗和鼓室神经丛的位置;乳突小房、乳突窦、乳突窦口和鼓室上隐窝等结构均明确显示［3］。

2．显示内耳结构

经研磨显示的前、后、外3个半规管不仅管腔被打开，而且因去除了管周围多余的骨质，突出了半规管的三维立体结构位置关系。耳蜗的骨螺旋板、蜗轴和骨性管道，经研磨清晰可见。内耳的3部分结构，耳蜗、前庭和半规管的整体构筑、位置关系及在颞骨内的定位均可明确显示。

3.整体标本结构

复原一些与中耳、内耳相关的结构，如鼓膜、颈内动脉、面神经、鼓索神经、岩大神经、鼓室神经丛、鼓膜张肌、镫骨肌等结构的位置关系经复原制备，均可在标本中显示，具有较高的仿真度和实用价值。讨论中耳和内耳的结构精细复杂，而且埋于颞骨内很难解剖，是解剖教学的难点之一，由于缺乏规范的标准化操作指导，学生解剖时无从下手，因操作不当而使结构损伤或丢失的问题时有发生。为解决这一困局，使学生们都能亲手解剖出耳的结构，就必须制定出标准化的操作指导。本实验总结出国人耳解剖标准化操作指导，与内耳铸型标本制作相比［4，5］，具有标志准确规范，操作技术简便易学，所需工具设备简单易得和成功率高的优点，在教学实践中取得良好效果。由于添置了钢弓锯和研磨钻等工具，使每组学生都能按指导进行规范操作，观察到中耳和内耳的细微结构。克服了以往只能通过图和模型了解耳结构的不足，有效地提高了教学质量，促进了教学改革。标准化的操作方法在与临床结合的教学中也发挥了重要作用，北京协和医学院解剖学教研室与协和医院耳科合作开发的耳科手术培训班中，曾连续多次介绍、展示标本和操作技术，深受学生和临床医生们的欢迎，扩展了此项技术的应用，也为临床服务提供了基础［6］。随着教学实践和临床结合应用的不断发展，予期对标准化耳标本制作技术的精准操作，将日趋完善和更好的服务于教学和临床实践。

参考文献

［2］张鋆．人体解剖学［M］．第2版．北京:人民卫生出版社，1963:33-35

［3］柏树令，应大君，丁文龙，等．系统解剖学［M］．第2版．北京:人民卫生出版社，2013:284-294．

［4］李忠华，王兴海．解剖学技术［M］．第2版．北京:人民卫生出版社，1998:53-60．

［5］于频，刘正津．解剖学技术［M］．北京:人民卫生出版社，1984:57-66．

［6］高志强，夏寅．显微镜与耳科学［M］．北京:人民卫生出版社，2014:60-64．

作者：王乃利 张迪 穆瑞民 寇印华 曹承刚 马超 刘克 单位：中国医学科学院基础医学研究所