苏武传教案范文

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第1篇

关键词硫胺素焦磷酸核酶开关； 增强绿色荧光蛋白； 基因表达调控； 荧光生物传感器； 哺乳细胞

1引 言

核酶开关是近些年出现的一种人工基因调控开关。常见的核酶开关由锤头状核酶和适配体组成[1]。作为一种顺式作用元件，在特异识别适配体的配体作用下，无需蛋白质辅助，即可通过调节自身裂解反应，调控mRNA的翻译，已应用于多种细胞的基因调控[2～6]。迄今，随着指数富集配基系统进化技术（SELEX）[7]技术发展，越来越多的适配体被筛选出来，能特异性地结合小分子、蛋白质、多肽、氨基酸、抗生素和金属离子等各种配体[8～11]。相比于天然的核酶开关，人工核酶开关具有基因表达可控性、结构可组装性、靶基因特异性等特点[12]。配体与适配体区的结合引起的构象变化可用来调控下游基因的表达，转化成相关的化学信号，如报告基因的荧光变化等，可实现对配体在活细胞内的原位、可视化检测。如今，合成生物学的发展及核开关在逻辑门中的运用，更推动了基于核酶开关的生物传感器在真核细胞内的广泛应用[13]。

硫胺素焦磷酸（Thiamine pyrophosphate，TPP） 是维生素B1在细胞内的主要活性形式，也是糖、脂肪酸和氨基酸氧化代谢中重要的辅助因子，对维持细胞正常代谢、细胞生长和增殖等发挥极其重要的作用。TPP 核酶开关是唯一同时存在于原核生物和真核生物中的天然核糖开关，在植物和真菌中较为常见[14～17]。其在真核细胞中主要作用于premRNA的内含子剪切，可实现对基因精确和有效的调控。无论是在真核中，还是原核生物中，TPP核酶开关对TPP都有高的特异性和亲和力，而细胞中的其它组分或相似产物与核酶开关适配区结合能力很弱[18～20]，对核酶的活性影响很小。文献[21～24]报道，将TPP适配体与天然核酶组装成人工的TPP核酶开关，用于体外、原核细胞或藻类等细胞中调节靶基因的表达。目前，在哺乳细胞中运用的核酶开关适配体结构多限于茶碱、四环素、金属离子等配体的适配体[25，26]。这些配体为细胞外源物，且常具有一定细胞毒性。而TPP是真核细胞的一种重要的代谢中间物，在细胞体内含量较低，人工建立的核酶开关用于调节哺乳细胞内的基因表达还未见报道。

迄今为止，原核生物中报道的人工TPP核酶开关有正调控和负调控两种类型[21]，一般置于靶基因5′端。通过配体与适配体的作用，调控核酶剪切与否，释放或封闭RBS序列以促进或关闭下游基因的表达[27]。真核生物中因无RBS 序列，核酶开关通过抑制mRNA剪切上调靶基因的表达，或激活mRNA剪切来抑制靶基因的表达[28，29]。目前，人工核酶开关的设计一般通过理性设计通信模块元件序列，再整合到细菌或酵母mRNA中进行功能筛选与优化[30，31]。

2实验部分

2.1仪器与试剂

Eppendorf mastercycler nexus PCR仪（德国Eppendorf公司）； Nikon ECLIPSE TI倒置荧光显微镜（日本Nikon公司）； BD Accuri C6流式细胞仪（美国BD公司）。

焦磷酸硫胺素（>95.0%，美国Sigma公司）； 茶碱（>99.0%，北京百灵威科技有限公司）； DpnI酶（50 U/μL，美国NEB公司）； T4 连接酶（5 U/μL，美国Invitrogen公司）； lipofectamine 2000转染试剂、DMEM培养基（美国Invitrogen公司）； 小牛血清（美国Gibco公司）。

2.2哺乳细胞中TPP核酶开关质粒的构建

将来源于Schistosoma mansonii锤头状核酶 （HHR） 序列插入pEGFPN1载体EGFP基因的3′ UTR 区。 pEGFPN1质粒为模板，5′ 重叠延伸PCR方法构建无TPP适配体区的pEGFPHHR。PCR反应： 94℃预变性2 min，94℃ 30 s， 60℃ 30 s， 72℃ 1 min， 25个循环； 72℃延伸10 min。PCR反应体系： 5 μL 10 × Phusion DNA polymerase buffer， 4 μL 10 mmol/L dNTP， 2 μL 10 μmol/L primer F， 2 μL 10 μmol/L primer R， 1 μL Template， 0.25 μL Phusion DNA polymerase； 加ddH2O至50 μL。PCR产物用乙醇回收，DpnI酶37℃消化PCR产物中过量的质粒模板1 h，用乙醇回收产物，T4 DNA ligase连接转化至感受态细胞，后涂布至含有相应抗性的LB平板中37℃过夜培养。挑取单克隆培养，提取质粒并送上海生工生物技术公司测序，GenBank中BLAST序列比对。测序成功产物作为模板用于后续带有TPP适配区on/off型核酶开关的构建，其构建方法同上，其序列与相关引物见表1。所有寡核苷酸及引物由上海生工生物技术公司合成。

2.3哺乳细胞的培养及瞬时转染

HEK293细胞于添加10% 小牛血清的DMEM中，37℃， 5% CO2培养。转染前一天，以5×104/孔密度，添加0.5 mL DMEM/孔铺于24孔板。根据转染条件，以每孔1 μg pEGFPTPPHHR质粒与2 μL lipofectamine 2000转染细胞，pEGFPN1与pEGFPHHR分别为阴性与阳性对照，4 h后换新鲜培养基并添加不同梯度浓度（0～150 μmol/L）的TPP或茶碱（Theophylline）。

2.4转染后细胞内EGFP表达的荧光显微镜观察与流式细胞仪分析

细胞转染48 h后， PBS洗涤，荧光显微镜下以488 nm 激发波长，515～545 nm发射波长观察EGFP

3结果与讨论

3.1pEGFPTPPHHRON/OFF质粒的构建

人工TPP核酶开关有正调控和负调控两种类型，无论对于原核生物或真核生物，人工核酶开关上调或抑制表达的关键取决于连接适配体结构域与核酶结构域的通信模块，即连接适配体区（Stem Ⅲ）与锤头状核酶（HHR）（图2A）茎环结构（StemⅡ）之间的寡核苷酸序列，故TPP适配区与HHR核酶的接头序列是决定核酶开关是“Switch on”还是“Switch off”的关键。在负调控（Switch off）开关中，无配体时，锤头状核酶（HHR）的活性结构得不到维持，从而抑制HHR核酶的剪切。而TPP配体的结合，可引起核酶开关茎环结构Stem Ⅱ与Stem Ⅰ 之间活性结构的稳定，剪切发生。反之，正调控（Switch on）结构具有初始稳定的HHR剪切结构，而TPP的结合反而破坏了HHR的活性结构，从而抑制剪切的发生[21，23]。根据原核生物中优化的连接适配体与核酶的6个寡核苷酸的不同序列，共构建了3种Off（pEGFPTPPHHRoff1，2，3）开关及两种On（pEGFPTPPHHRon1，2）开关的质粒（图2B）（后续以TPPHHRon/off简称）。

为保证其在真核生物中的调节活性，所有开关设计均插入在目的基因EGFP 3′ UTR区。由于待插入的HHR和TPP适配体片段位于EGFP基因下游，缺少合适的限制性内切酶位点，且序列较短，仅约120～140 bp。传统的PCR酶切连接方式的回收效率较低， 影响后续重组载体的构建，故本实验中利用Overlap extension PCR cloning[32]将核酶开关片段插入质粒中的方法更为高效准确。设计两条5′ 末端磷酸化的上下游引物，引物的一部分为带插入的序列，另一部分分别和质粒插入位置的下游和上游互补，以模板质粒扩增全长。

3.2不同TPP浓度下HEK293细胞内EGFP基因表达分析

首先通过荧光@微镜观察瞬时转染48 h后HEK293细胞内EGFP报告基因表达，结果表明：相比阴性对照pEGFPN1转染细胞的EGFP高表达，阳性对照pEGFPHHR质粒转染的细胞荧光明显降低，表现出良好的核酶剪切功能，但无TPP浓度依耐性 （图3A）。而随着TPP浓度升高TPPHHRon1，2转染细胞的绿色荧光的强度有着明显的增强趋势； 反之，而在构建的3个off型开关转染细胞中，只有TPPHHRoff1随着的TPP浓度的升高，EGFP表达明显下降（图3B）。

但TPPHHRoff2，3均未见荧光强度的降低，其强度接近于阴性对照， 且无TPP浓度依赖性。这可能是因为接头序列的不完全配对造成了mRNA二级构象的不匹配[23]，而这种改变在哺乳细胞中会受到更多因素的影响，核酶更难以发挥正确的剪切功能[31]。

为进一步考察不同TPP浓度对EGFP表达的影响，利用流式细胞仪对上述EGFP表达量有改变的转染细胞株平均荧光强度进行定量分析（图4）。相比阴性对照，pEGFPHHR转染细胞株荧光强度降低近80%，表明此构建体系中HHR核酶在哺乳细胞中保持其强劲的剪切作用。在构建的两个激活型开关中，TPPHHRon1在TPP浓度达50 μmol/L 时荧光表达明显升高； 150 μmol/L 时，平均荧光强度可增大约3.1倍，接近于报道中作用于原核细胞的Turn on功能[21]，另一TPPHHRon2荧光强度虽有升高，但开关调节功能较微弱，150 μmol/L的TPP调节只增加1.8倍的表达。而在构建的TPPHHRoff1中，TPP浓度为100 μmol/L 时，平均荧光强度降低了2.3倍，之后随配体浓度继续增加（150 μmol/L），其对EGFP表达的进一步抑制未有明显效果。发现3种对TPP有响应的核酶开关，其对TPP敏感浓度约为50～100 μmol/L，实验中曾将TPP浓度加大到500 μmol/L，但其在各种转染细胞株中并未见明显作用效果。相对于以往报道中茶碱在哺乳细胞中调节浓度均为1～10 mmol/L， 所构建的TPP核酶开关对TPP底物作用的敏感性大大提高。但此结果也证实了虽然核酶开关在原核生物或低等真核生物细胞中有良好的调控作用，但其结果并不完全适用于哺乳细胞。在很多报道中， 原核生物系统中的核酶开关可达到1.2～10倍的调节功能[23，30]，虽远小于体外100～10000倍的调节幅度[22]，但在真核哺乳细胞中的调节效果更低，且调控能力亦会因转基因或宿主细胞种类的不同而有所改变[31]。相比于原核生物相对简单的转录翻译机制，其核酶开关在真核细胞中mRNA二级结构的正确形成常会受到更多转录翻译等相关因子的影响，更增加了其调节的难度和不确定性。

为了检测TPP核酶开关的特异性，在平行样本中均加入了茶碱。实验表明，茶碱的添加并不能激活核酶开关发生构象变化，从而影响报告基因绿色荧光蛋白的表达。结果表明，这些原本适用于原核生物的核酶开关对适配体较高的特异性在哺乳细胞内仍能得到较好的保留。

4Y 论

研究了原核生物筛选的基于TPP适配体的两种类型的核酶开关，通过TPP配体与人工核酶的变构作用，激活或抑制核酶的剪切，实现了在哺乳细胞中调节报告基因绿色荧光蛋白（EGFP）的表达。此方法可用于间接检测哺乳细胞内微环境中的TPP浓度，这种基于变构活性来调节下游报告基因活性的策略，利于通过荧光检测用于哺乳活细胞内代谢物或因子的无标记、无损伤、可视、高效的检测。虽然相对于体外检测，这种细胞内原位检测方法所需的本底浓度水平较高（umol/L），但今后随着合成生物学中基因表达的级联放大技术的发展和逻辑门等方法的结合运用， 这种基于核酶开关的生物传感器将在提高哺乳细胞检测敏感性和运用广泛性方面具有极大的潜力[33]。

第2篇

被告：四川省民族贸易联合公司（以下简称民贸公司）。

1993年初，四川省政府决定由民贸公司在成都市市区设立“中国西部民族用品批发市场”（以下简称“市场”）。设该市场需资金6000万元。由于资金短缺，民贸公司决定出售“四川民贸大厦”及附属设施（主楼14层，建筑面积9459平方米），其价值约人民币6000万元。随后，国贸公司表示愿购此楼。同年2月10日，双方经协商，签订了由国贸公司以支援“市场”建设名义向民贸公司捐赠4750万元的捐赠协议，并约定此款在7月19日前分3次拨付，4月10日之前应拨付民贸公司1325万元。2月16日，民贸公司与国贸公司签订房屋买卖合同，约定民贸公司以1250万元的价格将“四川民贸大厦”及附属设施卖给国贸公司。合同签订后，民贸公司即将大厦内的3间办公室交给国贸公司使用，随后又将大厦产权证交国贸公司保管。4月3日，国贸公司持房屋买卖合同、批复及民贸公司的过户申请等，到成都市房地产管理部门办理了大厦的产权过户手续，并取得了产权证。4月9日，民贸公司为交付房屋作准备，与成都新华饭店签订租房协议，并支付租金17.5万元，花费装修费42248.02元，电话移机费6267元。5月10日，国贸公司向成都市房地产管理部门交纳了手续费、登记费、书证费共250010元，28日又交纳了土地增值费1981070元。至6月5日止，国贸公司陆续向民贸公司支付了购房定金100万元及购房款300万元。此间，民贸公司与国贸公司为支付捐赠款、购房款以及交接有关“大厦”资料和房屋买卖合同是否继续履行等问题曾发生争议。四川省国有资产管理局在得知双方的大厦转让情况后，于7月19日发出文件，指出大厦的买卖非法，要求立即停止。为此，双方进行协商，因认识不一而未达成一致意见。9月7日，国贸公司诉至成都市中级人民法院称：双方签订的房屋买卖合同经双方主管单位认可生效，原告按合同规定向被告交付了100万元的定金及房款300万元，同时双方办理了大厦产权过户手续，原告取得大厦的产权证。但被告未按合同规定交付有关资料和腾空房屋，致原告不能实际使用房屋。请求法院督促被告履行合同，承担腾退房屋的义务。 民贸公司则辩称：原告根本无意兑现捐赠协议，在无履行能力的情况下，以向“市场”捐赠4750万元为诱铒，与被告签订“大厦”买卖协议，实为欺诈行为。因此，双方签订的房屋买卖协议无效，不受法律保护。被告愿意退还原告已支付的款项。

「审判

法院审理中还查明，国贸公司在诉讼中强占了“四川民贸大厦”五楼另外5间办公室。四川民贸大厦建于1991年底，总造价为14905840.23元。 成都市中级人民法院经审理，认为：国贸公司与民贸公司买卖“四川民贸大厦”，双方虽有房屋买卖合同，并经各自的主管部门批准，但从双方先后形成的两个协议和民贸大厦的实际价值看，以1250万元购买民贸大厦，不是双方的真实意思表示。实际上，该买卖合同是以捐赠协议为前提的，双方签订以1250万元买卖民贸大厦房屋买卖合同，其真正目的在于逃避税费，规避法律，故此买卖房屋的合同无效。民贸公司应退还国贸公司已付的购房款，国贸公司应从“四川民贸大厦”中搬出，并支付占用房屋使用费；国贸公司与民贸公司在买卖房屋过程中均有过错，因合同无效造成的损失，即国贸公司支付购房款的利息及办理产权过户手续交纳的有关登记费、增值费；民贸公司另处租房的房租费用，应由双方共同承担。据此，依照《中华人民共和国民法通则》第五十八条第一款第（四）项及第二款、第六十一条和《中华人民共和国经济合同法》第七条第一款第（四）项、第二款，第二十九条第一款之规定，成都市中级人民法院于1994年4月28日判决如下：

一、国贸公司与民贸公司于1993年2月16日签订的“四川民贸大厦”房屋买卖合同无效。 二、国贸公司应于本判决生效后一个月内将所占用的8间房屋腾空，完好地退还给民贸公司。 三、在本判决生效后一个月内，民贸公司退还国贸公司购房款400万元。国贸公司应将占用“四川民贸大厦”8间房屋的使用费给付民贸公司，3间房屋从1993年3月起每月按2400元计算至1993年9月止，8间房屋从1993年10月起每月按6400元计算至归还之月止。 四、国贸公司给付民贸公司购房款的利息损失，从该款付出之日起至归还之日止，按建设银行同期建设贷款利率计算，由国贸公司和民贸公司各承担一半。 五、国贸公司在办理产权过户手续时所交纳的手续费、登记费及土地增值费共2231080元，由国贸公司和民贸公司各承担一半。 六、民贸公司因卖房而在另处租房的费用223515.02元，由国贸公司和民贸公司各承担一半。 宣判后，双方当事人表示服判，未提出上诉，并自动执行了该判决。

「评析

正确处理好本案的关键，在于认定双方当事人签订的房屋买卖合同是否有效。 从形式上看，国贸公司与民贸公司签订的房屋买卖合同，系双方自愿，并经有关主管部门批准，手续齐备。同时，国贸公司也依法办理了产权过户手续，并交纳了法律规定应交纳的费用，取得了大厦的产权证。房屋买卖合同似乎具备了成立的一切条件，应该认定有效。

第3篇

关键词：平山县；基地教研；校本教研；课题教研；网络教研；培训教研；论文教研

中图分类号：G622.0 文献标识码：A 文章编号：1009-010X（2013）12-0019-04

教不研则浅，研不教则空。作为县级教研室应该一头挑起“教”，一头挑起“研”，两头关系均衡了，才能担负起一县的教研重任，让课程改革因我们而深入，让教学质量因我们而提高，让平山教育因我们而改观，不断向前。

一、走下去――由点到面，搞好基地教研

教研，实际就是“研教”，就是研究教学，改善教学。教研的内容必须从教学中来，只坐在办公室搞教研必然空洞和浮浅。搞好教研，教研员必须走下去，走进学校，走进课堂，走进教师队伍。

“走下去”的关键，是怎么走，走向哪里。

（一）研校情

教学讲究关注学情，教研则应关注“校情”。平山县作为一个贫困山区县，教学点多，分布广而散，路程较远，交通极为不便，边远山区的教师要参加一次全县教研会十分困难；加之随着计划生育政策的持续实施，农村学校生源逐年递减，再加上我县城镇化建设进程的加速，导致了一些农村学校学生流失，与此同时，学生数量不足也带来教师人数的减少，部分学校尤其是小学科，一所学校一个年级往往只有一名教师，许多学科单人独岗，专业引领、同伴互助相对困难，很难有效进行集体备课和校本教研。

（二）划基地

针对这种情况，我们根据全县学校的地域分布，划分出了城关、南甸、岗南、回舍、古月、小觉六个中、小学教研基地；每个教研基地都以本基地的县直属中学或中心小学作为基地校，向周围学校辐射，形成协同备课、合作教学的教研基地；每个教研基地都分包给教研员，并由县直属中学或小学中心学校主抓教学的副校长担任基地负责人，负责基地教研课题的选定、参研学校的联络、专业指导的选定等工作。基地教研轮流在基地各个学校开展，并规定每个学校每学期必须承担一次基地活动，基地各学校的同学科教师必须参与。这样，就有效地促进了学校之间、校长之间、教师之间的层层交流和互动，各个教学点上的教师也有机会参与集体备课和校际教研活动了；而且每次基地教研活动都要求教研员深入学校，参与教研，一年来，教研员几乎走遍了全县各个学校。

通过“走下去”和由点到面的基地教研，各个学校信息多了，活动多了，大家有共同的关注点了。大家在合作中寻找差异，在差异中发展特色，相互借鉴，相互补充，相互启发，激活了学校的教研工作，促进了教师的专业成长，形成了平山基地教研新生态。

二、领进去――由同到异，搞好校本教研

“走下去”的目的是“领进来”，即发挥教研室和教研员的引领作用，对各个学校的教研活动和教学改革进行专业指导。

（一）同课异构

同课异构，即同一进度，同一课题，由教研室和基地学校根据基地的具体教学进度选定课题，由两所学校的教师提出不同的教学构思，展示不同的教学过程。大家在比较中互相学习，扬长避短，共同提高。有了比较，就有了压力，为了上好课，压力就变成了动力，从而在一定程度上缓解了教师的职业倦怠感，激发了上进心，调动了积极性，促使教师逐步从“要我教研”转轨到了“我要教研”，突破了一些学校小学科教师单兵作战的教研困境，为他们提供了合作互助和交流展示的平台，他们参与集体备课和投身教研的热情空前高涨。

（二）一课多上

一课多上，即同一个教师在不同班级上同一节课。大家先听该教师一节课，然后进行集体研讨，指出不足，帮助做课教师找到可提高、完善的空间，做课教师通过修改后，再上课；或集体备课之后按新设计上课，二次复听；之后，再由同一学校的不同教师根据听课结果，对集体备课方案进行再次修改，三次上课。这样，从一课两上到一课三上到一课多上，让教学设计在集体备课的探讨中逐步完善，也让大家切实感受到了集体教研的力量。

（三）主题式教研

主题式教研，即把教研选题自放给各个学校，各学期开学伊始，由各学校根据上学年教研中发现的问题，总结归纳，找出一个适合本学期本年度的教研主题，上报教研室；教研室根据各学校的主题，在听课、评课中有侧重地进行指导；最后和大家一起把这些主题提炼成课题。

这样，由同到异，促使教师们在备课、上课、评课、改课中逐渐成长。

三、钻进去――由浅入深，搞好课题教研

教研员“走下去”，“领进去”，促使、激励教师们扎实地“钻进去”，让教研上一个台阶，学校和教师就必须有自己的课题。课题研究，能够促使教研活动由浅入深，变被动为主动。

（一）问题变课题

我们在教研活动中，鼓励教师变问题为课题：从教学面临的突出问题中选题，从日常的教学中选题，从成功的教学经验中选题，从教师自身课堂实践的矛盾冲突中选题；选择有价值、有针对性、有可操作性的教学问题作为课题来进行研究，并让教师体悟课题研究与日常教学密不可分，研究无处不在、无时不在，“工作即研究”。在课题研究过程中，教师既要重视“方案”和“报告”的撰写，又不能忽视实施过程的历练；既要重视开题时的“轰动场面”，更要重视实施进程的厚积薄发；既要重视课题的结题验收，也要关注研究过程中材料的搜集、整理与分析。

（二）人人有课题

2011年，在教研室的号召和推动下，全县上报课题50多个，其中，被省教科所批准立项20多个，被省教育学会批准立项30多个，居全市前列。为了利用课题搞好教研，教研室全体教研员做到了人人有课题，教研室还多次请来省、市课题专家指导课题研究工作。

（三）推广课题研究成果

功夫不负有心人。因为勤于钻研，我们教研室语文组对课题《头脑风暴作文教学法在农村寄宿制中学的运用》的研究，引起了河北师大国培中心的关注和重视。这一课题由教研室语文组牵头，参与实验的有岗南、回舍、外国语、里庄、小觉等多所学校，2013年4月25日，教研员郭素青和课题骨干教师任增霞，被国培教育中心邀请，为农村骨干教师上了课题研讨课，得到了广大参培教师的好评。课题研究的相关论文陆续发表在《语言文字报》和《教育实践与研究》等报刊杂志，给教师们提供了以课题促教研的很好范例。

四、拉起来――由上到下，搞好网络教研

（一）建立平山教研网

为了更好地促进全县教研工作的展开，在县教育局的支持下，我们建立了平山教研网，给全县教师提供了一个合作教研的平台。各教研员都是本学科的网络管理员，每次同课异构的教学设计、课件和教学反思，都在第一时间上传教研网，以便于同学科同进度的教师们参考之用。随着县域网络的进一步完善，平山教研网对全县教研工作的不断普及和深入发展显示了越来越强大的功能。

（二）教研博客互动、交流

除了建立教研网，教研员还利用教育博客和同学科教师展开互动。有些平时不方便说的话，通过博客或留评发纸条等形式，进行心与心的交流，一些平时的教学问题就在博客交流中得到了解决。因为跟教师们交流语文到底是什么，我们写出了《语文就是一种爱》发表在了《语文学习》上；为了回答山区教师发来的纸条“巴东三峡，瞿塘峡最短，西陵峡最长，巫峡长度居中，可郦道元在《三峡》里却说‘巴东三峡巫峡长，猿鸣三声泪沾裳’，这是为什么？”我们写出了《巴东三峡巫峡长？》发表在了《中学语文参考上》；为了跟教师们探讨语文课到底应该怎么上，我们写出了《语文课要上出书卷味》；为参与《中国教师报》关于“买师资和买生源”的网络讨论，我们写出了《愈演愈烈“两买风”》，发表在了《中国教师报》上……这类简评留言条等形式，进行了心与心的交流，一些平时的教学难题在博客交流中得到了解决。

（三）探索教研新路径

在全县中小学教育事业的发展中，是网络教研由上到下、由此及彼地促成了教研员和教师们的手拉手，心交心；是网络促成了我们的思想积累和教研论文及成果的形成；是网络把“要我教研”在不知不觉中变成了“我要教研”。网络教研给全县的教学探讨注入了新活力，让教师们感到了教研的快乐和幸福，看到了提高教学质量的契机；为全县教师的个人成长提供了一条新路径。

五、站起来――由内到外，搞好培训教研

要想促进教师的专业成长，仅凭听课评课、教学探讨还远远不够。集中培训，是提高教师专业素质的有效途径。

（一）岗前培训

为了以培训促教研，我们首先搞好新教师和特岗教师的岗前培训。每年的特岗培训中，县教育局局长、主抓教学副局长、教研室主任等都亲自备课，制作课件，给即将走上工作岗位的教师讲授教研之道，培养新教师的教研意识。

（二）假期培训

每年的寒暑假，我们每位教研员都有自己的培训任务。他们汇总平时听课积累的各种问题，利用集体培训的时间展开全县集体大讨论。因为这些问题都来自平时“走下去”所了解的教学实际，教师们研讨起来非常有兴趣。这就避免了空洞的理论培训，让培训从实践中来，再回到实践中去。

（三）山区扶贫培训

平山是国家级贫困县，是石家庄市教育局“山区教育扶贫工程”的对象之一。我们很重视通过扶贫过程的同课异构，与市属学校的教师同上一节课，很快发现了自己教学中的不足，极大调动了教师们的教研兴趣，大家学优点，评缺点，叹不足，找差距，夯实基础，提高课堂效率成了共同的渴望和追求；通过一课两上，大家积极研讨，一同改进，共同成长，让教研促进教师成长成为一项看得见、摸得着、能见效的活动。

（四）邀请专家培训

我们邀请北京海淀区教师进修学校的校长和教师，利用假期为我们进行专业培训。我们还邀请了特级教师余映朝为全县语文教师现场做课，并作备课指导。他们把最好的方法，最有效的课堂，最先进的理念带给了教师，让大家耳目为之一新，眼界因之开阔，让专业成长成为教师们一种发自内心的渴望。

（五）走出去培训

除了请进来，我们还想方设法创造条件让教师和校长走出去，去看看外边的世界。我们带领校长和教师到山东杜郎口、江苏武进进行考察学习。通过学习，一些学校还和当地学校结成了对子，进行一对一帮扶。有些教师还到当地学校跟进学习，或邀请当地教师到我们这里给本地学生上课，让大家观摩、体验其教学方法。

帮和扶都是为了促进教师们“站”起来自己走。通过由内到外的培训和学习，教师们的内心有了变化，教学形式起了变化，教研气氛有了变化，课堂效率显著提高，学生的学习成绩有了很大的提升。

六、编出来――由分到总，搞好论文教研

教研，教研，要到“教“中去，还要回到“研”中来，最后还要用“研”来为“教”服务。“研”要成为果，最常态的形式就是撰写教研论文。教研室根据日常活动，进行了以论文促教研的最后编辑和汇编工作。编辑工作主要分四个环节进行。

（一）校本课程开发

平山县地域广阔，自然资源和人文资源都很丰富。各个基地根据自己的地域特点和历史文化特色编写了自己的校本课程：温塘的温泉，北冶的天桂山、水，三汲的古中山国，西柏坡的红色传统，合河口的驼梁等，都为当地校本课程的开发提供了特色，校本课程的开发和编写，促进了各基地对地域文化的研究，成为了我们教研的鲜明特色。

（二）课题研究集锦

今年3月，已结题的课题有三十多个；还有二十多个课题即将结题。为了更好地发挥以课题促教研的作用，教研室将已批准结题的课题结题报告的精华部分和一些优秀教研论文，摘录汇编，集印成册，下发给各学校，以指导教学和以后的课题研究。

（三）基地教研荟萃

一学期结束时，教研室都要对基地教研的同课异构教学设计、课件，一课多上的教案的屡次修改稿，以及主题教研的优秀教研方案进行汇总，并评选出优秀教案和教研成果，汇集成《基地教研荟萃》，下发各学校交流，并据此评选出优秀教研基地，在全县教学工作大会上予以表彰。

（四）西柏坡教研论文汇编

教研室将全县近两年公开发表的400多篇教学论文汇编成册，由每位教研员担任本学科的编审，对论文归类，共印制出2011年（上、下），2012年（上、下）四本论文集，方便了各学科教师之间的交流，促进了教师的专业发展，推动了全县教育、教研的深入开展。