姜组织培养范文

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姜为姜科多年生草本植物，根茎肉质，具芳香和辛辣气味。姜不仅是一种常用的蔬菜及调味品，还是一种常用的中药材，有发表、出汗、消痰、止呕、散风、祛寒、止泄、疏肝、导滞、解毒等功效[1]。近年研究表明，姜还具有抗肿瘤、抗氧化作用[2]。姜在生产上长期采用无性繁殖，易感染多种病毒，致使产量和品质降低，严重影响姜的生产和经济效益的提高。本试验通过组织培养技术，对姜进行脱病毒和复壮，探索了工厂化生产优质姜种源、种苗的可能性。

1材料

姜（ZingiberoffcindelRoscoe）的茎尖、幼芽。

2培养条件

基本培养基为MS。

诱导愈伤组织和芽培养基：①MS+NAA0.03mg/L+IAA0.03mg/L+KT0.2mg/L。

芽苗增殖培养基：②MS+NAA0.03mg/L+IAA0.03mg/L+KT0.2mg/L+6-BA0.05mg/L+2，4-D0.025mg/L；③MS+NAA0.03mg/L+IAA0.03mg/L+KT0.2mg/L+6-BA0.2mg/L；④MS+NAA0.03mg/L+IAA0.03mg/L+KT0.5mg/L。

生根培养液：⑤为自来水或干净河水（均不用灭菌处理）。

上述培养基均加入0.8%~0.9%琼脂、3%蔗糖，pH值为5.8~6.0。培养温度23±2℃，光照时间14~15h/d，光强30μmol/m2·s。生根培养也可以室内自然温度、自然光照下培养。

3生长与分化情况

3.1无菌材料的获得

2008年3月上旬从农户发酵厩肥堆中取出经高温发酵热处理（可杀灭部分姜病毒）催芽的姜块，掰取生有健壮芽的姜块，自来水充分冲洗干净，去泥砂，小心剥去芽外层叶鞘，在无菌超净工作台上，将姜块表面、芽周围用75%酒精棉球擦拭2遍，1%有效氯的次氯酸钠溶液浸泡灭菌30min，0.1%HgCl2浸泡灭菌10min，无菌水洗涤5~6次，无菌吸水纸吸干芽块表面水分，再次剥去外层芽鞘，切取0.5~1.0cm长的茎尖或幼芽，作为外植体。

3.2愈伤组织和芽的诱导

将外植体接种到培养基①上，30d后可见到白色、绿色愈伤组织及小芽，50d后见到多个胚状体及芽苗，芽苗高3~5cm，培养80d后芽苗高可达9.0cm。

3.3丛生芽的增殖

将上述芽苗从基部切取或分离（掰取），高于3cm的芽苗均截去上部叶及叶鞘，然后将芽苗接种到丛生芽增殖培养基②~④上，培养40d，可见到丛生的胚状体及芽苗。培养70~80d，形成多丛胚状体及芽苗3~7株，芽苗高3~9cm。这时，胚状体可一丛一丛地切取或分离，芽苗也可一株一株的切取或分离，繁殖系数为5~12。

增殖培养基②~④作用效果相差不大，只是培养基②芽苗叶色较绿，培养基④形成的胚状体及芽苗数稍多。

3.4生根与移栽

将5~9cm高的芽苗从基部分离或切取，转入盛生根培养液⑤的器皿中并固定，然后将器皿口用透明塑料膜或玻璃板盖上封闭，防芽苗因水分蒸发而萎蔫，每10~15d换液1次。培养20d后长出白色根突，30d后长出2~3条1~2cm白色幼根，这时可将塑料膜或玻璃板去掉，敞开器皿培养生根。培养40~50d后长出3~6条根，根长3~7cm，并明显见到密集白色根毛，生根率达99.5%以上。这时将生根苗取出直接移植于大棚的土壤中，成活率达99%以上。该生根方法的优点：①芽苗不污染，也无需无菌条件，克服了用琼脂等固体培养基生根易污染烂苗的难题；②方法简单，取材方便，成本低。

4结论

试验结果表明，通过组织培养与快速繁殖，对姜进行脱毒和复壮，可以克服无性繁殖易使姜感染病毒、致使产量和品质降低的缺点，为工厂化生产优质姜种源、种苗提供了一条有效途径。

姜芽苗增殖至5~9cm高生根，芽苗不污染，无需无菌条件，可直接于自来水或干净河水（不用灭菌处理）的生根培养液中生根，方法简单，取材方便，成本低，且克服了用琼脂等固体培养基生根易污染烂苗的难题，移栽成活率达99%以上。