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《食品科技杂志》2014年第八期
1方法与材料
1.1抗疲劳功能实验
[3]1.1.1小鼠负重游泳实验以自身体重5%的铅皮捆绑于小鼠尾根,置25℃水中游泳,记录小鼠开始游泳至死亡时间。若剂量组小鼠游泳时间显著长于对照组,则可认为该样品可以增强小鼠负重游泳能力。
1.1.2小鼠血清尿素氮的测定置小鼠于30℃水中自由游泳90min。游毕休息60min后自眼内眦采血,测定血清尿素氮值。若剂量组尿素氮含量显著低于对照组,则可认为该样品可以减少疲劳小鼠体内尿素的产生。
1.1.3小鼠肝糖原的测定以安死术处死小鼠后,取肝脏0.1g,加入8mL5%三氯乙酸,用组织匀浆机制成匀浆后以3000r/min速度离心15min,取上清液测定肝糖原含量(蒽酮法)。若剂量组肝糖原含量显著高于对照组,则可判定该样品可以增加小鼠肝糖原储备。
1.1.4小鼠血乳酸测定置小鼠于30℃水中自由游泳10min,分别在游泳前、游泳后即时及休息20min后采血进行乳酸测定。小鼠血乳酸曲线下面积计算方法为:小鼠血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸含量值+3×游泳后0min的血乳酸含量值+2×游泳后休息20min的血乳酸含量值)若剂量组血乳酸曲线下面积显著小于对照组,则可判定该样品可以减少小鼠运动后的血乳酸堆积。
1.2耐缺氧功能实验[3]
1.2.1常压耐缺氧实验准备40只250mL磨口瓶,各加入5g钠石灰,将小鼠放入瓶中(每瓶1只),用瓶塞和凡士林密封瓶口,记录小鼠存活时间。若剂量组小鼠存活时间显著大于对照组,则可判断为受试样品可以增加小鼠常压下的缺氧存活时间。
1.2.2亚硝酸钠中毒存活实验以2.4mg/10gBW用量给小鼠腹腔注射NaNO2(0.1mL/10gBW•ip),注射完毕开始计时,记录小鼠注射后存活时间。若剂量组小鼠的存活时间显著大于对照组,则可认为受试样品可以延长小鼠亚硝酸钠中毒后的存活时间。
1.2.3急性脑缺血性缺氧实验将小鼠自颈部快速断头,记录小鼠自断头至张口呼吸停止的时间。若剂量组小鼠的呼吸时间显著长于对照组,则判定该样品可以在急性缺氧的状态下延长小鼠的存活时间。
1.3实验数据统计用SPSS13.0软件对实验数据进行分析比较。先用单因素方差分析法对各组数据进行总体差异的检验,再用Dunnett法进行各剂量组与对照组之间的两两比较。
2结果
2.1抗疲劳实验结果由表1可见,剂量组小鼠的负重游泳时间均大于对照组,且差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。高、中剂量组的血乳酸及全部剂量组的尿素水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。而各组肝糖原含量之间无显著差异(P>0.05)。
2.2耐缺氧实验结果由表2可见,高、中剂量组的断头呼吸时间及全部剂量组的缺氧存活时间均显著大于对照组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。各组小鼠在亚砷酸钠中毒后的存活时间相比较,结果无显著差异(P>0.05)。
3讨论
红景天药用历史久远,早在公元8世纪在国唐代就已成为藏医的常用药。首载红景天的藏医药著作是《四部典医》,明代李时珍《本草纲目》记载“红景天,本经上品,祛邪恶气,补诸不足”是“已知补益药中所罕见”,主要功效是扶正固本,补气养血,清热润肺。由于红景天性味平和,即使常年服用,也不会出现口干、唇燥等副作用,因此,红景天已被广泛地用于治疗高原病、心脑血管疾病等,我国和前苏联等有红景天资源的国家,还把它加工为保健品,专供飞行员、运动员、宇航员、潜涵作业员等特殊岗位者,取得了很好的效果。近年来,红景天制品逐渐走入百姓市场,因其对脑力和体力的双重缓解效果良好,越来越受到城市上班族的青睐。机体(包括脑部)的持续运动能力,取决于体内能源物质的储备量及供氧是否充足。在有氧状态下,机体先动用糖原为能源物质,糖原耗尽后,机体会动用蛋白质供能,此时机体内就会产生蛋白质的代谢物——尿素,所以机体内糖原和尿素含量均可以作为机体运动能力和疲劳水平的间接反映。在缺氧环境下,机体依然以糖原作为能源物质,所不同的是,此时的糖代谢过程是无氧酵解,无氧酵解不仅产生的能量非常少,而且其产物乳酸是导致机体疲劳感的直接因子,故而我们可以通过运动后机体的乳酸含量来判断机体对氧的摄取和利用能力。本研究各实验结果表明,红景天可以提高小鼠的运动耐力,减少运动后体内的尿素含量和乳酸堆积,对肝糖原的储备量无明显作用。综合实验结果说明红景天具有缓解体力疲劳的能力。
即使环境中氧充足,如果机体的运动量过大或持续时间过长,由于心肺能力的瓶颈,体内的肌肉和神经组织仍然会缺氧。如果机体对氧的摄取、运输和利用能力强,就能产生更多的能量,同时减少无氧酵解产生的乳酸,延缓疲劳的出现,所以机体对缺氧的耐受力直接影响到疲劳出现的时间先后。研究结果表明,红景天可以增加小鼠在缺氧状态下的存活时间和急性脑缺血缺氧状态下的呼吸时间,说明该受试样品能增强小鼠耐缺氧的能力。实验结果还提示我们,红景天增强机体缺氧耐受力的机制可能与改善心肺功能有关,其抗疲劳机制或一致。亚硝酸钠的毒性机理是阻断细胞呼吸链,红景天中的功效因子可能无法拮抗这一中毒作用,故各剂量组的实验结果与对照组结果相近,说明红景天不能降低亚硝酸钠的毒作用。
对于红景天功效的细胞分子机制,国内学者也进行了一定的研究,目前普遍认为,红景天的主要功效成分为红景天苷和黄酮,其作用机制涉及清除自由基、增加抗氧化酶活性、激活细胞内与能量代谢相关的Ca2+-Mg2+—ATP酶、保护低氧状态下的心肌细胞等多个方面。红景天不仅具有多方面的药理作用,而且得益于其药食同源的天然优势,长期服用安全无副作用,近年来随着种植学科的发展,红景天已经实现了人工栽培,相信红景天在职业疲劳人群和老年人群中将会有广阔的市场前景。
作者:李彬彭亮张洁宏傅伟忠王彦武黄超培单位:广西自治区疾病预防控制中心