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(一)测量过程简述
(1)测量依据:JJG 700—1999《气相色谱仪检定规程》。
(2)测量环境条件:温度(15~25)℃,相对湿度40%~68%。
(3)测量标准:江苏省计量科学研究院提供的标准物质。具体为氮中甲烷标准气体。
(4)被量对象:气相色谱仪。
(5)测量方法:气相色谱仪(以下简称仪器)是在规定了仪器载气流速稳定性、柱箱温度稳定性、程序升温稳定性的情况下,用微量注射器注入一定体积的标准物质,利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定相间的分配及吸附系数不同,由载气把气体试样或汽化后的试样带入色谱柱中进行分离,并通过检测器进行检测的仪器。根据各组分的保留时间和响应值进行定性/定量分析。
(6)评定结果的使用:在符合上述条件下的测量结果,一般可参照使用本不确定度的评定方法。
(二)数学模型
火焰离子化检测器(FID)
= (2)
式中:FID的检测限(g/s);
基线噪声,(mV);
标准物质的进样量,(g);
标准物质中溶质的峰面积,(mV·s);
(三)各输入量的标准不确定度分量的评定
对某台气相色谱仪检测器为TCD的仪器,在室温(25±1)℃的环境下进行检定。
1标准物质的相对标准不确定度的评定
氮中甲烷标准气体相对不确定度通常由标准物质证书给出,其定值不确定度为1.5%,包含因子=2,则:
=0.015/2=0.0075
2微量注射器校准值的相对标准不确定度的评定
微量注射器的体积刻度是重要的不确定度来源之一,所以,微量注射器必须经校准后才能使用。根据上级校准证书中给出的测量不确定度为0.5%,k=2,则
=0.005/2=0.0025
3 峰面积测量值的相对标准不确定度的评定
峰面积或峰高测量不确定度主要为进样的进样的重复性,规程规定进样6次,定量重复性为不大于3%,则:
=0.03/=0.0122
4基线噪声测量的相对标准不确定度的评定
对于工作站而言,基线噪声引起的一般为0.01。
(四)合成标准不确定度及扩展不确定度的评定
1灵敏系数
数学模型: =
灵敏系数: =1 =1=-1
2各不确定度分量汇总及计算表
各不确定度分量汇总及计算表
5扩展不确定度的评定
[关键词]果蝇S2细胞;荧光素酶;启动子;报告基因;转染
在研究基因功能的过程中,不可避免地要研究基因的调控机制,而基因的表达产物复杂且难以对其定量和定性,要在细胞生长周期的任意点了解细胞的基因表达产物更是非常困难。但报告基因分析系统的发现给基因调控与表达的研究带来了新的希望。近年来,报告基因系统的研究取得了快速的发展。报告基因是一种编码某种易于检测蛋白质或酶的基因,通过它的表达产物来标定目的基因的表达调控,因此,对真核基因调控的了解可以不通过直接测定调控元件调节转录速率的能力,而是把顺式调控元件与报告基因的序列连接起来,在基因转录的过程中测定报告基因转录产物的表达量,从而判断相应的顺式作用元件的调控能力。作为报告基因必须具备以下特点:(1)由原核基因编码的基因产物必须区别于转染前真核细胞内任何相似的产物;(2)细胞内其他基因产物不会干扰报告基因产物的检测;(3)报告基因编码产物的检测应该快速、简便、灵敏度高、重复性好。该技术的主要优点是灵敏度高、可信性大及检测方便且适合大规模检测,目前已广泛应用于启动子分析、监控转基因及其表达、细胞的信号转导与药物的筛选等多种细胞事件[13]。荧光素酶(LUC)报告基因来源于北美萤火虫,能催化萤火虫的氧化性羧化作用,同时发射出光子,可被光度计捕获定量。LUC的分析具有快速、方便、线性较好等优点,正成为最广泛使用的报告基因。pGL3系列的质粒就是带有LUC报告基因的质粒载体,我们可以利用这一系列的工具载体研究果蝇中基因的表达调控方式,其中pGL3Control带有SV40的启动子和增强子。SV40是一种猴病毒, 它的增强子/启动子区域可使其在大多数细胞株中有高度的组成性表达,因而广泛用于构建真核基因的表达载体,因此pGL3Control可作为检测体系中的阳性对照。但由于SV40启动子在果蝇S2细胞中不表达,所以我们将果蝇actin 5C 蛋白的启动子(pac)[4]构建到质粒pGL3Basic中,得到了高表达LUC的重组载体pGL3pac。这一质粒的构建可为研究果蝇中基因的调控方式奠定基础,同时也可为研究其他报告基因在不同细胞中的表达提供借鉴作用。
1 材料和方法
1.1 菌株、质粒及试剂大肠杆菌DH5α(作者所在实验室保存),质粒pGL3Basic(Promega公司),pAc5.1/V5His/LacZ(Invitrogen公司),限制性内切酶XhoⅠ、HindⅢ及T4连接酶、DNA聚合酶(TaKaRa公司),小量胶回收试剂盒(TaKaRa公司),中量质粒抽提试剂盒(Invitrogen公司),LUC检测试剂盒(Promega公司),S2细胞Schneider培养基(Invitrogen公司),胎牛血清(Gibco公司)。
12 方法
1.2.1 pac启动子的获得 以pAc5.1/V5His/LacZ质粒为模板进行PCR扩增。上游引物5′GCGCCTCGAGCTTCAAGGAATTAATTCTATATTCT3′,下游引物5′GCGCAAGCTTGGTCTCTGGATTAGACGACT3′(划线部分分别为XhoⅠ和HindⅢ酶切位点)。PCR反应参数为:95 ℃ 5 min;94 ℃ 1 min,60 ℃ 1 min,72 ℃ 2 min,共30个循环; 72 ℃延伸10 min。
1.2.2 重组质粒的构建鉴定与中量抽提纯化 PCR产物分别经XhoⅠ、HindⅢ双酶切后进行琼脂糖凝胶电泳,割胶回收酶切片段,与同样经酶切、割胶回收的pGL3Basic质粒于16 ℃连接过夜,连接产物转化大肠杆菌DH5α,并涂布于含氨苄青霉素(终质量浓度为50 mg・L-1)的固体培养基上,37 ℃过夜培养。挑阳性克隆提取质粒,酶切和测序鉴定,鉴定正确的质粒经中量质粒抽提试剂盒提取纯化。
1.2.3 S2细胞培养及瞬时转染 S2细胞由本实验室冻存,使用Schneider培养基,补以10%胎牛血清。S2细胞培养在28 ℃无CO2培养箱中,根据其生长状态,按一定比例每3 d传代1次。待细胞生长状态良好时进行瞬时转染分析。转染时在12孔板中接种1×106个细胞,加入1 ml含10%胎牛血清的Schneider培养基,置28 ℃无CO2培养箱中培养6~16 h[细胞生长至对数生长期达(2~4)×106ml-1],在1.5 ml Eppendorf 管中准备以下试剂:溶液A,12 μl 2 mol・L-1 CaCl2,5 μg重组质粒,1 μg pAcLacZ质粒,加入双蒸水至总体积为100 μl,混匀待用;溶液B,100 μl2×HBS。将A溶液缓慢加入B溶液中,轻轻混匀,室温放置30 min,以形成Ca3PO4DNA复合物。将Ca3PO4DNA复合物逐滴加至细胞上,混匀后置28 ℃无CO2培养箱中继续培养,24 h后用含10%胎牛血清的Schneider培养基给细胞换液。细胞转染48 h后裂解细胞,先吸去培养液,用PBS洗2遍,在每个培养孔中加入200 μl Reporter lysis buffer,保证充分覆盖细胞,冻融1次以确保细胞裂解,将细胞裂解液移至1.5 ml Eppendorf管中,振荡10~15 s,离心(12 000×g,2 min,4 ℃),转移上清于新管。制备好的细胞裂解液可用于测定或贮存于-70 ℃备用。
1.2.4 LUC和β半乳糖苷酶(βgal)活性测定 取制备好的细胞裂解液进行LUC和βgal活性的测定。LUC活性测定前取20 μl平衡至室温的细胞裂解液,加入80 μl LUC底物,迅速混匀,置光度计中,记录读数。βgal活性测定根据分子克隆的方法,在每个用于测定转染细胞裂解物的Eppendorf管中加入100×Mg2+ 3 μl、1×ONPG 66 μl、细胞裂解物30 μl、0.1 mol・L-1Na3PO4 201 μl,混匀。置37 ℃保温30 min,以500 μl 1 mol・L-1 Na2CO3终止显色反应。置酶标仪上,在波长420 nm处读光吸收值来表示βgal的活性,以共转化的βgal活性作为内源对照,以/βgal活性的值为系数,比较各组在转化效率相同时LUC活性的相互关系。以没有任何插入片段时pGL3Basic的LUC活性为1,比较加上插入片段pac启动子后的LUC活性增加的倍数,即LUC的相对活性,以反映LUC基因表达的相对水平。
2 结
果
2.1 重组载体的构建鉴定与纯化以pAc5.1/V5His/LacZ质粒为模板,通过上游引物和下游引物PCR扩增获得pac启动子2 500 bp基因片段(图1),用XhoⅠ、HindⅢ双酶切后克隆到载体pGL3Basic中(图2)。提取重组阳性质粒,XhoⅠ、HindⅢ双酶切后得到2 500 bp的基因片段(图1)。经测序鉴定,阅读框架不变。鉴定完成的重组质粒经过质粒中量抽提试剂盒提取纯化,得到符合转染所需的高纯度高浓度的重组质粒pGL3pac,经测定其260 nm的OD值,计算得到其浓度为0.99 μg・μl-1,A260 nm/A280 nm为1.81。
2.2 S2细胞的瞬时转染分析转染结果显示,pGL3Basic和pGL3Control中LUC的相对活性无明显差异,提示SV40启动子在果蝇S2细胞中不表达或低表达。而pGL3pac中插入了pac启动子,LUC的相对活性明显增高。pGL3pac在果蝇S2细胞中LUC的活性是pGL3Basic LUC活性的近2.7万倍。见表1。表1 瞬时转染后各组分酶活性值
3 讨
论
LUC是现在常用的一种报告基因,因其无放射性、检测快、灵敏度高、半衰期短、线性好等特点而得到广泛的应用。我们构建了pGL3pac这一重组质粒,使得在果蝇S2细胞中能够高表达LUC,为进一步的实验提供了一个好的工具。首先,它可作为基因启动子分析研究中的阳性对照,通过与该重组质粒的转染结果比较,从而判定不同顺式作用元件对转录的影响。其次,我们可以将目的基因某一区域的启动子元件插入到重组质粒pGL3pac启动子的上游或下游,通过LUC表达量改变的放大作用,进一步分析这些启动子元件的生物学作用,找到在转录过程中起到关键作用的核心启动子序列。在此基础上,我们还可以了解特定的反式作用因子对基因表达的影响。再次,还可以将目的基因自身的5′端或3′端的UTR序列插入到LUC基因的上下游,通过检测LUC的水平,为翻译水平的调控提供依据。在实验过程中,有很多方面值得我们注意。第一,在重组质粒利用中量试剂盒抽提纯化时,想得到浓度高的产物,应注意在菌液的培养量和培养时间上进行调整。因实际环境的不同,按照操作说明所示的条件往往难以得到足够的质粒量,通过增加培养的菌液量和延长培养时间可取得很好的效果。由于所得的质粒是细胞转染所需,故在抽提纯化时应特别强调无菌的原则。第二,在转染实验中,重组质粒pGL3pac必须共同转染表达另外一带有报告基因的质粒以衡量转染效率。我们选择了pAcLacZ,该质粒含lacZ基因,能够表达βgal,利用βgal水解底物ONPG的能力计算出βgal的活性,以此作为内源对照衡量不同组分的转染效率。这个质粒与目的质粒的转染比例对于结果有很大的影响。因βgal的活性在0.2~0.8之间符合线性范围,所以可根据这一要求摸索合适的转染比例,通过实验可得出两者在5∶1浓度比时较合适。另外,还可以选择带有其它报告基因的质粒载体,如phRL是一种带有海肾荧光素酶(RLUC)报告基因的质粒载体,如果选择phRL作为共转质粒则可通过在一管细胞裂解液中先后加入不同的底物,用同种仪器测定酶的活性即可,因其测定的两种酶的活性在同一数量级而且减少实验步骤,使实验数据更加可靠,实验过程更加简便[5]。第三,我们是通过瞬时转染得出结论,为排除一些因素的影响,转染实验必须重复3或4次,本实验的转染数据即是3次实验的平均值。在实验中我们选择了pac替代pGL3Control中的SV40启动子,主要是因为果蝇actin 5C蛋白组在果蝇体内为组成性表达且不需诱导,因此,利用pac作为替换启动子,不仅能产生较好的效果而且可简化实验操作。这一质粒的构建不仅为我们在细胞水平利用报告基因系统研究果蝇中基因的表达调控方式提供工具载体,而且它的构建方法提示我们可通过相同的途径构建适合转染不同类型细胞的带有报告基因的质粒载体,作为相应研究的基础。
[参考文献]
[1]LOUISE H. Reporter gene technology:the future looks bright [J].Biochem Pharmacol,1999,58:749757.
[2]GAMBHIR S S,BARRIO J R,HERSCHMAN H R,et al. Assays for noninvasive imaging of reporter gene expression [J]. Nucl Med Biol,1999,26:481490.
[3]LECLERC G M,BOOCKFOR F R,FAUGHT W J,et al.Development of a destabilized firefly luciferase enzyme for measurement of gene expression [J].Biotechniques,2000,29:590596.
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图1
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图2
图3
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1 资料与方法
1. 1 一般资料 中国免疫规划监测信息管理系统、疾病预防控制信息系统异地报告的AFP病例个案调查表、随访表;异地报告AFP病例就诊情况调查表;实验室数据为河南省疾病预防控制中心(CDC)实验室标本检测结果。
1. 2 方法
1. 2. 1 资料分析 利用Excel和中国免疫规划监测信息管理、疾病预防控制信息系统软件对数据整理统计分析。
1. 2. 2 调查方法 按照《河南省异地AFP病例在归属地就诊情况调查方案》对异地报告的AFP病例就诊情况开展调查。
1. 3 平顶山市异地报告AFP病例定义 外省、市医疗机构报告、且麻痹前在外居住
2 结果
2. 1 异地报告AFP病例发病情况 2008年~2012年, 通过AFP病例监测系统现住址为平顶山户籍统计, 平顶山市共发生AFP病例144例, 其中本地报告77例, 占53.47%;异地报告67例, 占46.53%。
2. 2 流行病学特征
2. 2. 1 地区分布 67例异地报告的AFP病例分布在全市10个县(市、区), 最多为汝州市22例, 占32.84%;最少石龙区2例, 占2.99%。鲁山县、郏县、宝丰县、汝州市病例合计50例, 占74.63%。
2. 2. 2 时间分布 5年累计每月均有异地报告的AFP病例。其中以夏秋季报告较多, 7月~10月份共报告38例, 占异地报告病例总数的56.72%, 其余月份发病构成基本相当。
2. 2. 3 人群分布 67例异地报告AFP病例中, 最大年龄14岁, 最小的7月龄。0~4岁发病41例, 占61.19%;5~9岁18例, 占26.87%;10岁以上8例, 占11.94%。其中男性37例, 女性30例, 男女性别比例为1.23∶1。
2. 2. 4 免疫史分布 所有异地报告病例中, 口服脊灰减毒活疫苗(oral poliomyelitis attenuated live vaccine, OPV)≥3剂次的61例, 占91.04%;
2. 3 AFP病例异地报告来源 平顶山市2008年~2012年异地报告的67例AFP病例, 河南省外(北京市首都医科大学附属儿童医院)报告1例。河南省内其他地市报告66例, 其中省会郑州市报告63例, 占94.03%(郑州市儿童医院22例、河南省人民医院15例、郑州大学第一附属医院16例、郑州大学第一附属医院5例、其他医院3例);洛阳市报告2例, 漯河市报告1例。
2. 4 病例就诊及报告情况 67例异地报告的AFP病例中, 麻痹后在平顶山市辖区医疗机构就诊的有55例, 占82.09%, 见表3;其余12例麻痹后, 家长不信任当地诊疗水平直接到外地市医疗机构就诊, 占17.91%。本地就诊55例病例中, 首次诊断为脑动脉炎22例, 疑似脑病14例, 缺钾、钙8例, 待查6例, 不详5例, 接诊医生均以非AFP病例为由未进行报告, 漏报率100%。
2. 5 标本采集及检测结果 异地报告的67例AFP病例中, 44例采集了合格粪便标本, 占65.67%;剩余23例未采集合格粪便标本, 占平顶山市2008年~2012年不合格粪便标本AFP病例总数的95.83%, 其中20例超时采便, 2例未采便, 1例为死亡病例。采集到标本的64例病例中, 分离到非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus, NPEV)6例, 分离率9.38%;分离到脊灰病毒(poliovirus, PV)2例, Ⅰ型与Ⅰ+Ⅲ型各1珠, 经国家脊灰实验室进行型内鉴定, 均为疫苗相关珠病毒。
3 讨论
平顶山市已连续19年无脊灰野病毒(wild poliovirus, WPV)病例报告, 2000年包括我国在内的西太区实现区域无脊灰目标, 消灭脊灰工作成效显著。近年来全球消灭脊灰形势严峻, 与我国接壤的印度、巴基斯坦、阿富汗本土脊灰流行趋势上升, 2010年塔吉克斯坦脊髓灰质炎疫情暴发, 说明脊灰野病毒输入无脊灰地区的高危性仍然存在[2]。2011年8月在我国新疆地区, 发生了国内实现无脊灰目标后首次输入性脊灰野病毒疫情传播。对AFP病例的监测正是及早发现这次疫情的关键所在。由此可见AFP病例监测对维持无脊灰状态的重要性, 而异地报告的AFP病例监测质量, 将直接影响整个AFP病例监测系统敏感性等关键指标。
分析发现, 平顶山市2008年~2012年异地报告AFP病例占总病例数的近50%, 全市90%以上的不合格粪便标本病例在其中。AFP病例监测系统仍存在问题:①所有异地报告病例中, 有74.6%的病例分布在平顶山辖区偏西北方向三县一市, 这些地区与河南省会郑州市及下辖洛阳市相邻, 农村、偏远山区人口较多, 来往交通十分便利, 显示县乡两级AFP病例监测环节薄弱, 导致部分病例就诊后未及时报告, 或直接去外地市就诊;②82.1%的病例麻痹后在平顶山市辖区医疗机构首次就诊, 其中就诊两次以上的36例, 占65.5%, 在县、地两级医疗机构就诊过的病例分别占50.9%、38.2%, 就诊科室中在儿科就诊的病例占78.2%。表明对辖区医务人员培训不到位, AFP病例识别诊断能力不足, 病例报告意识淡漠, 致使越来越多的AFP病例因诊断不清而漏报;③67例病例中, 7~10月份病例占56.7%, 比其他月份发病明显增多, 显示夏秋季为发病高峰, 有文献报道AFP病例中病毒感染有明显的季节性[3, 4]。而且61.2%的病例集中在4岁以下儿童, 提示要加强夏秋季节对婴幼儿肠道病毒感染的预防措施。④有近10%的异地报告病例OPV免疫史
综上所述, 为及时有效地发现输入的WPV病例或发生的疫苗衍生脊灰病毒(vaccine-derived poliovirus, VDPV)病例, 维持平顶山市无脊灰状态。今后要加强对各级、各类疾病控制、医疗机构的培训与督导, 增强业务人员责任心。提高儿科等相关科室临床医师AFP病例鉴别诊断能力、首诊及时报告意识, 使全市AFP病例监测系统工作质量保持在较高水平。同时, 要持续做好国家免疫规划相关疫苗的常规免疫和强化免疫工作, 提高OPV接种率, 建立有效的人群免疫屏障。
参考文献
[1] 卫生部.全国急性弛缓性麻痹( AFP) 病例监测方案.2006.
[2] 田炳均, 童文彬.2010年塔吉克斯坦暴发脊髓灰质炎:病例输入的危险性和对欧洲区脊髓灰质炎监测的影响.中华流行病学杂志, 2010, 31(6):646.
[3] 蒋玉艳, 班华国, 马宇燕, 等.广西急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒感染分析.应用预防医学, 2010, 16(5):276-277.
【关键词】高效液相色谱法;维生素A;数学模型;不确定度
【Abstract】Objective:Comprehensive to analyze the sources and influencing factors of content uncertainty of Vitamin A in health food by HPLC.Methods:According to the testing process,a mathematical model was established to analyze the sources and influencing factors in uncertainty,through the quantitative analysis of uncertainty,obtained the expanded uncertainty.Result:The expanded uncertainty of Vitamin A in health food by HPLC was 1.843%.Conclusion:The main sources of uncertainty of Vitamin A in health food by HPLC was regulating the concentration of standard solution,preparation of standard solution and the repeatability of method.
【Keywords】HPLC;Vitamin A;Mathematical model;Uncertainty
引言
维生素A能够调节人体的多种生理机能,增强机体免疫能力,在调节体内各方面的代谢及促进骨骼的生长发育上有着极其重要的作用,同时它也参与视网膜视紫质的合成与再生,维持正常的视觉反应,以降低夜盲症和视力减退的发生[1,2]。而维生素A摄入过量也会引起副作用,可损害脑组织等,因此维生素A制剂含量的控制十分重要[3]。本文根据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》[4],并参考JJG 196-2006《常用玻璃量器检定规程》[5],结合检测方法和数学模型,对高效液相色谱法测定保健食品中维生素A的含量进行不确定度评估,找出不确定度主要来源,为方法的优化和评定测量结果提供依据。
研究部分
1.提要
1.1测量方法:GB/T 5009.82-2003。
1.2基本原理:试样经过高温皂化、提取处理后,用乙醚萃取,蒸干乙醚后用乙醇定量溶解。利用高效液相色谱仪对样品中的维生素A进行分离和测定。
2.材料与方法
2.1材料
2.1.1仪器设备:
Agilent-1260高效液相色谱仪; KQ-500VED型超声仪;
EMS-50型恒温水浴锅; UV-2450紫外分光光度计;
R-202旋转蒸发仪; XP-205分析天平;
MS-304S分析天平。
2.1.2试药:
乙醇(AR);抗坏血酸(AR);氢氧化钾(AR);乙醚(AR);无水硫酸钠(AR);甲醇(色谱纯)。
芘(厂家:DR,批号:01116,纯度:99.0%);维生素A(厂家:SIGMA,批号:BCBG2044V,纯度:98.0%)。
2.2色谱条件:
色谱柱:CNW Athena C18-WP(5μm,150mm×4.6mm);流动相:甲醇:水=(94:6);
流速:1.0mL/min;柱温:40℃;检测波长:300nm。
2.3分析步骤:
2.3.1内标溶液的配制
精密称取芘内标物49.28mg至1000ml容量瓶中,用乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为内标溶液。
2.3.2标准储备母液的配制
精密称取维生素A对照品12.35mg至100ml容量瓶,用乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为标准储备母液。
2.3.3标准溶液的配制
精密量取标准储备母液0.5mL,1.0mL,2.0mL,3.0mL,5.0mL,置于25mL棕色容量瓶中,精密加入内标溶液3mL,用乙醇稀释至刻度,摇匀,即得5个不同浓度的标准溶液。
2.3.4标准溶液的浓度校正
精密量取1mL标准储备母液至50mL容量瓶中,加入适量乙醇摇匀并定容至刻度,以乙醇为空白,在325nm波长处测定,其平均吸光度为0.4376。维生素A的吸光系数为1835。
2.3.5样品处理
2.3.5.1皂化
本实验样品为维生素A维生素D软胶囊(儿童型)。取20粒样品,挤出内容物,搅拌均匀。精密称取试样0.1g,置于250mL锥形瓶中,用约50mL乙醇使其溶解,直到颗粒物分散均匀为止。加入25mL 10%抗坏血酸水溶液、3mL内标溶液、10mL氢氧化钾水溶液(1:1),混匀。于沸水浴回流60min,使皂化完全。取出立刻冷却至室温。
2.3.5.2 提取及浓缩
用50mL的水分两次将皂化液全部转入500 mL分液漏斗中,加入100mL乙醚,轻轻摇动,排气后盖好瓶塞,室温下振荡约10min后静置分层,将水相转入另一500mL分液漏斗中,按上述方法进行第二次萃取。合并醚液,用水洗至近中性。醚液通过无水硫酸钠过滤脱水,滤液收入500mL圆底烧瓶中,于旋转蒸发仪上在50℃±2℃充氮条件下蒸至近干(绝不允许蒸干)。残渣加入适量乙醇,超声波提取溶解,将乙醇转移到25mL容量瓶中,用乙醇洗涤圆底烧瓶数次,洗涤液全部转移到同一25mL容量瓶中,用乙醇定容至刻度,摇匀,过滤,即得供试品溶液。
2.3.5.3测定
待仪器稳定后,分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,测定。
3.数学模型
式中: X―样品中维生素A的含量,mg/100g;
M―样品的质量,g;
V―样品的稀释体积,mL;
C―样品溶液中维生素A的浓度,μg/mL。
由实验过程和数学模型可以看出,影响维生素A测定结果的不确定度因素有:除了样品的质量,样品的稀释体积, 样品溶液中维生素A的浓度之外,还有高效液相色谱仪进样的重复性,样品处理过程的一致性和高效液相色谱仪积分面积重复性等因素对测定结果产生影响。故不确定度的来源可以归纳为以下几个方面:
3.1重复测定导致的不确定度ur(1):包括样品处理过程的一致性所产生的不确定度;
3.2高效液相色谱仪所产生的不确定度ur(2):包括进样的重复性、液相色谱仪积分面积重复性所产生的不确定度;
3.3样品称量所产生的不确定度ur(3);
3.4样品定容体积所引入的不确定度ur(4):包括容量瓶体积所产生的不确定度;温度变化所产生的不确定度;内标溶液加入体积的不确定度;
3.5标准溶液配制所引入的不确定度ur(5):包括标准溶液配制过程中容量瓶体积产生的不确定度;稀释5个不同浓度标准溶液过程中刻度吸管所产生的不确定度;内标溶液加入体积所产生的不确定度;温度变化所产生的不确定度;
3.6标准溶液浓度校正所产生的不确定度ur(6):包括紫外分光光度计产生的不确定度;温度变化产生的不确定度;校正标准溶液浓度时所使用的移液管、容量瓶所产生的不确定度;
3.7由于标准溶液的浓度由吸光度来校正,且内标溶液的浓度对测量结果不产生影响,故维生素A对照品的称样量及纯度,芘内标物的称样量及纯度,均不参与评定。
4.各分量不确定度评定
4.1重复测定导致的不确定度ur(1)
4.1.1样品处理过程的一致性,采用平行测定10次的结果进行评定,属于A类评定,按照实验方法对样品平行测定。结果如下:
维生素A含量测定的标准偏差为:
1.231
标准不确定度: u(4.1.1)===0.3893
相对标准不确定度为: ==0.4768%
4.2高效液相色谱仪所产生的不确定度ur(2)
4.2.1进样的重复性,液相色谱仪积分面积重复性,采用同一个样品重复进样10次, 以维生素A和芘的峰面积的比值来进行评定(n=10)。属于A类评定。结果如下:
维生素A和芘的峰面积比值的标准偏差为:0.007773
标准不确定度: u(4.2.1)= ==0.002459
相对标准不确定度为:ur(2) ===0.2014%
4.3样品称量所产生的不确定度ur(3)
4.3.1使用XP-205分析天平进行称量,天平的校准证书给出的测量结果示值误差的扩展不确定度U=0.06mg,k=2,属正态分布,样品的称样量m=105.77mg,则有:
标准不确定度为:
相对标准不确定度为:ur(3)=
4.4样品定容体积引入的不确定度ur(4)
4.4.1样品定容过程只用到25mL的容量瓶,由25mL容量瓶的校准证书可知,这些容量瓶都属于A级,测量结果的扩展不确定度U=0.01mL,k=2,属于正态分布,则有:
标准不确定度为:u(4.4.1)===0.005mL
相对标准不确定度为:ur(4.4.1)==0.02000%
4.4.2由于本实验室温度在20±5℃的范围内波动,假设温度变化为5℃,该温度引起的不确定度可通过估算温度范围和体积膨胀系数计算,液体的体积膨胀明显大于容量瓶的体积膨胀,故只考虑前者即可。设温度为矩形分布,换算系数为,水的膨胀系数为/℃,则有:相对标准不确定度为:ur(4.4.2)=5××100%=0.06063%
4.4.3样品溶液中内标溶液的加入只用到3mL的单标线吸量管,由校准证书可知,实验中所用的3mL单标线吸量管,属于A级,测量结果的扩展不确定度U=0.002mL, k=2,属于正态分布,则有:标准不确定度为:u(4.4.3)== =0.001mL
相对标准不确定度为:ur(4.4.3)==0.03334%
则,样品定容体积所引入的不确定度ur(4),为ur(4.4.1)、ur(4.4.2)和ur(4.4.3)的合成,即:
4.5标准溶液配制所引入的不确定度ur(5)
4.5.1标准溶液配制过程中,需要用到5个25mL的容量瓶。参照4.4.1中相对标准不确定度的计算方法,则有:标准不确定度为:u(4.5.1)===0.005mL
相对标准不确定度为:ur(4.5.1)=5=0.1000 %
4.5.2 移取标准溶液所用的5mL刻度吸管,从校准证书可知,该刻度吸管属于A级,吸量结果的示值误差为:0~1mL为0.010mL,1~5mL 皆为0.014mL,按三角分布转化成标准不确定度。配制过程中,分别移取了0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL。则5mL刻度吸量管所产生的不确定度为5次移取标准溶液的标准不确定度的合成,即:
ur(4.5.2)=
4.5.3对照品溶液中内标溶液的加入所产生的相对标准不确定度,可参照4.4.3,则有:
标准不确定度为:u(4.5.3)===0.001mL
相对标准不确定度为:ur(4.5.3)=5=0.1667%
4.5.4温度变化带来的体积不确定度,同4.4.2,则有:ur(4.5.4)=0.06063%。
标准溶液配制所引入的不确定度ur(5),为ur(4.5.1)、ur(4.5.2)、ur(4.5.3)和ur(4.5.4)的合成,即:
4.6标准溶液浓度校正时所引入的不确定度ur(6):
4.6.1用紫外分光光度计对标准溶液浓度进行校正,测得吸光度A=0.4376;紫外分光光度计的校准证书给出的测量结果示值误差的扩展不确定度U=0.005,k=2,属正态分布,则有: 标准不确定度为: u(4.6.1)==
相对标准不确定度为:ur(4.6.1)=
4.6.2温度变化带来的体积不确定度,同4.4.2,则有:ur(4.6.2)=0.06063%
4.6.3校正标准溶液浓度时所产生的不确定度分别为:
4.6.3.1 1mL单标移液管:由校准证书可知,实验中所用的1mL单标移液管,属于A级,测量结果的扩展不确定度U=0.002mL, k=2,属于正态分布,则有:
标准不确定度为:u(4.6.3.1)===0.001mL
相对标准不确定度为:ur(4.6.3.1)==0.1000%
4.6.3.2 50mL容量瓶:由50mL单标线容量瓶的校准证书可知,实验中所用的50mL单标线容量瓶,属于A级,测量结果的扩展不确定度U=0.02mL, k=2,属于正态分布,则有: 标准不确定度为:u(4.6.3.2)===0.01mL
相对标准不确定度为:ur(4.6.3.2)==0.02000 %
所以该项的不确定度ur(4.6.3),为ur(4.6.3.1)和 ur(4.6.3.2)的合成,即:
则标准溶液浓度校正所引入的不确定度ur(6),为ur(4.6.1)、ur(4.6.2)和ur(4.6.3)的合成,即:
4.7合成标准不确定度评定,将上述不确定度分量列表如下:
合成标准不确定度:
5.扩展不确定度评定
扩展不确定度可由合成标准不确定度乘以包含因子,取置信概率p=95%,则k=2,因此样品中的维生素A含量测定的扩展不确定度为:
U=k×ur(x)=2×0.9214%=1.843%
6.测量不确定度的结果与表示
不确定度结果:U(X)= 81.66 ×1.843%= 1.51 mg/100g
样品中维生素A的含量:W= 81.66±1.51 mg/100g
7.讨论
从表3可以看出,维生素A含量测定的不确定度因素中,影响最大的是标准溶液浓度校正、标准溶液配制和方法总重复性,影响最小的是高效液相色谱仪、样品定容体积和样品称量等产生的不确定度。因此提示在今后的含量检测过程中,要注意标准溶液浓度校正,要选用高校准级别的容量瓶和单标移液管,还要对紫外分光光度计进行定期的检定与维护保养。而且要求分析人员熟练掌握样品的各项处理步骤,以提高检测准确性。
参考文献:
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[7]李剑虹,朴建华,郭宁,杨丽琛,董杰,杨晓光.儿童维生素A与铁营养状况的相关性研究[J].卫生研究,2006,35(2):182-184.
艾瑞分析认为,暑期及十一黄金周两个旅游高峰期的到来,极大的促进了三季度中国网上旅行预订市场的快速增长。
网上旅行预订市场规模为10亿元,同比上升31.8%
艾瑞咨询的预估数据显示,2009Q3中国网上旅行预订市场规模为10.00亿元,相比09Q2的9.05亿元,环比增长10.5%;相比08Q3的7.59亿元,同比增长31.8%。
纵观09Q3市场的发展,艾瑞咨询认为,暑期本属旅游旺季,当金融危机及流感病毒带来的负面影响得到一定改善后,用户的旅游需求在暑期已有所回升。加之随后到来的,历史上首次十一8天长假,更使旅游需求得到了最大程度的释放。
由于部分用户会在9月甚至更早即预订并支付十一出行的机票或度假产品,因此这部分收入归为Q3收入,带动了Q3中国网上旅行预订市场的高速增长。
并购潮后,市场集中度略有提升
关键词:创业教育; 英语实践教学; 教育现状
中图分类号:G642.0 文献标识码:A 文章编号:1006-3315(2016)02-136-002
一、高校创业教育的现状
20世纪80年代后期,西方国家提出了一种新的教育理念――创业教育。创业教育走进我国是在1989年11-12月初,联合国教科文组织在北京召开了“面向21世纪教育国际研讨会”。会上提出了学习的“第三本护照”,即“事业心和开拓教育”,强调教育要培养学生开拓事业的精神和能力,也就是后来说的“创业教育”。而我国提出创业教育的理念始于1999年1月公布的《面向21世纪教育振兴计划》,其中提到要“加强对教师和学生的创业教育,鼓励他们自主创办高新技术企业”。2002年4月,教育部开始启动创业教育试点工作。由此,我国创业教育的研究开始跨步向前。经过十多年的探索和实践,我国高校的创业教育得到了较大发展。
国外创业教育的发展和国内大学生就业压力的增加促使我国政府和部分高校对国内创业教育进行思考并付诸实践。自从1999年由、中国科协和全国学联主办,清华大学承办的第一届“挑战杯”中国大学生创业计划竞赛时起,国内高校开始日益重视大学生创业教育。开始有步骤有层次地在高校中进行创业教育实践。这些高校试点7年来,共在本科生中开设了22门选修课,5门必修课。除了开设第一课堂学科课程外,试点院校还开设了高校创业讲坛、举办各类创业计划大赛以及创业教学实践等。尽管试点院校在创业教育方面取得了一些成绩,但是总体而言,创业教育还处于未被广泛认知和重视的低水平初级阶段。而对于保定市院校来说,创业教育则大多停留在举办创业计划大赛层面上,而且只是在较小的范围内开展创业精英教育,针对在校所有大学生进行的创业基本素质教育尚未全面展开,有的高校甚至没有专门的创业课程设置。
二、高校创业教育存在的主要问题
以保定多所高校为样本,对创业教育现状作了较为深入的调查,指出目前创业教育不足主要表现在:创业教育的理念不全面;创业教育课程设置还处于探索阶段,多了随意性,缺乏整体性、规范性;师资力量薄弱,教师缺乏创业实践;教育停滞于浅层形式,实践环节相对薄弱。
(一)有效创业师资力量严重短缺
由于我国创业教育起步较晚,从事专职创业教学的教师非常少,有过创业实践经验的教师则更少。由于没有建立起科学合理的教师外聘机制,也很难从有能力的企业家中聘任兼职教员,现有从事创业教学的大多是半路出家或兼职从事创业教学工作的校内教师。对于保定市十余所高等、高职院校的创业教育需求而言,要想短期内培养足够的高素质的创业学教师仍然显得捉襟见肘,如若再加上中小学对创业教育的师资需求,这种创业师资的供求矛盾就显得更加突出。应当承认,有效创业师资力量的严重短缺已经成为当前乃至今后很长一段时间内制约高校创业教育发展的主要因素。
(二)创业教育课程设置不尽合理
科学的课程设置是保证教学效果的前提和系统框架。以美国为代表的西方发达国家的创业教育经过多年的发展,基本上形成了符合本土特色的创业教育课程体系。伯克利学院从事创业教育的教师有20人,共计开设了23门课程。可以说,美国经济的快速发展在一定程度上得益于遍及高校的创业课程设计。在保定市开展创业教育试点院校中,开设课程最多的是河北大学、河北农业大学,选修课与必修课共9门,开课最少的是华北电力大学和河北金融学院,各只有3门选修课。其他的非试点院校开设的创业教育课程未见统计,据了解,校内教师凭个人兴趣不定期的兼职开设创业教育课程的有之,未开设创业教育课程的院校也有之,其中以开设大学生就业指导兼涉及创业教育内容的院校占多数。总体而言,创业教育课程设置体系在多数高校处于真空状态。
三、对我国高校创业教育的建议
“创”字由“仓”和“刀”组成,“仓”代表储备、准备,“刀”则有工具、方法之意,这就表明创业的前提条件是创业者已具有与创业相关的工具或方法储备。这正是开展创业教育的主要动因之一,也是确定创业教育侧重点的主要依据之一。对不同受教育者应结合其实际,开展不同侧重点的创业教育。
首先,应明确大众化的创业教育是指广义的创业教育,重心是培养学生的创业意识与创业精神。可以考虑将广义的创业教育作为所有大学生、普通硕士生的素质教育课程,将狭义的创业实务教育作为怀有强烈自主创业愿望的学生的必修专业课程,配以专业的师资,进行必要的系统性自主创业实务教育指导。
其次,在开展创业教育过程中,需要将创业教育和思想政治教育进行有机结合。大众化的创业教育重心是培养学生的创业精神,使之以积极的态度走向社会。这种创业精神的培养与思想政治教育有着天然联系。不仅如此,思想政治教育在创业教育过程中还发挥着导向、转化以及提升作用。思想政治教育通过帮助学生树立正确的人生观、价值观和世界观,引导他们对自身的人生目标及实现途径,对大学生创业深入认识,正确思考,使他们对创业的认识从片面转化为全面、从感性转化为理性,进而能够在漫长艰辛的创业征途上始终保持对既定创业理想的坚定信念。思想政治教育对创业教育的提升作用主要体现在提升大学生的创业素质和人格境界,有效地激发大学生的创业欲望,为他们的创业活动提供持久、强大的精神动力。
总之,在创业教育中加强思想政治教育,有助于学生形成完整的创业精神和正确的创业价值观。
最后,开展创业教育需要创造性的课程设计,构建新型课程体系。新的课程体系必须以职业素质的养成为基础,以综合能力为本位,以培养学生的创业、创新精神和实践能力为重点,打破传统学科体系,确立以能力为本的教学思想。鉴于目前各高校开设的创业课程差异较大、效果不一,教育主管部门应组织专家,分别就普通高校、职业技术学院给出相应的课程体系指导框架和主要课程的教学大纲,以指导各校开展创业教育。教学大纲应明确创业教育的培养目标,课程性质、地位,基本的教学内容和教学方式,为创业教育教材开发、师资培训和教学质量评估等提供重要依据。同时还应尽快明确高校创业教育的学科地位,通过在高校设立创业专业学科,大力倡导创业教育与其他专业教育的相结合,培养出符合时展和社会进步需要的复合式的高素质开创性人才。
在当前我国社会创业环境还没有完全成熟的情况下,应当理性看待高校创业教育。高校创业教育并不等于倡导学生毕业就去创办企业。国内外大量的研究已经表明,大学生虽然是社会中素质较高的一个群体,但缺乏社会经验、管理能力不强、心理承受能力差,毕业就自主创业,失败概率极高。同时由于资金、专业等条件的局限,这种意义上的创业往往把大多数学生排斥在外。由此可见,高校创业教育不是一种针对少数学生的技能性教育,而应是面向全体学生的综合性教育,其宗旨是为学生终身可持续发展奠定坚实的综合素质基础。
本文为保定市哲学社会科学规划课题资助文章 课题编号:201503027
参考文献:
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关键词:Nephstar PLUS特定蛋白分析仪 hCRP性能
C-反应蛋白(CRP)是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的一种急性时相蛋白,在炎症开始数小时CRP就升高,48小时可达峰值,随着病变消退、组织、结构和功能的恢复降至正常水平[2-3]。随着hs-CRP使用的推广, 越来越多的临床实验室开始开展该项目的检测。现对我科新购入的用于检测该项目的 Nephstar PLUS特定蛋白分析仪作一个在hCRP检测方面的性能分析。
1.材料与方法
1.1仪器与试剂 深圳国赛Nephstar PLUS特定蛋白分析仪及其配套试剂。
1.2试验样本:随机抽取当日门诊病人EDTA-K2抗凝血数支;深圳国赛超敏C-反应蛋白高值标准品,产品批号:1130-J05,靶值:147mg/L;深圳国赛超敏C-反应蛋白质控品,批号:0212032851 范围:16.333~24.500 mg/L。
1.3方法
1.3.1精密度试验 取三份新鲜全血,要求其hs-CRP值分别在1.00~10.00 mg/L,10.00~100.00 mg/L,100.00~200.00 mg/L这三个范围内。严格按照仪器说明的操作规程在Nephstar PLUS特定蛋白分析仪上各检测20次,总检测时间控制在1小时之内,计算其均值,SD值和CV值。
1.3.2准确度评估 取深圳国赛超敏C-反应蛋白高值标准品和深圳国赛超敏C-反应蛋白质控品各一支,严格按照试剂说明书对标准品和质控品进行前处理,在Nephstar PLUS特定蛋白分析仪上对此两支标本分别进行检测,比较质控品检测值是否落在其要求范围内,以标准品的定值为靶值,计算检测系统的偏倚。
1.3.3 线性范围验证 仪器说明书给出的线性范围为1.0~350mg/L,现用以下方法对此参考范围进行验证。取一份靶值为296mg/L的标准品,按7(标准品):3(样本稀释液) 的比例将其稀释成207.2mg/L的浓度作为基准液。该基准液在全血模式下的理论检测结果为:207.2*5/3=345.3mg/L。将基准液按1:1、1:3、1:9、1:99和1:399的比例进行稀释,配制成50%、25%、10%、1%和0.25%的稀释度。每个稀释度在全血模式下重复测定2次,计算均值。将实测值与理论值作比较,计算 y=ax+b,和相关系数R2,验证其线性范围。
1.4 统计学分析 运用Microsoft Excel V11软件和SPSS10.00统计分析软件处理。
2.结果
2.1 精密度试验结果 三份不同hCRP浓度的全血标本的重复性试验结果见表1。此结果表明:高、中、低三个浓度的hCRP检测的批内CV%均小于5%,即精密度良好。
表1 批内精密度(n=20)
标本 平均值X(mg/L) 标准差SD(mg/L) 变异系数CV(%)
高值 129 3.199 2.48
中值 54.32 1.994 3.67
低值 2.68 0.113 4.21
2.2 准确度评估 质控品检测结果为19.546mg/L,落在其要求范围(16.333~24.500 mg/L)内。标准品(靶值147mg/L)检测结果为152.377 mg/L,偏差为3.7%,在可接受范围内,即准确度良好。
2.3 线性范围验证结果 见表2和图1。结果经统计分析得出理论值和实测值之间的线性方程为y =0.9707x+0.4804,两者间的相关系数R2为0.9992,即理论值与实测值之间相关性良好,线性范围验证通过。
表2 线性稀释结果
理论浓度(mg/L) 实际浓度(mg/L)
1 2 X
172.65 177.376 181.302 173.45
86.325 88.436 90.023 86.849
34.53 35.077 36.158 33.996
3.453 3.062 3.213 2.911
0.863 0.394 0.398 0.39
3.讨论
hs-CRP已被证实是由慢性炎症引发心血管疾病的独立危险因素,超敏CRP的检测工作也已在各医院临床实验室内得到广泛的开展。但由于对此项目的检测国家并没有出台相应的标准,也没有相关的室间质评作为项目检测方法是否合格的评估,因此,实验室内对超敏CRP检测系统的验证就尤为重要。
本文的研究分析得到,Nephstar PLUS特定蛋白分析仪检测高、中、低三个浓度的hCRP检测的批内CV%均小于5%,即精密度良好。而在准确度的评估上,质控品检测结果为19.546mg/L,落在其要求范围(16.333~24.500 mg/L)内。标准品(靶值147mg/L)检测结果为152.377 mg/L,偏差为3.7%,在可接受范围内,说明准确度良好,符合临床上使用要求。在线性范围验证的实验上,以207.2mg/L的浓度作为基准液,将其稀释成5个不同浓度,计算理论值分别为172.65 mg/L、86.325 mg/L、34.53 mg/L、3.453 mg/L、0.863 mg/L,用Nephstar PLUS特定蛋白分析仪检测hCRP的实际浓度两次,计算平均值,根据数据得出线性方程为y =0.9707x+0.4804,两者间的相关系数R2为0.9992。说明理论值与实际值的相关性强。
以上实验表明,深圳国赛Nephstar PLUS特定蛋白分析仪在超敏CRP检测方面,精密度和准确度均良好,厂家仪器说明书提供的线性范围也验证合格,能达到临床实验室工作的要求,可正常使用。
参考文献
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【关键词】高效液相示差折光法;水苏糖;含量测定
水苏糖是具有保健功能的大豆低聚糖的组成成分之一,且被称为大豆低聚糖的主要功效成分。水苏糖为四糖,是棉子糖的半乳糖用a-1,6 糖苷键和半乳糖相连接,因此水苏糖是低聚糖,它也是半乳糖类的一种,属于非还原糖。大豆低聚糖的主要成分是水苏糖,它的生理作用主要是通过加快双歧杆菌的繁殖速度以及增加其繁殖量,进而去调节肠道保持菌群的平衡[1]。因人体内将大豆低聚糖分解的消化酶 a-D-半乳糖苷酶较为稀少,因此他们可以避免被分解吸收从而直接到达大肠内被双歧菌用于增殖,是双歧杆菌的有效增殖因子。除此之外大豆低聚糖还具有对身体有益的多项生理功能如抑制病原菌、保护肝脏、降低血清胆固醇、降血压、增强人体免疫力等 [2]。在我国,市场上出现很多含水苏糖或大豆低聚糖类成分的提取物、这些保健食品有的进口有的国产名目不一,质量也良莠不齐。现在,对保健食品里大豆低聚糖含量的测定方法文献报道不多,总结起来主要的方法包括化学分析、层析、气相色谱以及高效液相色谱这四种[2-3],就这四种方法而言,气相色谱法以及高效液相色谱法测定结果较为精准。将糖通过衍生化的方法转换成为可挥发的成分后再测定,这种方法我们称之为气相色谱法,然而用这种方法进行实验操作起来比较麻烦。相对来说高效液相色谱法操作起来更为便捷,已有文献对此报道[4-8],但关于水苏糖的含量测定方法较为缺乏。我们为了更好地对一个产品进行评价以及更好的把握好质量关,故而采集了在国内市场上较为常见的几种含大豆低聚糖的保健食品,用RP-HPLC-RID的方法对产品中的水苏糖进行测定,得到了令人满意的结果。
1仪器与试剂的选取
我们采用Waters 515高效液相色谱仪和2414示差折光检测器进行实验。水苏糖(批号:CRS52837)由(北京百灵威科技有限公司)所生产,其纯度在99%以上。实验中除乙腈为色谱纯以外其他均为分析纯,使用纯净水,过Millipore 0.22μm滤膜。共在五个市场常见含水苏糖保健食品用作实验中。
2色谱条件的设定
色谱柱Agilent zorbax NH2(4.6 mm×150mm,5μm),柱温设定25 ℃;流速为1.0mL·min-1;流动相通过流动相水-乙腈(31﹕69)等度来对其洗脱,设示差折光检测器内部温度为35℃;理论塔板数以蔗糖计算高于2200。色谱图见图1。
3溶液的制备
3.1取一定量的水苏糖对照品,称取过程要保证精准度,然后将流动相溶液加入制备成水苏糖1.03 mg·ml-1溶液,这就是我们实验中要用到的对照品溶液。
3.2取样品各0.5g置于25ml量瓶中,称取过程也要保证精准。将流动相溶液加入并时期充分均匀混合,再用0.45μm的微孔滤膜进行过滤,这就是我们实验中要用到的供试品溶液。
4方法与结果的分析
4.1线性关系考察分别将2.0,4.0,8.0,10.0,15.0μL,20.0μL的对照品溶液依次注入到液相色谱仪中,然后测量峰面积。峰面积作为纵坐标,浓度作为横坐标,计算出的回归方程为Y=1.293×105 X-183.5,r=0.9993。这就说明水苏糖在2.06-20.6μg范围内具备良好的线性关系。
4.2稳定性试验取供试品溶液10μL,吸取过程保证精准,每2小时.进样1次,6次之后测量峰面积,数据显示水苏糖的RSD为0.92%,这也就说明12h内测定有稳定的结果。
4.3精密度实验取对照品溶液10μL,吸取过程保证精准,注入液相色谱仪然后测量峰面积,数据显示水苏糖的RSD为(n=5)0.86%,这也就说明仪器十分精密。
4.4最低检测限和定量限当信噪比为3:1时经测量水苏糖的最低检测限是0.96μg。当信噪比10:1作为定量限进行测量时,得出水苏糖的定量限是2.86μg。
4.5重复性实验将同一样品取出5份,用样品处理法依次测定3种成分的含量。结果水苏糖的RSD为1.1%,实验数据说明该方法有良好的重复性。
4.6回收率试验此试验我们用的是加样回收率的方法。现有明确含量的1号样品,我们分别精确地秤取出0.25g共9份,平均分为三组,按高、中、低3个水平依次精确地加入一定量对照品,然后进行供试品溶液制备的操作,数据显示水苏糖的回收率是97.68%(RSD 1.56%)。这也就说明通过这种方法对保健食品中的水苏糖成分进行测量,有良好的回收率。
4.7样品测定依上文提到的方法制备样品溶液并对其测量,5种含水苏糖保健食品(样品是不同企业市售的产品,依次编号1,2,3,4,5)样品的测定结果,见表1。
5讨论
5.1实验结果显示用流动相是乙晴-水(69 :31),分别设定柱温25℃、流速1.0 mL·min-1 不仅可以使水苏糖与其他可溶性糖进行有效的分离,而且还能缩短他的保留时间,通常一个样品完成时间不会超过二十分钟。
5.2这次的实验主要是为了探究含水苏糖的保健食品功效成分含量的测量方法,为该类产品的质量掌控划定统一标准。由实验结果看来,由不同商家生产的同类产品水苏糖的含量有着极大的差距,这也就反映出现在市场上此类产品的质量参差不齐的情况。此外,含量测定方法学实验结果显示,采用这种方法进行实验操作起来简单且测定结果精确,重复性较好,可将此方法在含水苏糖的保健食品的质量掌控上多多加以应用。
参考文献
[1]韩德权,白志明.大豆低聚糖的物性和保健功能.黑龙江粮油科技,1997,(4):56.
[2]陈孝署.浅谈大豆低聚糖.中国保健营养,2004,增刊(S1):28.
[3]薛连海.气相色谱法测定大豆中低聚糖含量.分析化学,2003,31(3):382.
[4]郝岩平,姜金斗,杨秀茹.HPLC 法测定食品中大豆低聚糖的含量.中国甜菜糖业,2003,1 :8.
[5]泰根顺,陈桂茹,常风启.大豆及其制品中大豆低聚糖的测定方法.中国卫生工程学报,2002,1(2):94.
[6]马莺,骆承痒,吴昊.HPLC 法测定食品中大豆低聚糖的含量.分析化学,1999,27(3):367.
XX结构安全性鉴定报告
(标题:工程项目名称+鉴定项目的标题:一般小 1号宋体,加黑,居中排列)
粤建监站〔2008〕鉴字第 XX 号
(编号:包括司法鉴定机构缩略名、年份、文书性质缩略语及序号;年份、序号采用阿拉伯数字标识,年份应标全称,用方括号“〔〕”括入,序号不编虚位。3号仿宋体,居中排列)
工程名称: 工程地点: 委托人(机构):
(3号仿宋体)
广东省建设工程质量安全监督检测总站
二八年X月X日
(鉴定机构名称及报告日期:3号仿宋体,居中排列)
声 明
(2号宋体,加粗,居中排列)
1. 委托人应当向鉴定机构提供真实、完整、充分的鉴定材料,并对鉴定材料的真实性、合法性负责。
2. 司法鉴定人按照法律、法规和规章规定的方式、方法和步骤,遵守和采用相关技术标准和技术规范进行鉴定。
3. 司法鉴定实行鉴定人负责制度。司法鉴定人依法独立、客观、公正地进行鉴定,不受任何个人和组织的非法干预。
4. 使用本鉴定文书应当保持其完整性和严肃性。
(声明内容:3号仿宋体)
单位地址:广州市广州大道北193号新达城广场南塔写字楼 20楼 邮 编:510075
联系电话:020-37597713、37598376
(司法鉴定机构的地址、邮编及联系电话:4号仿宋体)
XX结构安全性鉴定报告
(小2号黑体,居中排列)
粤建监站〔2008〕鉴字第X号 (5号宋体,右对齐)
一、工程概况(一级标题:3号黑体, 段首空2字)
(一)工程基本信息(见下表1)
(二级标题:4号仿宋体或4号黑体,段首空2字)
(文内4号仿宋体,两端对齐,段首空2字,行间距一般为1.5倍,表格内一般为单倍行距。日期、数字等均采用阿拉伯数字标识。)
工程基本信息 表1
(二)鉴定原因 (略)
二、鉴定目的(一级标题:3号黑体, 段首空2字)
依据国家标准、规范和规程,对XX施工质量进行检测,鉴定其主体结构是否满足安全使用要求,并分析构件裂缝原因和加固后的结构安全性,为人民法院提供鉴定结论。
(文内4号仿宋体,两端对齐,段首空2字,行间距一般为1.5倍。日期、数字等均采用阿拉伯数字标识。下同)
三、鉴定范围(略) 四、鉴定依据(略) 五、检测鉴定内容(略) 六、检测鉴定情况(略) 七、分析意见(略) 八、鉴定结论
(一)结构裂缝原因(略) (二)原结构施工质量(略) (三)加固的施工质量(略) (四)结构安全性评定
根据现场抽检的数据和结构验算,教学楼的上部承重结构安全性等级评为Du级,即严重影响整体承载,必须立即采取措施。
九、附件目录
附件1—1/2~2/2:混凝土构件截面尺寸检验记录表
附件2—1/1:楼板厚度检验记录表
附件3—1/5~5/5:混凝土钻芯法抗压强度检验报告 附件4—1/2~2/2:混凝土强度推算值
附件5—1/2~2/2:混凝土构件钢筋条数直径检验记录表 附件6—1/1:楼板钢筋间距及保护层厚度检验报告 附件7—1/1:钢筋力学性能检测报告 附件8—1/2~2/2:建筑物倾斜观测报告
附件9—1/2~2/2:楼板裂缝示意图 附件10—1/15~15/15:验算报告
十、报告编审人员(落款)
报告编审(鉴定)人员
(鉴定专用章)
二八年X月X日
(文书制作日期:用简体汉字将年、月、日标全,“零”写为“”,居右排列。日期处加盖鉴定专用章红印)
第一条为加强水闸安全管理,规范水闸安全鉴定工作,保障水闸安全运行,根据《中华人民共和国水法》、《中华人民共和国防洪法》及《中华人民共和国河道管理条例》、《中华人民共和国防汛条例》,以及水闸安全管理的有关规定,制定本办法。
第二条本办法适用于全国河道(包括湖泊、人工水道、行洪区、蓄滞洪区)、灌排渠系、堤防(包括海堤)上依法修建的,由水利部门管理的大、中型水闸。
小型水闸、船闸和其它部门管辖的各类水闸参照执行。
第三条水闸实行定期安全鉴定制度。首次安全鉴定应在竣工验收后5年内进行,以后应每隔10年进行一次全面安全鉴定。运行中遭遇超标准洪水、强烈地震、增水高度超过校核潮位的风暴潮、工程发生重大事故后,应及时进行安全检查,如出现影响安全的异常现象的,应及时进行安全鉴定。闸门等单项工程达到折旧年限,应按有关规定和规范适时进行单项安全鉴定。
第四条国务院水行政主管部门负责全国水闸安全鉴定工作的监督管理。
县级以上地方人民政府水行政主管部门负责本行政区域内所辖的水闸安全鉴定工作的监督管理。
流域管理机构负责其直属水闸安全鉴定工作的监督管理,并对所管辖范围内的水闸安全鉴定工作进行监督检查。
第五条水闸管理单位负责组织所管辖水闸的安全鉴定工作(以下称鉴定组织单位)。水闸主管部门应督促鉴定组织单位及时进行安全鉴定工作。
第六条县级以上地方人民政府水行政主管部门和流域管理机构按分级管理原则对水闸安全鉴定意见进行审定(以下称鉴定审定部门)。
省级地方人民政府水行政主管部门审定大型及其直属水闸的安全鉴定意见;市(地)级及以上地方人民政府水行政主管部门审定中型水闸安全鉴定意见。
流域管理机构审定其直属水闸的安全鉴定意见。
第七条水闸安全类别划分为四类:
一类闸:运用指标能达到设计标准,无影响正常运行的缺陷,按常规维修养护即可保证正常运行。
二类闸:运用指标基本达到设计标准,工程存在一定损坏,经大修后,可达到正常运行。
三类闸:运用指标达不到设计标准,工程存在严重损坏,经除险加固后,才能达到正常运行。
四类闸:运用指标无法达到设计标准,工程存在严重安全问题,需降低标准运用或报废重建。
第二章基本程序及组织
第八条水闸安全鉴定包括水闸安全评价、水闸安全评价成果审查和水闸安全鉴定报告书审定三个基本程序。
(一)水闸安全评价:鉴定组织单位进行水闸工程现状调查,委托符合第十二条要求的有关单位开展水闸安全评价(以下称鉴定承担单位)。鉴定承担单位对水闸安全状况进行分析评价,提出水闸安全评价报告;
(二)水闸安全评价成果审查:由鉴定审定部门或委托有关单位,主持召开水闸安全鉴定审查会,组织成立专家组,对水闸安全评价报告进行审查,形成水闸安全鉴定报告书;
(三)水闸安全鉴定报告书审定:鉴定审定部门审定并印发水闸安全鉴定报告书。
第九条鉴定组织单位的职责:
(一)制订水闸安全鉴定工作计划;
(二)委托鉴定承担单位进行水闸安全评价工作;
(三)进行工程现状调查;
(四)向鉴定承担单位提供必要的基础资料;
(五)筹措水闸安全鉴定经费;
(六)其它相关职责。
第十条鉴定承担单位的职责:
(一)在鉴定组织单位现状调查的基础上,提出现场安全检测和工程复核计算项目,编写工程现状调查分析报告;
(二)按有关规程进行现场安全检测,评价检测部位和结构的安全状态,编写现场安全检测报告;
(三)按有关规范进行工程复核计算,编写工程复核计算分析报告;
(四)对水闸安全状况进行总体评价,提出工程存在主要问题、水闸安全类别鉴定结果和处理措施建议等,编写水闸安全评价总报告;
(五)按鉴定审定部门的审查意见,补充相关工作,修改水闸安全评价报告;
(六)其它相关职责。
第十一条鉴定审定部门的职责:
(一)成立水闸安全鉴定专家组;
(二)组织召开水闸安全鉴定审查会;
(三)审查水闸安全评价报告;
(四)审定水闸安全鉴定报告书并及时印发;
(五)其它相关职责。
第十二条大型水闸的安全评价,由具有水利水电勘测设计甲级资质的单位承担。中型水闸安全评价,由具有水利水电勘测设计乙级以上(含乙级)资质的单位承担。
经水利部认定的水利科研院(所),可承担大、中型水闸的安全评价任务。
第十三条水闸安全鉴定审定部门组织的专家组应由水闸主管部门的代表、水闸管理单位的技术负责人和从事水利水电专业技术工作的专家组成,并符合下列要求:
(一)水闸安全鉴定专家组应根据需要由水工、地质、金属结构、机电和管理等相关专业的专家组成;
(二)大型水闸安全鉴定专家组由不少于9名专家组成,其中具有高级技术职称的人数不得少于6名;中型水闸安全鉴定专家组由7名及以上专家组成,其中具有高级技术职称的人数不得少于3名;
(三)水闸主管部门所在行政区域以外的专家人数不得少于水闸安全鉴定专家组组成人员的三分之一;
(四)水闸原设计、施工、监理、设备制造等单位的在职人员以及从事过本工程设计、施工、监理、设备制造的人员总数不得超过水闸安全鉴定专家组组成人员的三分之一;
水闸安全鉴定专家组成员应当遵循客观、公正、科学的原则履行职责,审查水闸安全评价报告,形成水闸安全鉴定报告书。
第十四条流域机构、省级水行政主管部门应按年度汇总所管辖的大、中型水闸安全鉴定报告书,并于每年年底前报送水利部备案。
第三章工作内容
第十五条水闸安全鉴定工作内容应按照《水闸安全鉴定规定》(SL214-98)执行,工作内容包括现状调查、现场安全检测、工程复核计算、安全评价等。
第十六条现状调查应进行设计、施工、管理等技术资料收集,在了解工程概况、设计和施工、运行管理等基本情况基础上,初步分析工程存在问题,提出现场安全检测和工程复核计算项目,编写工程现状调查分析报告。
第十七条现场安全检测包括确定检测项目、内容和方法,主要是针对地基土和填料土的基本工程性质,防渗导渗和消能防冲设施的有效性和完整性,混凝土结构的强度、变形和耐久性,闸门、启闭机的安全性,电气设备的安全性,观测设施的有效性等,按有关规程进行检测后,分析检测资料,评价检测部位和结构的安全状态,编写现场安全检测报告。
第十八条工程复核计算应以最新的规划数据、检查观测资料和安全检测成果为依据,按照有关规范,进行闸室、岸墙和翼墙的整体稳定性、抗渗稳定性、抗震能力、水闸过水能力、消能防冲、结构强度以及闸门、启闭机、电气设备等复核计算,编写工程复核计算分析报告。
第十九条安全评价应在现状调查、现场安全检测和工程复核计算基础上,充分论证数据资料可靠性和安全检测、复核计算方法及其结果的合理性,提出工程存在的主要问题、水闸安全类别评定结果和处理措施建议,并编制水闸安全评价总报告。
第二十条水闸主管部门及管理单位对鉴定为三类、四类的水闸,应采取除险加固、降低标准运用或报废等相应处理措施,在此之前必须制定保闸安全应急措施,并限制运用,确保工程安全。
第二十一条经安全鉴定,水闸安全类别发生改变的,水闸管理单位应在接到水闸安全鉴定报告书之日起3个月内,向水闸注册登记机构申请变更注册登记。
第二十二条鉴定组织单位应当按照档案管理的有关规定,及时对水闸安全评价报告和水闸安全鉴定报告书等资料进行归档,并妥善保管。
第四章附则
第二十三条水闸安全鉴定工作所需费用,由鉴定组织单位及其上级主管部门负责筹措。
第一条为实施"科教兴水"和"可持续发展"战略,强化技术创新管理,促进水利先进适用新产品的开发、生产和有效推广应用,规范企业、事业单位新产品鉴定的管理工作,特制定本办法。
第二条本办法适用于全国水利行业企业、事业单位新产品的鉴定管理工作。
第三条本办法所指新产品是指采用新技术原理、新设计构思研制生产,或在结构、材质、工艺等某一方面有创新性突破或较原产品有明显改进,从而显著提高了产品性能或扩大了使用功能,并对提高经济效益具有一定作用,在一定区域或行业范围内具有先进性、新颖性和适用性的产品。
第四条本办法所指新产品鉴定是指按照规定的形式和程序,对新产品的主要性能、技术水平、投产条件、批量生产能力以及市场前景、社会经济效益等进行综合审查和评价,并作出相应的结论。
第五条水利部综合事业局受水利部委托,在部科技主管部门业务指导下负责组织、管理全国水利行业企业、事业单位新产品的鉴定工作。
第二章鉴定的范围和原则
第六条列入国家和部有关项目计划的新产品,水利行业企业、事业单位自行开发的新产品以及行业外企业、事业单位开发的使用于水利系统的新产品,开发单位要求组织鉴定的,按本办法执行。
涉及人身安全、社会公共利益以及国家有特殊规定的新产品的鉴定工作,按照国家有关规定执行。
第七条新产品鉴定工作要坚持实事求是、客观公正、科学民主、注重质量、讲求实效的的原则,保证鉴定工作的严肃性和科学性。
第八条新产品鉴定结论是审查批准产品投产、技术推广应用和转让、参与评审优秀新产品、参加重大项目招投标、获得奖励以及享受有关扶持政策的依据。
第三章鉴定的内容和方式
第九条新产品鉴定的主要内容:
(一)对提供鉴定的新产品技术文件、资料的完整性、正确性、
统一性做出评价;
(二)对新产品的结构、技术性能、采用标准、技术水平、用
户使用情况等做出评价;
(三)对新产品生产设备、工艺、工装的完善程度、检测手段、质量保证体系、生产条件等能否满足投产的需要以及安全、环保、可靠性等是否符合要求作出评价;
(四)对新产品市场前景预测及社会、经济效益作出评价。
第十条鉴定组织单位可以根据新产品的特点等情况选择下列鉴定形式:
(一)检测鉴定:对一般性新产品以及用检测性能指标的方式能够达到鉴定目的新产品可由鉴定组织单位委托经国家和部有关部门认定的具有相关专业检测资格的检测机构,按照国家标准、行业标准或企业标准规定的有关指标,对新产品进行检测分析,并提出检测、评价报告。
(二)会议鉴定:重大成套设备、有出口潜力的、材料和器件有突破性创新或技术复杂、难度较大的新产品由鉴定组织单位聘请同行专家及主要用户组成鉴定委员会,采用会议形式对新产品进行审查,需要进进行现场考察、测试,经过讨论答辩后进行评价,作出结论。
(三)合同验收鉴定:为个别用户研制或为主机厂配套生产的新产品,可由鉴定组织单位聘请有关专家和用户组成鉴定委员会按照供需双方合同约定的验收标准和方式,进行测试、评价,并经考察供方生产、检测等条件后,作出结论。
第四章鉴定的申请和受理
第十一条申请新产品鉴定应当具备下列条件:
(一)产品设计新颖、结构合理、性能先进、技术先进适用、具
备新的功能或较原技术有明显改进,有应用、推广价值;
(二)具备必需的标准、工艺规程、安全规程、操作规程及工装、
检测等手段、工艺技术文件齐全;
(三)达到设计要求,符合国家标准、行业标准、企业标准或用
户要求的技术、经济指标,用户反映良好;
(四)技术文件、资料齐全、数据真实准确;
(五)符合环保、安全、卫生等有关规定;
(六)符合规定的鉴定申报程序。
第十二条具备新产品鉴定条件,申请新产品鉴定的单位,须填写《水利部新产品鉴定申请报告》(见附件二)并提供完整、正确的文件、资料,报鉴定组织单位。
第十三条申请新产品鉴定须提供的文件、资料:
(一)鉴定工作大纲:包括新产品名称、规格型号、试制单位、项目来源、鉴定依据、鉴定内容、鉴定方式、鉴定的组织单位以及提供的文件目录等;
(二)产品技术、设计任务书(合同或协议书)。
(三)新产品研制总结报告,内容包括:
1、新产品的研制目的、性能、用途、市场现状及趋势;
2、新产品研制的技术方案、关键技术和创新点,总体性能指标与国内外同类产品或老产品的分析比较、工艺路线、检测手段、生产设施、产品检验和试验结果、用户试用结果以及研制过程中所遇到的技术难题和解决办法及结论,尚存的技术问题及解决方案等。
(四)产品标准:国际标准、国家标准、行业标准、企业标准或用户要求的技术经济指标;
(五)新产品检测、运行试验和质量分析报告(由国家和部有关部门认定的具有相关专业检测资格的检测机构出具);
(六)标准化审查报告:包括新产品贯彻各类标准及法令、法规的情况,未贯彻的标准及原因和相应的过渡办法、标准化综合评价及结论;
(七)用户使用意见;
(八)全套生产图纸及产品使用说明书等设计文件;
(九)生产工艺文件:包括加工工艺、装配工艺、操作规程、检验规程、配方概要及工艺流程等;
(十)推广应用前景、预测的社会经济效益分析报告;
(十一)涉及环保、劳保、安全、卫生等问题的产品,须由有关主管部门出具报告或证明;
(十二)评价为填补国内空白或国内领先以上水平的新产品需
提供国家认定的有检索资格的检索机构出具的查新报告;
(十三)具有知识产权的新产品须提供知识产权证明;
(十四)重要新产品,必须出具可靠性分析报告。
第十四条新产品鉴定的组织单位在收到鉴定申请报告及文件、资料之日起30日内作出是否受理的答复。
第五章鉴定的组织和管理
第十五条鉴定组织单位的职责:
(一)审查新产品开发单位提交的鉴定申请报告,确定鉴定的组织形式;
(二)采用会议鉴定方式的,根据需要确定会议规模及组成鉴定委员会;
(三)调处鉴定的争议与申诉;
(四)对参加鉴定工作的专家,按有关规定发给咨询费;
(五)审核鉴定委员会提交的鉴定报告;
(六)对通过鉴定的新产品核发《新产品鉴定证书》。
第十六条新产品鉴定的主持工作一般由鉴定组织单位负责,必
要时也可以委托流域机构、省、直辖市、自治区、计划单列市水利厅(局)进行,接受委托主持鉴定的单位在鉴定组织单位授权范围内开展工作,接受鉴定组织单位的领导和监督,在完成委托鉴定任务后要将有关情况报告鉴定组织单位。
第十七条鉴定委员会的组成原则:
(一)鉴定委员会由7-15名技术、经济专家及主要用户代表组成,原则上为单数,设主任一名,视产品的重要性和复杂程度,也可设副主任1-2名;
(二)鉴定委员会成员一般应具有同行业和相关行业的高级技术职称,对被鉴定新产品所属专业具有较丰富的理论知识和实践经验,熟悉国内外该领域技术发展状况;
(三)对具有中级技术职称、有经验的业务骨干也可酌情聘入鉴定委员会,但人数不多于鉴定委员会成员总数的四分之一;
(四)鉴定委员会成员应具有良好的职业道德,求实公正;
(五)直接参与被鉴定产品开发研制的人员不得参加鉴定委员
会,新产品开发单位人员原则上不得参加鉴定委员会,特殊行业由于专业限制需要参加的,其成员数不得超过鉴定成员总数的五分之一。
第十八条鉴定委员会的职责:
(一)接受鉴定组织单位的领导,并对其负责;
(二)以实事求是、科学严谨的态度组织对新产品的质疑、答辩、验证试验和评价;
(三)提出鉴定意见,全体成员要在鉴定证书上签字,对鉴定结论持有异议的应在鉴定证书中说明;
(四)鉴定委员会负责人对鉴定结论负责,每个鉴定委员会成员有权充分发表个人意见。
第十九条参加鉴定的有关人员,未经权利人许可,不得披露、使用或允许他人使用、转让该项目中涉及的技术秘密和商业秘密。
第二十条会议鉴定的一般议程:
(一)鉴定主持单位宣读鉴定组织单位对鉴定的批复文件;
(二)鉴定主持单位宣布鉴定委员会成员及主任或副主任名单;
(三)鉴定委员会主任主持具体的鉴定议程:
1、由新产品开发单位宣读有关鉴定技术文件、资料;
2、鉴定委员会成员进行现场考察、观看演示或监督检测;
3、鉴定委员会成员及新产品开发单位质疑,答辩;
4、鉴定委员会成员评议、起草鉴定意见,与新产品开发单位有关的人员原则上应回避;
5、鉴定委员会主任宣读鉴定意见;
6、经评议,如被鉴定产品未通过审查的,鉴定委员会应书面
说明未通过的理由;
7、鉴定委员会主任(副主任)在鉴定意见上签字,全体鉴定委
员会成员在鉴定证书签字栏签字;
(四)鉴定主持单位宣布会议结束。
第二十一条鉴定证书的核发:
(一)鉴定结束后,新产品开发单位应在30日内按照统一的格
式(见附件二),印制A4纸鉴定证书一式10份及原件1份,报鉴定组织单位签署意见、盖章,正式颁发鉴定证书。如系委托主持鉴定,还须事先经委托主持鉴定单位审查盖章;
(二)鉴定组织单位及新产品开发单位对鉴定申请报告、鉴定证书及鉴定技术文件、资料进行归档。
第二十二条如鉴定报告有重大缺陷,鉴定组织单位可责成原鉴定委员会补充鉴定和评价或另行组织鉴定。
第二十三条部科技主管部门对新产品鉴定进行监督,发现确有错误的,可责成组织鉴定单位及时纠正、复核和查处。
第六章罚则
第二十四条申请新产品鉴定的单位、个人及参加鉴定工作的专家在鉴定过程中弄虚作假,情节严重的,经查实,鉴定组织单位可中止鉴定,已经完成鉴定的予以撤销,给国家、社会造成损失的,按国家有关规定进行处理。
第二十五条参加鉴定工作的专家,或故意作出虚假结论,造成不良后果的,取消其承担鉴定任务的资格,按国家有关规定进行处理。
第二十六条鉴定组织和主持单位工作人员在鉴定工作中、,收受贿赂的按国家有关规定进行处理。
第二十七条参加鉴定的有关人员,未经权利人许可,擅自披露、使用或允许他人使用、转让该项目中涉及的商业秘密的,应当依据有关法律追究其责任,涉及泄露国家技术秘密的,依照《中华人民共和国保守国家秘密法》和科学技术保密的有关规定处理。
第七章附则
编号:××机电技术鉴定84052
×经科鉴定(**)001
新产品名称:C6140型普通车床
研制单位:××省××工厂
组织鉴定单位:××省经济委员会
委托鉴定单位:××省机械电子工业厅
鉴定级别:省级
鉴定日期:**年12月27日~28日
一、项目概况(项目计划下达年份、文号、组织鉴定过程)
××省××工厂研制C6140型普通车床,系××省经委以冀经科(**)175号文件下达的新产品研制项目。由××省机械电子工业厅归口管理。该项目自**年开始研制,四年来,共研制了三代样机,1984年11月份已具备了鉴定条件,经该厂鉴定合格。××省机械电子工业厅受××省经委的委托(84)×机电技字第101号函,邀请管理机关、科研单位、大专院校及同行企业等18个单位的26名代表,于1984年12月27日~28日对C6140型普通车床进行了鉴定。
二、主要技术规格、技术经济指标及简要说明
C6140型普通车床是在C6140—1型普通车床上几个部分做了重大改进而构成的新产品。该产品的研制成功为C620型及其变种车床的更新,为开发新一代的产品创造了条件。
主要技术规格如下:
(一)中心高202mm
(二)中心距1000、1500、2000mm
(三)最大工件回转直径:
在床身上400mm
在刀架滑体上210mm
捧料37mm
(四)最大工件加工长度900、1400、1900mm
(五)螺纹加工范围:1~192mm
公制螺纹的螺距2~24牙寸
时制螺纹0.5~48mm
模型螺纹的模数1~96径节
径节螺纹38mm
(六)主轴孔径
(七)主轴转速级数:
正转24级
反转12级
(八)主轴转速范围:
正转10~140rmin
反转12.5~1400rmin
(九)主轴每转刀架纵
向进给量0.08~4.83mm
(十)主电机
型号:Y132—4(B3)
功率:7.5KW
(十一)外型尺寸:
长×宽×高(2720.3230.3720)×974×1199mm
(十二)机床重量:约2200、2300、2400kg
三、鉴定意见
鉴定委员会通过了《C6140型普通车床鉴定大纲》,并按照大纲的要求,分为资料审查组、样机检测和零件检测组,三个小组分别按照大纲规定的任务进行工作,通过上述工作,与会代表认为:
(一)产品图样和主要技术文件基本上做到了完整、正确、统一、清晰,可以指导生产。
(二)样机是在C620—1型普通车床的基础上做了重大改进而构成的新型车床,会议认为,该机的外型、进给箱的双轴滑移系统,外供油强制,尾座增加快速锁紧机构,床头箱采取降噪措施,并扩大转数范围等等方面的改进是成功的。
(三)整机的外观检查,几何精度、工作精度及其它质量的检测结果,符合CB4020—83及分等规定等有关标准的要求,整机精度应检18项,实检18项,合格率100%。
(四)主要零件的加工质量达到了设计要求,并均采取了耐磨措施,主要件共检9件,关键项应检30项,合格30项,合格率100%,主要件主要项应检339项,实检339项,合格325项,合格率95.2%。
(五)××省××工厂的技术力量、设备能力及工艺装备情况具备批量生产的条件。
(六)建议:
1.应进一步加强技术基础工作和技术管理工作。例如产品图样应预以整顿,标准化工作应进一步预以完善,加强工艺装备的管理。
2.进一步加强质量管理,提高铸件及钣金件的质量,提高机床清洁度,防止零件在加工过程中的磕碰划伤。
综上所述,与会代表一致认为,6140型普通车床研制是成功的,达到了计划任务书的要求。该产品既保留了C620—1型普通车床的优点,又改进了其不足之处,为机构行业又提供了一种新型号的车床。会议认为C6140型普通车床可以定型,投入小批量生产。
四、主要技术件及提供单位
(一)鉴定大纲
(二)试制工作总结
(三)技术工作总结
(四)制造与验收技术要求
(五)技术经济效果分析报告
(六)标准化审查报告
(七)厂级鉴定书
(八)使用说明书
(九)合格证明书
(十)装箱单
(十—)检测记录表
(十二)出厂验收规范
(十三)产品图样
(十四)工艺文件及工装图样
(十五)用户使用报告
以上技术文件1~14是由××省××工厂提供,用户使用报告由××省××县城建公司提供。
五、受委托鉴定单位审查意见
同意鉴定委员会意见
**年12月31日
六、组织鉴定单位审查意见
同意鉴定意见
××省经济委员会(盖章)
**年1月22日
七、附件
(一)资料审查组《技术文件、资料审查报告》及审查技术文件、资料目录。
(二)整机检测组《整机检测报告》及检测记录。
(函审鉴定用)
一、项目名称:
二、项目来源:
国家计划:计划名称及项目编号
省科技厅计划:计划名称及项目编号
计划外项目
三、第一完成单位:
四、研制起止时间:
五、鉴定类别:
新产品
新技术
新材料
新工艺
生物矿产新品种
新设计
六、鉴定依据:
计划任务书或项目合同
委托开发合同
相关技术标准
其它
七、鉴定组织:
省教育厅组织并主持
省教育厅组织委托
主持。
由组织鉴定单位聘请
名同行专家组成鉴定委员会,设主任委员1名,副主任委员
名,委员
名。
八、鉴定内容:
1、技术资料是否完整、规范。
2、选题是否准确,方法是否得当。
3、是否完成计划任务或合同要求。
4、对应用技术成果的新颖性、先进性、实用性做出评价。
5、对取得的社会经济效益、潜在效益做出评价。
6、对项目总体水平做出评价。
7、提出存在问题和改进意见(需实质性具体技术问题和意见,否则视为不合格鉴定)。
九、鉴定程序:
1、由主持鉴定单位将项目资料及科技成果鉴定函审表寄送各位鉴定委员。
2、各位鉴定委员认真审查材料后,填写科技成果函审表,寄(送)到主持鉴定单位。
3、主持鉴定单位将各位委员的《科技成果鉴定函审表》寄(送)函审组长。函审组长汇总各位委员的意见,按少数服从多数的原则,写出综合评价意见,并指出其存在问题及改进意见,将全部资料及综合评价意见寄(送)到主持鉴定单位。
4、主持鉴定单位审查制作鉴定证书,盖章后报组织鉴定单位审批。
十、提供鉴定资料及提供单位:
1、鉴定大纲及鉴定委托书
2、工作报告
3、技术报告
4、检测报告
5、试验报告
6、查新报告
7、效益分析报告
8、用户意见
9、产品标准
10、测产报告、田间检测报告等
11、计划任务书及计划下达证明
12、其它。技术资料(说明)
河北省教育厅
年
关键词:公路工程;项目竣工;质量鉴定
0引言
公路工程竣工质量鉴定工作能够有效发现公路工程建设中存在的问题,察觉安全隐患,对公路工程建设质量有更加客观的认识,从而有效保证工程的质量,更为有效地投入使用。可见,质量鉴定是非常必要的。
1公路工程竣工质量鉴定的主要目的和作用
公路工程服务的人群广泛,荷载量非常大,对于车辆行驶安全有着非常重要的影响。也正因为如此,在其投入使用前,对于竣工的工程做必要的质量鉴定是非常有必要的。通过完善的竣工验收工作,可以有效检查工程的设计和工程质量合格与否,并可以及时有效地发现问题并及时加以处理和优化,从而让公路工程可以更为有效地投入使用。同时,只有做好质量鉴定,认可工程合格并通过验收,建设单位才能办理固定资产交付使用手续,有效保证公路工程项目及时投入生产和应用,更为有效地发挥投资效益。另外,通过质量鉴定工作,实现工程的竣工验收,建设单位才能够更为有效地总结建设项目的不足和经验,然后可以对各个参与建设的单位做客观的考核和评定,总结经验教训,为进一步的工作改进提供必要的支持。由此可见,公路工程竣工质量鉴定是非常有必要的,需要给予足够的重视。
2公路工程项目竣工鉴定的工作内容
对于已经竣工的公路工程,且已经纳入到质量鉴定计划中,此时,相应的质监机构要做好鉴定方案,然后指派工作人员完成相应的审核工作,成立相应的质量鉴定小组进行现场鉴定,鉴定的内容主要有以下几个方面。
2.1查阅相应的工程项目资料
要对公路工程的相关项目资料进行严格查阅,对于工程质量的督查报告、监督抽样资料、观测资料、交工遗留问题以及试运行期间的问题和处理的情况等资料进行全面查阅,并对专项论证的相关资料进行严格查阅,全面了解工程竣工情况。
2.2现场严格审查交工遗留问题
工作人员要严格审查交工遗留问题,并要现场亲自查看,对于公路工程试运行期间存在的问题以及相应的处理效果进行现场评测和检验,对于专项论证的相应问题进行现场了解,客观鉴定公路工程的施工质量。
2.3对建设单位验收情况进行鉴定
在对公路工程进行质量鉴定时,要深入了解建设单位或者管理单位有没有尽到应尽对验收义务,对于公路工程竣工需要了解的路基工程沉降情况、裂缝情况、病害情况、钢筋外露情况、基础沉降情况以及其他影响公路工程耐久性和安全性等问题是否做了相应的检验和验收,对于有隧道工程的公路工程,是否对其存在空洞、渗水、开裂沉降等问题进行了客观调研。并在此基础上,结合核查的情况,对观察、论证及处治措施进行确认,并针对性地补充观测和论证的内容。
2.4进一步明确抽查项目
在公路工程现场进行质量鉴定的过程中,要立足工程客观情况,进一步明确抽查的项目,以此来更为有效地提升鉴定的有效性。要根据公路工程的客观情况,分析工程中有必要再进行抽查的环节,如抽查公路工程的护栏立柱埋入深度是否合理,分析公路路面施工厚度是否符合客观要求,抽查是否存在公路砼裂缝、墩台沉降以及钢筋锈蚀等问题。然后根据需要同检测机构进行沟通交流,做必要的检测工作。
3公路工程竣工质量鉴定工作实施
3.1强化对公路工程的实体检测鉴定
要积极同质监机构展开沟通,开展相应的公路工程实体检测工作,严格按照相应的操作规范和规程进行必要的检测工作,客观获得相应的检测数据,为相应的工作提供支持。检测所得数据需要进行必要的整理和分析,出具相应的检测报告,有效列明相应的检测指标数据,并且对分析过程进行相应的标明,并进行备案。在检测过程中,如果发现相应的检测数据异常问题时,或者存在影响公路工程正常运行的质量问题时,应该及时报告质监机构,并提出相应的解决对策。
3.2强化对公路工程的外观审查鉴定
强化对公路工程的外观检查,针对公路工程试运行期间的养护、外观检查资料以及路段和结构物情况等进行全面检查,对于公路工程的外观质量进行必要的记录,并严格按照相应的标准来对公路工程外观质量进行评定。在检查过程中,检测人员要根据检测的数据异常情况对相应的工程部位进行质量核查,记录核查结果,对于实测指标数值有非常大的情况或者超标严重的工程部位,要组织专家会同设计单位共同做专项论证,同时对交工验收遗留的问题的处理情况进行复核。
3.3强化对公路工程的内业资料审查鉴定
针对公路工程的具体情况,质监机构对于设计和建设单位的内业资料进行专项审查,审查可以通过抽查的方式展开,特别要对公路工程各个合同段施工情况以及监理单位的关键工序和指标进行严格审查鉴定。然后填写相应的内业资料审查表。在审查过程中,如果存在问题,应该客观加以记录,表述一定要客观准确,对于存在扣分的情况,要加以解释和说明,并签认。
3.4强化对公路工程质量评定资料的审定
针对公路工程项目竣工质量鉴定工作的开展,要审定各项资料,如交工验收检测报告、竣工验收外观检查表、竣工验收内业资料审查表、交工遗留问题处理及评价报告、专项认证报告等多项资料。鉴定工作基于这些资料,有效确定质量鉴定的等级,形成竣工质量鉴定报告并进行存档处理。