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《农产品加工杂志》2015年第六期
1材料与方法
1.1材料与仪器
1.1.1试验材料新鲜大蒜、苦瓜,购于湖南农业大学滨湖菜市场。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、毛霉等供试菌,湖南农业大学食品科学技术学院产品。微生物培养基为营养琼脂培养基、麸皮、牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯蔗糖琼脂培养基。
1.1.2试验仪器新苗DNP-9272BS-Ⅲ型恒温培养箱,上海新苗医疗器械制造有限公司产品;3870C型立式灭菌器,山东新华医疗器械股份有限公司产品;SW-CJ-2D型双人单面(垂直)净化工作台,江苏通净净化设备有限公司产品;BS224S型电子天平,北京赛多利斯仪器有限公司产品;JYL-CO20型九阳物料粉碎机,九阳股份有限公司产品;LD5-2A型离心机,北京雷伯尔离心机有限公司产品;DGG-9070A型干燥箱,上海森信实验仪器有限公司产品;MJX-250B-Z型霉菌培养箱,上海博迅实业有限公司医疗设备厂产品。
1.2试验方法
1.2.1大蒜、苦瓜的预处理取新鲜去皮大蒜瓣,用无菌水震荡清洗3遍,用粉碎机将大蒜粉碎成蒜泥后置于50℃烘箱中烘干,装入无菌袋中于4℃下贮藏备用。将鲜苦瓜洗净,去瓤,切片,放入50℃干燥箱烘干,干燥的苦瓜用粉碎机粉碎后装入无菌袋中4℃贮藏备用。
1.2.2菌悬液的制备分别取试验菌种,接种于斜面培养基试管中,培养活化后加入到无菌水中,充分振荡得菌悬液。利用稀释平板法测定菌悬液的含菌量,使其控制在1×106CFU/L左右。
1.2.3滤纸片扩散法[7]进行抑菌效果试验取定性滤纸,将其制成直径5mm的圆片,经灭菌后再浸泡于待测的复配提取液中,沥干后将滤纸片贴放在制备好的含菌培养基表面,纸片之间及纸片与平板边缘距离15mm,每个平板贴放4~6张滤纸片。放入相应的恒温培养箱中培养(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌37℃培养24h,毛霉28℃培养48h),测量抑菌圈直径的大小。
1.2.4不同比例对提取液抑菌效果的影响分别按照大蒜与苦瓜的质量比1∶4,1∶3,1∶2,1∶1,2∶1,3∶1,4∶1进行复配混合,将复配后的物料加入一定量的无菌水振荡制成抑菌液。得到的抑菌液再进行抑菌效果试验,每个比例做3个平行试验。培养后观察抑菌效果,并得出结论。
1.2.5不同质量浓度对提取液抑菌效果的影响按抑菌效果最佳物料比例称取一定量经预处理的大蒜、苦瓜原料,用无菌水配制成质量浓度为1,0.5,0.25,0.125,0.0625g/mL的溶液后做抑菌效果试验,每个质量浓度做3个平行试验。培养后观察抑菌效果,并得出结论。1.2.6温度对提取液抑菌效果的影响取抑菌效果最佳的比例经预处理的大蒜、苦瓜原料,并用无菌水将其制成最佳质量浓度的抑菌液,将其置于室温,50,70,90,121℃共5个条件下,处理15min后做抑菌效果试验,每个温度做3个平行试验。培养后观察抑菌效果,并得出结论。
2结果和分析
2.1不同比例对提取液抑菌效果的影响不同比例对提取液抑菌效果的影响见表1。从表1可以看出,大蒜苦瓜复配提取液不同比例抑菌效果试验表明,大蒜与苦瓜复配比例为1∶1的试验结果优于其他复配比例。从抑菌效果可以看出,复配液对试验菌均有一定的抑菌效果,对细菌的抑制效果较强,而对毛霉的抑菌效果较弱。
2.2不同质量浓度对提取液抑菌效果的影响不同质量浓度对提取液抑菌效果的影响见表2。从表2可以看出,大蒜苦瓜复配液不同质量浓度抑菌效果试验表明,质量浓度越高抑菌效果越明显,当质量浓度低于一定程度时对毛霉几乎没有抑菌效果。
2.3温度对提取液抑菌效果的影响温度对提取液抑菌效果的影响见表3。从表3可以看出,大蒜苦瓜复配液经不同温度处理后抑菌结果表明,复配液经过70℃以上高温处理后,抑菌效果明显降低;90℃处理后的复配提取液,可能因为高温使复配提取液的抑菌成分被破坏或者挥发,故对供试菌的抑制作用不是很明显,也证明了复配提取液在90℃以上的高温下不稳定。高温处理后,虽然抑菌圈直径大幅度降低,但仍然表现出一定的抑菌效果。
3结论
大蒜苦瓜复配液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌效果,对细菌的抑制效果较强,而对毛霉的抑菌效果较弱。大蒜苦瓜复配比例为1∶1时,抑菌效果较优于其他复配比例,并且质量浓度越高抑菌作用越强,但不适宜高温保存。
作者:昌超秦丹单位:湖南农业大学食品科技学院