油菜种质资源菌核病的鉴定范文

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《贵州农业科学杂志》2014年第四期

1材料与方法

1．1供试材料100份贵州地方油菜种质资源，由贵州省油料研究所提供。其中，白菜型油菜品种55份，芥菜型油菜品种45份。菌核菌株是经致病性鉴定筛选出的强致病纯化菌株7－3［9］，由贵州省油料研究所实验室保存。根据我国油菜品种的抗病性鉴定要求，将油菜抗菌核病鉴定的对照品种定为中油821（CK），由中国油料研究所育成。

1．2试验设计试验于2012年9月至2013年5月在贵州省农业科学院油料研究所试验地进行。试验采用随机区组排列，3次重复，每重复100个小区，每小区种植3行，每行8窝，行距40cm，窝距25cm。在花期进行菌核病人工麦粒接种，每处理接种8～10株，每个品种共接种20～30株。油菜成熟期调查接种植株的发病程度，计算发病株率和病情指数。

1．3菌核接种贵州地方油菜种质资源菌核病的抗（耐）性鉴定参照冉毅等［10］改进的麦粒接种法。先将麦粒洗干净，放入沸水中煮10～15min，再放入高温灭菌锅灭菌30min，后将灭菌麦粒均匀放入已灭菌的PDA平板培养基上，接种强致病性纯化菌核菌株7－3，后将整个培养基置于25℃恒温箱内培养4～5d，待整个培养基内的麦粒均长满油菜菌核病菌丝后取出进行油菜菌核病感染人工接种。接种时，将消毒大头针插入长满菌丝的麦粒，用消毒小刀在接种油菜的茎秆上划一条小口，将大头针插入伤口（注意：将布满菌丝的麦粒面与伤口接触），然后用沾满无菌水的棉球覆盖住麦粒，用保鲜膜包裹好接种麦粒覆盖有棉球的油菜茎秆，保鲜膜两头用胶布缠好，以防水分蒸发和保鲜膜脱落。最后用注射器将无菌水注入到棉球上，以达保湿效果。

1．4菌核病分级标准在油菜成熟期调查接种菌核病植株的感病情况，并将其划分为5个等级［11］。1）0级。全株无病。2）1级。全株1／3以下分枝（含果轴，下同）发病或主茎有小型病斑；全株受害角果在1／4以下（含病害引起的非生理性早熟和不结实，下同）。3）2级。全株1／3～2／3分枝数发病，或1／3以下分枝发病而主茎中上部有大型病斑；全株受害角果为1／4～1／2。4）3级。全株2／3以上分枝发病，或2／3以下分枝发病而主茎中下部有大型病斑；全株受害角果为1／2～3／4。5）4级。全株绝大部分分枝发病，或多数主茎有病斑，或主茎下部有大型绕茎病斑；全株受害角果达3／4以上。

1．5抗性等级划分用相对抗性指数（RRI）划分油菜菌核病的感染等级。油菜菌核病的抗性等级划分标准：RRI≤－1．2为高抗，RRI≤－0．7为中抗，RRI＜0为低抗，RRI≥0为低感，RRI≥0．9为中感，RRI＞0．9为中感，RRI＞2．0为高感，共7个等级。相对抗性指数RRI＝LN（100－DICK）／［DICK－LN（100－DI）／DI］式中，DICK为对照病情指数（对照为抗病性明确的中抗材料），DI为供试品种病情指数。1．6数据统计用Excel2003进行数据统计分析。

2结果与分析

2．1抗（耐）菌核病鉴定由表可知，在鉴定的100份贵州地方油菜种质材料中，有高抗材料共2份，占100份鉴定材料的2％；中抗材料4份，占4％；低抗材料12份，占12％；低感材料共60份，占60％；中感材料22份，占22％。其中，在鉴定的55份白菜型油菜种质材料中，中感材料22份，占鉴定材料的40％；低感材料28份，占51．1％；低抗材料5份，占9．1％。在鉴定的45份芥菜型油菜种质材料中，低感材料32份，占鉴定材料的71．1％；低抗材料7份，占15．6％；中抗材料4份，占8．9％，分别是安龙高油菜、毕节大黑油菜、镇远花花油菜、晴隆苦油菜，其病情指数分别为33．3、32．7、36．1和33．3，相对抗性指数分别为－1．01、－1．04、－0．88和－1．01；高抗材料2份，占4．4％，分别是清镇牛尾油菜（一）和黔西黄油菜，其病情指数分别为25．0和26．7，相对抗性指数分别为－1．32和－1．41，即鉴定的贵州白菜型油菜资源材料中，中抗以上材料为0；在芥菜型油菜中，中抗以上材料有6份，占45芥菜型油菜资源的13．3％。说明，贵州白菜型油菜地方种质对菌核病的整体抗性较差，而芥菜型油菜地方种质对菌核病的整体抗（耐）性优于白菜型油菜。

2．2抗性评价在鉴定的100份贵州地方油菜种质资源中，清镇牛尾油菜（一）和黔西黄油菜2个芥菜型油菜地方品种表现为高抗菌核病；安龙高油菜、毕节大黑油菜、镇远花花油菜、晴隆苦油菜4个芥菜型油菜地方品种表现为中抗。在此6个芥菜型地方油菜种质中，2个表现为高抗的地方种质可直接作为芥菜型油菜抗病育种材料进行利用，其农艺性状和产量表现较好的还可直接用于土壤较贫瘠的山地种植；4个表现中抗的地方种质也可根据不同目标改良某些性状后直接应用于育种或生产；其他抗性较差的材料，可根据其农艺性状表现或某些优良特性等进行选择性改良利用或作为资源材料保存。从鉴定的100份贵州地方油菜资源材料的来源看，来源于同一地域的贵州地方油菜品种，其抗性不一定相同，如黔西黄油菜经鉴定表现为高抗，而另外2个来源于黔西的黔西白花油菜和黔西川油菜（2）－2则表现为低感和低抗；来自榕江县的白菜型油菜地方品种榕江油菜表现为中感，而榕江本地油菜则表现为低抗、榕江苏州油菜表现为低感；来自赫章县的赫章小白油菜表现为中感，而赫章油菜则表现为低感、新田野油菜为中感。说明，贵州地方油菜种质资源具有丰富的遗传多样性，为油菜育种寻找高抗资源打下了基础。

3结论与讨论

1）试验选取来源于不同地域的100份贵州地方油菜种质资源为材料，通过人工麦粒接种法鉴定其抗（耐）菌核病能力的结果显示，100份地方油菜种质资源材料中，清镇牛尾油菜（一）、黔西黄油菜2个芥菜型油菜种质表现为高抗油菜菌核病；安龙高油菜、毕节大黑油菜、镇远花花油菜、晴隆苦油菜4个芥菜型油菜表现为中抗油菜菌核病，高抗和中抗种质资源均可直接或间接作为选育抗（耐）芥菜型油菜菌核病的资源材料进行利用。2）经鉴定100份贵州地方油菜种质资源中，高抗菌核病的材料有2份（均为芥菜型油菜），占100份鉴定材料的2％，分别是清镇牛尾油菜（一）和黔西黄油菜，其病情指数分别为25．0和26．7，相对抗性指数分别为－1．32和－1．41；中抗材料4份（均为芥菜型油菜），占8．9％，分别是安龙高油菜、毕节大黑油菜、镇远花花油菜、晴隆苦油菜，其病情指数分别为33．3、32．7、36．1和33．3，相对抗性指数分别为－1．01、－1．04、－0．88和－1．01。说明，贵州白菜型地方油菜种质资源对油菜菌核病的整体抗性较较弱，但芥菜型地方油菜种质资源抗（耐）菌核病的能力优于白菜型油菜。3）经鉴定在55份白菜型油菜种质资源中高抗（耐）材料为0，感病（中感、低感）材料50份，占整个白菜型油菜种质的91％，低抗材料5份，仅占9．1％；在45份芥菜型油菜资源中，低感材料占参试芥菜型油菜的71．1％，抗病（低抗、中抗、高抗）材料占28．9％。说明，芥菜型油菜整体抗耐菌核病的能力优于白菜型油菜，在芥菜型油菜资源材料中获得高抗（耐）材料的几率较大。

作者：王璐璐单位：贵州省油料研究所