食用动物产品外包装消毒范文

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《广东畜牧兽医科技杂志》2014年第三期

1单因子消毒实验

参照《消毒技术规范》（2002版）。试验菌片采用滤纸制作，大小为10mm×10mm。滴染法将菌液滴至滤纸上，置37℃温箱内干燥30min。

1.1密闭时间对消毒效果的影响设试验组、阳性对照组和阴性对照组。试验组：将铜绿假单胞菌（ATCC15442）、枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC9372）菌片各放置于无菌试管内(1片/管)，在集装箱内四角与中央距地面1m处随机放若干含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好集装箱门。在控制空气相对湿度为70%，持续发动臭氧发生器45min（输入臭氧量7.5g），停机后，对菌片分别密闭15min及30min后开集装箱，并取样（在每个时间段消毒完后，集装箱内臭氧浓度降至0.2mg/m3时方可取样）。加盖试管帽后取出试管。取5.0mL稀释液加入上述含菌片的无菌试管中，用电动混合器混合20s，将菌洗下形成菌悬液，培养，并进行活菌计数。阳性对照组为未经消毒处理的同批菌片。阴性对照组用同批次稀释液培养计数。试验重复3次。

1.2输入臭氧量（持续注入臭氧时间）对消毒效果的影响设试验组、阳性对照组和阴性对照组。将枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC9372）菌片放置于无菌试管内(1片/管)，在集装箱内四角与中央距地面1m处随即放1支试管，试管帽置于试管旁，关好集装箱门。在控制空气相对湿度为70%，常温下（28℃）持续发动臭氧发生器45min（输入臭氧量7.5g）及60min（输入臭氧量10g），停机后，各密闭15min。加盖试管帽后取出试管。实验组及对照组样品如1.2.1处理、培养，活菌计数。试验重复3次。

1.3环境湿度对消毒效果的影响试验菌片为铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌黑色变种、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌菌片。在输入臭氧量及停机密闭时间为1.2.1及1.2.2实验确立的最佳输入臭氧量及最佳停机密闭时间的条件下，分别在相对湿度60%以下及70%以上环境下进行消毒。其余步骤同1.2.2试验。

1.4低温低湿（冷藏集装箱环境）对臭氧消毒效果的影响试验菌片为枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC9372）。在1.2.1、1.2.2实验确立的最佳停机密闭时间、最佳输入臭氧量及相对湿度20%、-18℃温度条件下，进行消毒。其余步骤同1.2.2试验。

1.5外包装自然菌的模拟现场杀灭试验

1.5.1常温下自然菌的消毒在集装箱内前、中、后各放置纸箱若干个，在各个纸箱的表面相对一致的相邻区域，分别用规格板标定2块面积各为25㎝2的区块。其中1块供消毒前单独采样，另外1块供消毒后单独采样。做好标定，各采集30个样品。消毒前，将无菌棉拭于含5mL稀释液试管中沾湿，对每个纸箱的标定消毒前一区块涂抹采样，横竖往返各5次，做好标记。以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管内，用电动混合器混合20s，将菌洗下形成菌悬液，作为阳性对照组样本。调节密闭时间、臭氧浓度、空气湿度为1.2单因子消毒试验确立的最佳条件下，实施消毒。消毒完后，采样作为试验组样本，采样方法同消毒前。阴性对照组为同批次稀释液。三组样本一起进行培养、活菌计数。试验重复3次。

1.5.2低温、低湿下自然菌的消毒试验（-18℃）将冷藏集装箱内温度降低至-18℃后，维持低温时的自然湿度，其余步骤同1.3.1试验。

2结果

2.1不同密闭时间对细菌的消毒效果臭氧发生器停机密闭时间为15min时，臭氧对枯草芽孢杆菌黑色变种和铜绿假单胞菌的杀灭率分别为97.95%、100%；停机密闭时间为30min时，则分别为89.36%、99.27%。阴性对照组不长菌。试验结果见表1。

2.2不同输入臭氧量（持续注入臭氧消毒时间）对枯草芽孢杆菌黑色变种的消毒效果输入臭氧量7.5g（持续注入臭氧时间45min）的平均杀灭率为94%，输入臭氧量10g（持续注入臭氧时间60min）的平均杀灭率为99.98%。阴性对照组不长菌。试验结果见表2。

2.3不同相对湿度对细菌的消毒效果空气相对湿度52.3%时，臭氧对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌黑色变种、铜绿假单胞菌的杀灭率分别为99.91%、99.90%、77.20%、99.70%；相对湿度为73.60%，臭氧对四种细菌的杀灭率分别为99.93%、100%、96%、99.97%。阴性对照组不长菌。试验结果见表3。

2.4低温低湿对枯草芽孢杆菌黑色变种的消毒效果-18℃，相对湿度为20%，持续发动臭氧发生器60min（输入臭氧量10g），阳性对照组回收菌数为30000CFU/片，阴性对照组不长菌，臭氧对枯草芽孢杆菌黑色变种的平均杀灭率为87.58%。

2.5常温理想条件下，臭氧对纸箱表面自然菌的消毒效果常温17.4℃，相对湿度为70%，持续注入臭氧时间60min（输入臭氧量10g）的试验条件下，阳性对照组回收菌数为184CFU/片，阴性对照组不长菌，臭氧对集装箱内纸箱表面自然菌的平均杀灭率为100%。

2.6低温低湿条件下，臭氧对纸箱表面自然菌的消毒效果低温-18℃，相对湿度为20%，持续注入臭氧时间60min（输入臭氧量10g）的试验条件下，阳性对照组回收菌数为1360CFU/片，阴性对照组不长菌，臭氧对集装箱内纸箱表面自然菌的平均杀灭率为99.7%。

3讨论

3.1从以上消毒试验情况分析：停机后密闭30min消毒效果并不比密闭15min的消毒效果好。国内有关报道,大多把停止臭氧发生器后作为结束消毒过程[3,4]。此实验也得出密闭时间长对消毒效果影响有限。而《消毒技术规范》指出，出于安全考虑，消毒后至少过30min才能进入，使臭氧浓度降至0.2mg/m3以下再打开箱门。在我们实际试验中，密闭15min后，臭氧浓度已降至0.2mg/m3以下。因此，为了节省通关时间，可以根据实际情况减少密闭时间。

3.2持续注入臭氧时间60min（输入臭氧量10g）消毒效果明显比持续注入臭氧时间45min（输入臭氧量7.5g）效果好；相对湿度72.3%下比相对湿度52.3%下消毒效果好。说明消毒效果与输入臭氧量、环境空气相对湿度密切相关，这与相关文献报道结果一致。

3.3从结果来看，低温低湿环境下对枯草芽孢杆菌黑色变种的消毒效果不理想，低于90%，未达到合格标准。而有文献报道，影响臭氧消毒的因素较多,其中湿度影响较为明显。因此分析可能由于冷藏集装箱内相对湿度仅为20%，湿度较低，不利于杀灭细菌。但根据消毒技术规范（2002）的有关规定，对一般物体表面消毒试验，只要求选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作为指示菌试验即可。从表3的试验数据分析，低湿度对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌消毒效果是合格的；另一方面，低温低湿下，纸箱表面自然菌杀灭率为99.7%，杀灭效果也较理想。

3.4常温下对自然菌的杀灭率达到100%，进一步验证了湿度70%、输入臭氧量10g（持续注入臭氧时间60min）、停机密闭15min条件下对纸箱表面自然菌的消毒效果非常理想。低温、低湿下（冷藏集装箱），纸箱表面自然菌杀灭率为99.7%，杀灭效果较理想。

3.5消毒过程冷却水可循环利用，用电量1.2度，消毒过程约1.5h，与目前出入境检验检疫系统采用其它集装箱熏蒸方法比较，成本低、高效、无毒、无污染。

4结论

利用专用ZA-YD-20G型臭氧生发器，向空气相对湿度70%的集装箱内输入臭氧量10g（持续开机输入臭氧60min），停机密闭15min，对其内装载食用动物产品外包装防疫消毒是有效的；在前述条件下，对装载在冷藏集装箱（低温低湿）内动物产品外包装消毒也是有效的，同时臭氧消毒又具有高效、洁净无二次污染、经济方便等特点，值得推广。

作者：杨仕青陈娜吴欣荣刁德辉邹立芬杨滨吴成园刘小雨单位：珠海出入境检验检疫局北京理工大学珠海学院