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一、加强组织领导,深入推进综治工作
一年来,我牢固树立“稳定是硬任务,是第一责任”的思想,坚持把社会治安综合治理工作列为一项重要工作来抓。一是健全综治工作领导机构。年初根据人动情况,调整了综治工作工作领导小组,并与各科室及下属单位层层签订了综合治理目标管理责任书,确保了各项综治工作任务的全面落实。二是健全综治维稳工作机制。建立健全了主要领导公开接访、约访下访、领导包案、重大不稳定隐患督办等工作制度,进一步完善了单位内部安全保卫、责任追究等长效机制。三是严肃工作纪律,强化值班制度。严格执行领导带班、工作人员值班制度,确保值班不空岗、带班不缺岗。同时,要求每一名干部职工在工作时间都要坚守岗位,工作之外手机必须24小时开机,确保通迅联络畅通。四是定期督促、检查综治工作开展情况。坚持每季度召开一次综治工作例会,认真学习上级综治工作文件精神,及时研究解决在综治工作中出现的新情况、新问题,努力确保各项工作任务圆满完成。
二、充分发挥部门职能职责,积极维护社会稳定
我局作为综治工作成员单位,就业再就业、社会保障等许多工作关系到广大群众的切身利益,关系到全区的改革、发展、稳定大局,为此,我带领导全局同志,立足部门职能,细化措施、狠抓落实,全力做好人力资源和社会保障各项工作,积极维护全区社会稳定。
(一)紧盯就业增长新节点,力促就业形势持续稳定
为拓宽就业渠道,今年来,我局转变思维,推出三项新举措,拓展招聘求职新渠道。一是在火车站广场设立了园区企业招聘点,企业招聘岗位、受理求职人员登记,今年来共招聘信息200余条,招聘人员800余人;二是充分利用互联网资源,开通了“人才网”就业服务网站,实行“订单式”一站招聘。今年共有50余家企业依托该网站招聘岗位1800多个,个人求职简历600余份,近百人次通过该网站找到工作。三是依托传统媒体,借助电视、报纸、手机等平台各类招聘信息2000余条,实现了就业服务区域性覆盖。在全局上下的共同努力下,今年我区就业类民生指标全面完成。其中,“零就业”家庭安置率和工业园区定向培训两项指标位列全市第一。城镇就业率再创新高,头10个月实现城镇新增就业人员6625人,下岗失业人员再就业823人,分别完成全年任务的265%和103%。为了给区内创业提供强有力的资金支持,我局本着对口服务、前移服务、延伸服务的理念,认真做好小额担保贷款工作,今年来累计发放小额贷款1899.7万元;向市里争取重点项目扶持资金100万元,扶持的庐陵创业示范街“万安鱼头店”等10家店铺在去年落实5万元政府贴息贷款的基础上,今年又兑现了一次性创业补贴共计4.8万余元,为这些店铺做大做强提供了有力的资金支持。
(二)紧扣改善民生着力点,全力做好社会保障工作
今年来,我局以新农保试点工作为契机,以推进基层劳保所建设为提升点,以把握社保服务流程、标准为关键,大力完善社会保障体系,为改善民生、促进和谐提供直接源动力。社保民生指标均提前三个月完成市级下达全年计划数,中小学学生参保率等两项指标位列全市第一。今年头10个月,我区新农保完成征缴保费510万元,参保人数5.23万人,总参保率逾六成;完成征缴养老保险基金、工伤基金、失业保险基金等7项社保基金共计2800余万元,总参保人数6.83万人次,支付医疗保险待遇984万元。
三是加大劳动维权力度,切实维护务工人员的合法权益
一、主要做法
(一)健全了综治工作组织机构网络。根据人动情况,及时调整了综治工作领导小组人员,明确全局由陈井明局长为第一责任人,劳动监察局刘三贵局长为分管综治领导,领导小组在局办公室设立社会治安综合治理办公室,甘思霖、吴海花分任综治办主任、副主任,负责各项综治工作的具体实施和对二级局综治工作进行督察。与此同时,下属社保、就业局也建立了相应的组织机构。
(二)把综合治理工作纳入单位总体规划。于年初下发了《区人力资源和社会保障局2012年度工作要点》,将综治工作作为年度工作重要内容纳入其中,与业务工作开展同布置、同检查、同落实;下发了《区人力资源和社会保障局2012年度社会治安综合治理工作计划》,明确了2012年度综治工作指导思想、工作重点,将任务加以细化,明确到具体科室、二级局。
(三)建立了综治领导小组季度工作例会制度和重大维稳信息报告制度,明确经综治工作领导小组组长或副组长召集,每季度召开一次季度工作例会,传达上级有关综治工作文件和会议精神,听取各责任单位综治工作情况汇报,具体部署全局综治工作;凡发生工伤、劳资纠纷等导致及所属单位其他影响安全稳定重大事项,必须立即向区综治办汇报。
(四)积极深入挂点村开展综治维稳工作。年初,制定下发了《区人保局协助挂点村维稳工作计划》,对工作重点进行了明确;3月份,我局由副局长带队,到挂点村镇村进行综治维稳专题调研,了解该村矛盾纠纷情况,协助村委解决了矛盾纠纷1起。
(五)定期开展本局矛盾纠纷排查调处活动。上半年召开调处会6次。
(六)坚持节假日及“”等重大敏感时期值班制度。年初由局办公室统一制定值班方案,由一名分管领导率两名干部担任单位值班,局办公室对值班干部在位情况进行随机抽查,发现离岗离位的,在全局范围内通报批评;屡教不改的,取消年底评先资格。
(七)严格落实人防、物防、技防措施,财务室、档案室均安装了防盗门、防盗窗,配置了灭火器,局综治办每月对重点部位安防情况在局例会上进行汇报,今年来局办公楼未发生盗窃、失火等事故案件。
(八)认真开展综治和法律宣传教育,制定下发了《2012年法制宣传教育计划》,以《宪法》、《劳动法》、《劳动合同法》等法规为重点,坚持集中学习与个人自学相结合、理论学习与具体工作相结合,在全局形成了学法用法的浓厚氛围,促进了各项工作的开展。
(九)认真做好平安创建工作,明确综治工作分管领导为负责人,由局办公室具体主抓,就业局、社保局、劳动监察局协助落实。
(十)加强单位互联网管理,无网络安全事故。计算机全部按信息中心指定交换机端口号接入,同时实行固定IP绑定MAC地址,每台计算机均安装了360安全卫士和360杀毒软件,设置开机密码。
(十一)年初组织各科室、二级局负责人签订了综治目标管理责任书。将综治责任层层分解,落实到人。
(十二)建立了综治责任人政绩档案,做到一人一档。
二、存在不足及下一步方向
(一)工作主动性还不够,各单位满足于按既定方案完成任务,没有提前量。下一步要根据有关政策,提早谋划好平安创建、帮扶刑释人员再就业、化解劳资纠纷等工作,要在重点乡镇、村及大型企业建立常驻制度,把工作做到实处。
一、领导重视,组织到位
及时调整了建设和谐平安和社会管理综合治理工作领导小组,由局长担任组长,其他局领导担任副组长,领导小组成员由各部门主要负责人组成,领导小组下设办公室,并指定专人负责日常具体工作,结合城市管理工作实际,制定了《城管局2014年建设和谐平安和开展综治活动工作要点》,召开了全体干部职工大会,认真学习了全政法工作会议精神以及综治委有关综治工作的文件精神,使全体干部职工明确了这两项活动的意义、目标、内容,统一了思想认识,夯实了思想基础。
二、注重宣传,广泛发动
在开展建设和谐平安和综治工作的过程中,我局不断强化宣传教育,积极开展形式多样的教育活动,通过板报、宣传栏等形式来重点宣传创建和谐平安和综合治理的意义目标,提高全局干部职工对这两项工作的认识,为创建和谐平安和综合治理活动的开展奠定了良好的思想基础,为实现活动目标起到了事半功倍的作用。
三、加强校园周边环境整治
1、安排专人重点整治一小、二小、三中、四小、城幼儿园等校园周边环境,规范校园周边摊贩占道经营、摩托车乱停乱放问题,保证校园道路畅通,消除学生出行的安全隐患。
2、三小路段道路:老建设西路改造工程已完成工程量的100%,现工程已验收完毕,将方便学生正常安全往返学校,消除出行安全隐患。
四、完善城市管理和服务指挥中心建设
为了进一步发挥城市管理和服务指挥中心在建设品质城市中的综合协调作用,我们将指挥中心作为社会管理创新项目加以完善。一是加大了宣传力度。开展各种形式的宣传活动,使群众能熟记城市管理服务热线号码,方便群众使用指挥中心服务平台,为下一步实施数字化城管奠定基础。二是强化了调度。对于情况复杂的群众投诉,由分管指挥中心的领导亲自协调调度,保证问题能得到妥善解决。累计收到群众投诉、来访和咨询1199件,已办结1188件,正在办理11件,办结率为98%,从对办结事项回访情况来看,满意率为99%,群众对城市管理和指挥中心给予了比较充分的信任。
五、妥善处理群众上访,积极关注民生
做到专人接听电话,强化办理责任,落实办理措施。累计回复网上104件,答复群众来信来访22件,处理城市管理和服务指挥中心件96件。
六、做好应急维稳,提高应急处理能力
组建了一支30人的应急维稳队伍,快速反应,迅速处理突发事件。累计出动民兵应急队伍300余人次,前往历市镇、岭北镇扑救山火。
一、坚持把综治工作作为一项重要工作来抓
县旅游局高度重视社会治安综合治理工作,坚持把综治工作纳入全年工作计划,摆上重要位置,紧抓不放。年初,根据县综治委要求,成立了以胡冰彬局长为组长的综治工作领导小组,落实了综合治理责任制,目标管理责任制,建立健全了综治工作的资料台帐。
二、切实抓好全县旅游行业综治工作
在日常工作中,县旅游局认真落实了景区景点、宾馆酒店、旅行社等旅游经营单位的社会治安防范措施,将安全生产、安全防范提示做到常抓不懈。特别是节假日、五一小长假到来之前,县旅游局都要集中部署各旅游经营单位治安防范安全工作,重申“安全责任重于泰山”,要求各旅游经营单位不得有丝毫的麻痹和松懈,思想上要认识到位,措施上要落实到位。加强旅游治安防范和安全质量检查,并严格执行事故责任追究制。为实现“健康、安全、秩序、质量四统一”的目标,我局要求各相关单位出台有效措施,确保旅游安全生产:1、要切实做好应对各类公共性突发事件的准备工作,要制定紧急救援工作预案,发生重大旅游安全事故后,要及时妥善处理,并按报告制度及时上报。2、要认真抓好交通安全工作,租用车辆时,必须选择信誉好的车队、技术性能合格的车辆和责任心强、技术过硬的驾驶员,签订有关合同,明确事故责任追究制度和赔偿处理办法。要强化对驾驶员和旅行社陪同人员的安全防范教育,采取有效措施,杜绝司机违章驾驶、疲劳驾驶等行为,确保旅游行车安全。3、对容易发生火灾、食物中毒以及群死群伤事故的人员聚集地(星级饭店、景区景点等场所)要进行检查,切实排除各种安全隐患。4、组织人员对旅游区(点)的步道、接待设施、娱乐设施等进行检查并及时维修,排除各种安全隐患。
三、加强基层联系点的指导和督查工作
湖村乡大坂村是县旅游局新农村工作的联系点。局里相关领导多次到该村调研指导综治工作,认真分析并及时建立准确的治安形势分析评估机制。同时,指导该村创新农村治安防范工作体系,大力推进治安防控建设,构筑社会治安防控体系。
一年来,横山镇司法所在镇党委、政府的领导下,在上级司法行政机关帮助指导下,在与兄弟部门密切配合下,根据本镇实际,巩固提高“五五”普法的宣传成果,做好“五五”普法的考核验收,深入推进本镇的依法治理,积极参与配合大调解机制的运转,妥善化解民间纠纷,落实监督刑释解教人员的安置帮教,稳扎稳打的开展社区矫正工作,积极参与镇党委、政府安排的各项中心工作,较好地维护了全镇的稳定,促进了经济建设的发展。
一、深入开展普法宣传教育,全面推进全镇的依法治理工作。根据本镇实际,制定了年度依法治镇工作计划,“五五”普法学习计划,进一步完善了政务公开、村务公开的内容,使群众关心的热门窗口不断发挥积极的作用,促进了办事程序公开和办事结果公开,较好地推进了基层的依法治理工作。利用多种形式开展法制宣传教育,不断提高公民的法律素质和依法办事的意识,在配合政府各项中心工作开展中,不断丰富法制教育内容,贴近实际,贴近社会热点、难点问题进行法律法规宣传,逐步转化群众的思想认识问题和对立情绪。
二、积极化解民间纠纷,确保一方平安。一年来,全镇各级调委会共受理民间纠纷24起,调解24件,调解成功24件,较好地维护了社会的稳定,为本镇经济的发展营造良好的氛围。根据上级指示,司法所在认真进行每月矛盾排查的工作的同时,更注重于元旦、春节、五月、十月的矛盾纠纷专向排查工作,经镇村两级调委会共同努力,使一些可能影响大局的群体性纠纷得到逐步平息,使一些即将激化的纠纷得到解决。今年10月下旬,我镇内的丰润针织厂因破产拖欠农民工工资的纠纷,牵涉人数众多,民愤大,司法所和镇调委会依法耐心做群众工作,说服针织厂厂长,拍卖厂里的机械设备首先用于清偿工人的工资,使其纠纷得到妥善解决。
三、做好刑释解教人员的安置帮教工作,减少重新犯罪,维护社会稳定。今年来,全镇共有12名刑释人员回归社会,我们都及时落实了帮教小组,建立一人一档。同时镇村两级帮教组织对年以来的名刑释解教人员实施了分类管理,分级走访。及时了解掌握这些特殊人员的思想、就业、生活等情况,妥善解决他们回归社会后的一些具体问题。预防和减少了重新犯罪。
四、稳扎稳打开展社区矫正工作,维护社会稳定。今年社区矫正工作在全省全面铺开,,司法所共接收了1名矫正对象,及时落实帮教小组,建立一人一档,针对各矫正对象的不同情况制定不同的矫正方案。认真组织矫正对象参加每周3小时的公益劳动,提高他们的思想觉悟;每月组织一次集中教育,宣传法律法规,提高他们的法律意识,对矫正对象进行每月一次的集中走访,及时掌握他们的思想、生活情况,预防和减少重新犯罪。
一、坚持把综治工作作为一项重要工作来抓
县旅游局高度重视社会治安综合治理工作,坚持把综治工作纳入全年工作计划,摆上重要位置,紧抓不放。年初,根据县综治委要求,成立了以胡冰彬局长为组长的综治工作领导小组,落实了综合治理责任制,目标管理责任制,建立健全了综治工作的资料台帐。
二、切实抓好全县旅游行业综治工作
在日常工作中,县旅游局认真落实了景区景点、宾馆酒店、旅行社等旅游经营单位的社会治安防范措施,将安全生产、安全防范提示做到常抓不懈。特别是节假日、五一小长假到来之前,县旅游局都要集中部署各旅游经营单位治安防范安全工作,重申“安全责任重于泰山”,要求各旅游经营单位不得有丝毫的麻痹和松懈,思想上要认识到位,措施上要落实到位。加强旅游治安防范和安全质量检查,并严格执行事故责任追究制。为实现“健康、安全、秩序、质量四统一”的目标,我局要求各相关单位出台有效措施,确保旅游安全生产:
1、要切实做好应对各类公共性突发事件的准备工作,要制定紧急救援工作预案,发生重大旅游安全事故后,要及时妥善处理,并按报告制度及时上报。
2、要认真抓好交通安全工作,租用车辆时,必须选择信誉好的车队、技术性能合格的车辆和责任心强、技术过硬的驾驶员,签订有关合同,明确事故责任追究制度和赔偿处理办法。要强化对驾驶员和旅行社陪同人员的安全防范教育,采取有效措施,杜绝司机违章驾驶、疲劳驾驶等行为,确保旅游行车安全。
3、对容易发生火灾、食物中毒以及群死群伤事故的人员聚集地(星级饭店、景区景点等场所)要进行检查,切实排除各种安全隐患。
4、组织人员对旅游区(点)的步道、接待设施、娱乐设施等进行检查并及时维修,排除各种安全隐患。
三、加强基层联系点的指导和督查工作
湖村乡大坂村是县旅游局新农村工作的联系点。局里相关领导多次到该村调研指导综治工作,认真分析并及时建立准确的治安形势分析评估机制。同时,指导该村创新农村治安防范工作体系,大力推进治安防控建设,构筑社会治安防控体系。
一零年七月十四日,“爱华支教”团队第一队人马自成都向泸州市叙永县白腊苗族自治乡亮窗口村小学进发。一路上风雨大作,电闪雷鸣,土地塌方滑坡不断……历经重重艰辛与波折,大部队于七月十八日胜利会师亮窗口。自此,开始谱写了一首宏伟的篇章。
亮窗口——白腊苗乡最为偏僻与贫困的一个村,距原白腊乡政府所在地需步行两个多小时。距县城四十多公里,交通极为不便。当地为云贵高原边缘地带,地势高峻陡峭;山势起伏大,河短水急,从山脚下步行上亮窗口小学,真有“蜀道之难”的韵味;气候寒湿,阴雾多雨。七月份当山脚下人们在穿短衬衫时,山上还得外套,棉被伺候;植被丰富,垂直分异明显。自山脚向山顶依次为亚热带常绿阔叶林、落叶阔叶林、温带常绿针叶林、山地草原;野生动物种类繁多,白鹭、鹰鹊常见,偶有刺猬、野猪等。居民以种植玉米为业,鲜有水稻,蔬菜稀少,人民生活条件艰苦。但民风淳朴,无论老少,皆热情好客,善良勤劳。尤其尊师敬长,这些优秀传统可是我们支教队员深有体会的
在这二十多天的支教生涯中,每天都会有许多平凡的感动触动我们每位老师的心灵。我们每天都向孩子们传递着来自城市的新鲜与世界的精彩,向他们讲述北京奥运、上海世博,也向他们告知汶川灾情、玉树苦难……时而低沉,时而高亢,所有的队员老师都恨不得把自己所了解到的东西全数教授给那些渴望知识与梦想的孩子。然而,对于我们这群特殊的老师来说,每天实质上是孩子们给我们的心灵上了一次次生动的课!记得四年级有个叫启娥的女孩子,是其父抱养的,她自己也知道自己身世。其父姓周,也是其祖父抱养的。这样,启娥家三代人三个姓。懂事的小姑娘没有妈妈,家里只有奶奶和爸爸,她勤劳善良,而且特别成熟稳重,记得第一次见面,我不经意间问她:你读书时为了谁啊?看了我一眼,她缓缓道来:我是为自己读书,我要先好好读书,将来不成为别人的负担,才能照顾和帮助别人。听着这单纯的话语,我不禁吃了一惊,惊叹在如此偏僻与贫穷的小山村里,一个没坐过车、没看过电视的小女孩能有这样的思想深度!我很折服,还有其他的许多非常勤奋和懂事的孩子。如父亡母出走的三年级女生小娟,和年迈的爷爷奶奶生活在一起,承受着丧父失母之痛,还要照顾五岁的弟弟、安慰爷爷奶奶;像三年前失去母亲的六年级男孩小林,其父已六十高龄,无经济能力。他放学早早地道家喂猪养牲,还要照顾两个不懂事的妹妹。还有许许多多没有户口的可怜孩子,成绩好却没有学籍,许许多多……每次从学生家家访回来,我们的心情都很沉重。渐渐的,因为艰难而特殊的学生家庭太多了,我好像有点麻木了……但让我们欣慰的是,这些经历了苦难与波折的孩子,也许抱怨过,也许偷偷哭泣过,甚至也许曾想过放弃,但他们都乐观坚强地坚持到了今天,他们依然善良,依然纯朴!苦难之于他们更多的是成熟和懂事。
我们这些特殊的支教老师,是一群心的流浪者。不经意间流浪到了亮窗口,我们得到了太多的体会。在这里,我们见证了留守儿童的成长之歌,单亲孩子的奋斗之路,孤儿学生的心路历程,特困学子的善良乐观;在这里,我们懂得了怎样学会在贫困中坚守,怎样学会在逆境中微笑,怎样学会在孤独中成长,怎样奋斗才能从穷山沟里飞出凤凰!他们从不抱怨,我们不曾懈怠!回想爱华亮窗口之旅,一路走来,我们历经风雨泥泞、坎坷波折。两周的前期准备时间,我们完成了从甘肃陇向到贵州赫章再到四川叙永的贫穷小学的筛选;我们完成了从一个不被人支持的幼稚项目到艰难发展到了拥有十一个队员的组织;我们从一无所有到收集了大批学习文体用品、捐赠的衣服、善款达到二千三百多元!一个多月的时间,爱华支教从一个简单而幼嫩的想法到圆满完成既定计划,获得当地学生家长的好评。我们付出了许多,承受了许多,但爱因为在心中,平凡而不平庸。我们不为名利,舍弃放假做兼职的大好机会,舍弃朋友聚会的机会,有的队员过家门而不入,舍弃了家人期盼、思念的目光。这一切,只为了心中那份最原始纯朴的爱意。
时至今日,亮窗口之旅已渐行渐远,但那些孩子期盼的目光,临走时他们哭泣的脸庞永远印在了我们的心中。已无法用时间的来抹用,我们和他们有个约定:只要你们好好学习,哥哥姐姐们还会来看你们的。这是个美丽的谎言,或许明年我们这支队伍因为各种原因,许多队员不能再来亮窗口,但是,从另一个方面来说,我们不曾离去,所以无所谓再来。
在这金秋的季节,爱华支教亮窗口之旅胜利结束。感谢白腊苗乡的各位领导和亮窗口村热情的村长、支书的大力支持,感谢白腊中心校和亮窗口小学的老师的无限关爱,感谢香港林昭球先生对我们活动给予物质和精神上的支持,最后再感谢亮窗口所有来参加活动的学生们。谢谢你们!这个夏天我们收获了太多,我们需要铭记的太多。爱华支教,立足于无偿支教事业,愿这份爱长久地传承下去!
律师月末工作总结范文一
律师实习的一年在不经意间就已匆匆过去,在这一年于我而言,经验和理论同时受到了洗礼,在祝律师的指导下,以及浩博所很多热心律师的帮助下,我学到了很多。不仅有理论知识和实务操作,还有很多待人接物的人生道理。自己的实务经验从零开始慢慢堆积,理论也更好的在实践中得到检验、深化。时至今日,在我准备正式迈出职业生涯的第一步时,对这个律师职业充满了深厚又复杂的感情,也对所有帮助我成长的人充满了感谢。
律师这个职业是复杂的,或者也可以说是单纯的。其复杂之处在于,律师不仅要服务于各行各业的当事人,包括各种刑事犯罪嫌疑人,而且要和公安、检查、司法、政府等众多部门打交道。一个案件往往涉及很多的法律关系和社会层面,对于一个刚刚起步的年轻律师而言,这些经验无疑是极其鲜活而又深刻的。其单纯之处在于,正如《律师法》所要求的,律师的首要职责,乃是服务于当事人。是以事实为依据,以法律为准绳,为当事人争取最大的合法利益。律师没有自己的立场,如果有,那也是符合法律和正义以及律师职业准则和道德标准的立场。除此之外,律师别无其他立场。这种作为追求公正之过程中的"工具性"价值,使我在过去一年来不断思考和重新定位于自己的立场和位置,也不断尝试构建自己作为一名律师应当具备的职业特质。
过去的一年中接触的实务工作也使我更深刻地认识到,"法律的生命在于经验",理论的学习固然培养我们的基本思考逻辑。但是,没有实践检验的理论必然是僵死的,了无生气,难以适用,也最终无法起到其保护权利、维护正义的初衷。尤其对于律师而言,一名成功的律师,过硬的理论纵然必不可少,但是娴熟灵活的实践经验更加重要。把理论知识投射到鲜活的案例中,变为维护当事人权益的有力武器,想方设法履行自己的职责,完成自己的任务。这些都是成为一名优秀律师应当具备的根本素质。
此外,成为一名合格的律师,还需要有着坚实的职业道德和职业操守。去年以来,由李庄案引发的,不仅是对律师职业环境的思考,而且引发了对律师职业伦理的反思。法律职业伦理的构建需要我们每个人共同的努力。对于我个人而言,培养正当的职业道德,坚守法律人的职业底线,塑造坚定的正义观、价值观,是我在走向律师执业之路时首先需要实现的目标。
律师作为一个职业,还在成长和完善之中。在当下的环境中,律师承载着更多法治建设和权利维护的功能。中国的法治社会必将建成,律师也必将在此过程中发挥自己独特的作用。今天律师界遇到的困难和反复,正是今天中国所有人在追求法治和正义的过程中所遭遇的挫折和反复的缩影。但是,我们应当坚信于未来,因为,未来就在于我们今天所做的点点滴滴。未来就在我们每一个人的手中。作为一个即将走上执业之路的我,更是坚信这一点。
再次感谢浩博所的各位师傅和同仁在过去一年中给予我的帮助,在你们中的很多人的身上闪现对于法律事业的执着,使我获益良多,也必将使我更有力的前行,激励我为成长为一名合格的法律人而继续奋斗。
律师月末工作总结范文二
先感谢所里能给我机会,让我开始自己理想的第一步;非常感谢主任和同事们帮助教导,让我认识、理解律师行业、也正慢慢的融入进律师行业;非常庆幸有这么好的实习环境和学习氛围,使自己的知识和能力正逐步的提高。这是自我转变的两个月,态度由消极变积极,学习做事由被动变主动,对世对人对事由悲观变乐观进所前面试中一个劲的追问主任所里对实习人员有怎样的培养计划,也在短短的两个月里变成了自己踏上律师行业前的一步一步正在实现的目标。这是一个集体、一个团队对一名新人的影响,也是一个力求上进的人正主观能动的不断学习、充实自己,使自己尽快成长。与其说是写一下工作总结,不如说是写一下自己的收获和体会,和大家谈一下自己的感想。
”要做事先做人”“从小事做起”当面试中主任又一次讲到这些话时,我被深深的触动了,曾几何时,怀着远大的理想和满腔的热情,却碌碌无为的走到今天;茫茫碌碌的工作却不曾抬头思索一下人生的哲理。所里的同事给我树立了良好的榜样,大家乐观积极的心态、欢乐融洽的氛围、勤恳务实的工作作风、专业上精益求精的学习钻研精神无处不深深的感染这我,感化着我,使我自己渐渐地、不断地在各方面提高自己。自己更要把握住机会和时间使自己尽快的学习和成长,能分担所里的事务,不能总是作为一名“消费者”,要尽快成为一名“创造者”。
当然,通过这段时间的实习,也使我感到前所未有的压力,认识了律师也是竞争激烈的行业,从思想更加深刻得体会到了不断自我学习的重要性。我们是一个积极上进的团队,是一个不断学习提高的团队,每次的周学习会议,个人一个周的收获体会让大家分享吸收,每个人在业务上都得到了提高,尤其是我这样的的一名入门者,更是得到了充实,增长了见识。每次自己低级幼稚的问题得到大家耐心的解答,自己既有收获的快乐,也有耽误大家时间的惭愧。
这段时间的收获除了为人做事方面要真诚踏实外,专业上主要是学习建设工程过程服务,对现场服务要注意的问题、应对的措施自己都记在本子上,时常翻阅,并不断的记录补充新的问题。通过整理会议录音和周六讨论,体会律师们现场的解答问题的方法和技巧,吸收掌握。通过几个人整理施工签证的文章,使自己对签证的相关知识有了深刻的认识和把握。通过整理案卷,学习相关法律文书的写法,了解诉讼流程学习诉讼技巧。
今后半年的实习学习主要放在一下几个方面:
过程服务方面,全程跟从主任xxx项目,多学多问,到12月份达到或超过主任的要求,能独立进行过程服务,解决过程问题。(请示:可能的话,在重点跟踪一个项目学习的基础上,如果时间允许,可以跟从主办律师走访其他项目。因为面对不同的项目经理有不同的沟通技巧;甲方层次不同,施工中会出现不同的要解决的问题;各律师风格不同,也利于学习中各取其长补己之短。)
诉讼业务方面,实践上跟从学习律师手头的案件(一件一件进行),自己主动参与,进行案件诉讼材料的整理和起草,主动协助办案律师进行工作。理论上还是抓紧时间学习法律和司法解释,结合所里的案卷学习法院判案的法律适用倾向,做到解答咨询时准确。在半年后能够做到能独立执业。结合过程服务的学习和周例会律师交流的经验,将律师们过程服务的经验结合法律整理成文章,既能作为所里的经验积累,以便交流学习,还可以作为开展给施工企业培训的材料。(初步想法:利用实习期间时间充足,大框架是从建设工程招投标开始,直至竣工决算工程款付清为止,通过学习并结合律师们的经验交流,将全程中应当注意的问题、防范的风险、出现问题的应对措施等逐步地、分段分项地完善出来,最终形成系统的书面材料。)
律师月末工作总结范文三
九月十日入律所实习至今已有两月有余,感受颇多,著述为文,当作总结。
律师要有自己的思想,没有思想的律师,永远也不会成为一流的律师。律师不仅要精通法律,而且要了解商业运作的归则,理解法官裁判风格,体会客户真正需求。同时,思想上还要注意遵守执业操守,保护好律所和律师自身利益。如果要很好平衡这些复杂的关系,需要律师将具体的工作逐步提炼为工作的指导思想,并贯彻到工作中去。这样,有了思想作为指导,律师才能逐步形成成熟、稳健的执业风格。
律师仅有思想是远远不够的,还要特别注重实务操作。
律师实务操作应是多方面的,但本人想结合自身实习经历,浅谈两个方面。
一、 案源
有人认为实习律师当务之急是学会案件实务基本操作,有没有案源关系不大。实习时要尽快学会实务操作无可厚非,但对待案源的态度,本人不敢苟同。实习是为一年后执业作准备的,如果不从实习阶段就开拓案源,那么等到执业以后再去开拓,就会像有的律师一样,执业都一两年了,还没什么案子,没什么事可做。那就未免太晚矣!其实自己细想一下也知道,案源是律师执业的第一步,没有案子,还怎么做案子?所以说实习阶段就开拓案源是十分必要的也是十分重要的!既然如此,那么怎么开拓案源呢?
我想主要应从以下两方面着手:
(一) 宣传自己,让客户了解自己。把自己的个人情况放到律所网站上,制作个人网页,参加网上法制评论等。
(二) 培养社会关系
1. 培养与公检法司各机关的关系
(1)通过随律师一起办案认识各机关人员,了解他们,向他们虚心请教一些办案问题,与他们进行良好的沟通,给他们留下深刻地印象。
(2)通过自己单独去办律师交办的案子,认识各机关人员。去办案见面时要有礼有节,给人留下良好地第一印象,这样第二次去就会记得起你。如此“一回生二回熟”,彼此就认识了,以后要办类似的案子就方便多了。
(3)通过亲戚朋友认识公检法司各机关人员,并保持良好关系。
2.培养与各企业的关系
(1)通过亲朋好友认识企业管理人员,与他们沟通,保持联络,为一年后打下案源基础。
(2)通过老乡关系认识了解一批企业,为今后执业,进一步开拓案源和市场。
3.培养社会其他各行各业人员的社会关系,包括同事关系。
律师的实习工作总结
九月十日入律所实习至今已有两月有余,感受颇多,著述为文,当作总结。
律师要有自己的思想,没有思想的律师,永远也不会成为一流的律师。律师不仅要精通法律,而且要了解商业运作的归则,理解法官裁判风格,体会客户真正需求。同时,思想上还要注意遵守执业操守,保护好律所和律师自身利益。如果要很好平衡这些复杂的关系,需要律师将具体的工作逐步提炼为工作的指导思想,并贯彻到工作中去。这样,有了思想作为指导,律师才能逐步形成成熟、稳健的执业风格。
律师仅有思想是远远不够的,还要特别注重实务操作。
律师实务操作应是多方面的,但本人想结合自身实习经历,浅谈两个方面。
一、 案源
有人认为实习律师当务之急是学会案件实务基本操作,有没有案源关系不大。实习时要尽快学会实务操作无可厚非,但对待案源的态度,本人不敢苟同。实习是为一年后执业作准备的,如果不从实习阶段就开拓案源,那么等到执业以后再去开拓,就会像有的律师一样,执业都一两年了,还没什么案子,没什么事可做。那就未免太晚矣!其实自己细想一下也知道,案源是律师执业的第一步,没有案子,还怎么做案子?所以说实习阶段就开拓案源是十分必要的也是十分重要的!既然如此,那么怎么开拓案源呢?
我想主要应从以下两方面着手:
(一) 宣传自己,让客户了解自己。把自己的个人情况放到律所网站上,制作个人网页,参加网上法制评论等。
(二) 培养社会关系
1. 培养与公检法司各机关的关系
(1)通过随律师一起办案认识各机关人员,了解他们,向他们虚心请教一些办案问题,与他们进行良好的沟通,给他们留下深刻地印象。
(2)通过自己单独去办律师交办的案子,认识各机关人员。去办案见面时要有礼有节,给人留下良好地第一印象,这样第二次去就会记得起你。如此“一回生二回熟”,彼此就认识了,以后要办类似的案子就方便多了。
(3)通过亲戚朋友认识公检法司各机关人员,并保持良好关系。
2.培养与各企业的关系
(1)通过亲朋好友认识企业管理人员,与他们沟通,保持联络,为一年后打下案源基础。
(2)通过老乡关系认识了解一批企业,为今后执业,进一步开拓案源和市场。
3.培养社会其他各行各业人员的社会关系,包括同事关系。
二、执业技巧
执业技巧应是多种多样的,但两个多月的实习让我感受最深的,莫过于律师的收费标准、收费技巧和如何准备立案。
(一) 收费标准和收费技巧
每个律所都有自己的规定,但国家物价部门和律师协会又有些不同规定,这其中有些重合和交叉,这些怎么处理。这是一般情况。还有特殊情况的,比如疑难复杂案件怎么收费?到底可收多少费用要心里明白。实习一个月还没搞明白,而且自己对此还没予以足够重视。用主任的话说“吃饭家伙还没掌握好”。自从主任前几天的一次谈话,才使我醍醐灌顶。的确,自己连入行之门都搞不清楚,谈何入行?一般案件按照收费标准计算,根据省律师协会文件确定的疑难复杂案件可以在收费标准的1-5倍内收费。对一些个人当事人确实经济有困难,也可在当事人提交申请减交后,经主任批准略收低些。
(二) 如何准备立案
1. 了解案情,倾听当事人陈述,与当事人良好沟通,深刻理会当事人真正意图,合理分析案情,告知当事人成功的可能性和注意事项,让当事人心中有底又有信心,但不要打保票,把话说死了。
2. 写律师法律文书
(1) 写起诉状
a、民事起诉状
在全面了解案情的基础上写好起诉状。这写起诉状需要先有个初稿,再细化修改,“文章是改出来的”,起诉状也不例外,但一般改两次就差不多了。文字上要言简意赅,格式上符合文书要求。一般起诉状文书不要超过两张纸,因为不是每个法官都有这么耐心和细心的,所以力求意尽的前提下求简。
b、刑事自诉状
多看律所律师往年诉讼的典型文书,然后结合案情自己写。
c、行政起诉状
律所行政案较少,自己可看些法律文书方面的书。
(2) 辩护词
要学写辩护词,就要看律师典型的刑事辩护词,作为参考多学习,多请教,不懂就问。
(3) 词
要多看词,再结合律师交办的案子自己写,写完后经律师看后有哪些不足,自己再改,体会一下自己为什么这些没有注意。
3. 案件表。
依表顺序装订,要记住。通过办案多次装订来掌握,按当事人人数制作副本。
4. 去法院立案。
注意自己先算一算诉讼费 ,好自己先准备费用。
以上是两个多月来的实习心得,作个总结,当今后指导。
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一、高度重视,扎实抓好旅游安全工作
我局牢固树立“安全是旅游业的生命线”这一科学发展理念,始终坚持把安全工作放在首位,严格落实安全生产“一岗双责”,各项安全工作做到了有部署、有计划(安排)、有行动(检查)、有总结。切实把旅行社租用车辆和团队运行安全、旅游道路交通安全、食品卫生安全、消防安全、假日旅游安全、水上安全和特种设施设备安全等作为检点,在落实责任、强化监管、治理隐患、完善制度等方面加大了工作力度,确保全市旅游安全工作督查到位,万无一失。
一是制定了“百日安全”、“安全生产年”和“黄金周”及假日小长假等安全工作,制定了方案、明确了要求、落实了责任。二是在“行业安全大检查”、专项检查行动中,通过明查暗访了解情况,提出整改意见,检查做到了全面、细致,一个单位不漏、一个环节不差,检查内容不仅局限于旅游重点设施安全,还要涉及食品卫生、治安、旅游交通等安全工作,通过检查和整改,切实保障旅游者的生命、财产安全。三是领导带队督查。2月4日和9月30日,分别由市政府副市长李小端和喻双带队,有旅游、规建、安监、卫生等部门负责人参加“春节”、“十·一”节前旅游市场综合检查,分别检查了古蔺太平镇红色旅游区、兰尊大酒店、黄荆景区、天仙硐景区等涉旅单位。局领导分别带队检查了江阳、龙马潭、纳溪三区和合江、古蔺、泸县三县的旅游部门和涉旅企业安全工作情况。
据统计,全年共检查7个区(县)旅游管理部门,出动检查人员700多人次,向涉旅企业发出书面整改和建议300余条,发放旅游安全和卫生健康资料11700份,确保了全市未发生一起旅游安全事故。
二、依法治理、维护旅游市场秩序
1、加强督查工作,推进依法行政。①加强对各区县旅游管理部门的行业指导、检查和监督管理工作,积极推进行政效能建设;在全行业积极开展旅游业政风行风工作;进一步健全旅游市场综合治理、质量监管、行业自律、工作联动和旅游行政执法责任制工作。②按照《旅行社条例》等相关法规的规定,完成了年度旅行社业务年检和导游年审工作。全市20家旅行社顺利通过年检;全市155名导游人员中105名通过年检,6名暂缓通过年审,44名不予通过年审。
2、加强人才培训,提升执法人员素质。组织各区(县)旅游行业管理和执法人员开展旅游法规、安全等方面的培训2期。邀请省上专家和职教院老师对我市旅行社总经理和导游人员共150人进行《旅行社条例》及实施细则和礼仪礼貌等方面的培训。
3、积极开展旅游市场整治工作。认真开展“绿盾行动vi”旅行社合同及服务网点专项治理工作和2010旅游服务质量提升年第一、二次旅游市场检查周活动,活动开展以来,全市旅游执法系统共出去执法人员1200余人次,检查旅行社20家、旅行社分社6家、旅行社门市部26家、导游人员200余人次,提出整改意见和建议200余条。通过检查,进一步规范了我市旅游市场秩序。
4、依法、公平、公正处理旅游投诉。确保所有投诉在第一时间、第一地点得到有效处理,同时,积极做好游客、咨询和维稳工作。全年受理旅游投诉5件,办结5件,结案率100%;接受旅游咨询350余人次;无一例群体性上访事件和较大以上旅游投诉发生以及无行政复议案件发生。
三、大力推进行业精神文明和标准化建设工作
社区党总支十分重视加强人民调解组织和法律宣传队伍建设,充分发挥调委会、调解员化解居民矛盾、维护社区稳定的作用。几年来,积极化解了房屋拆迁、环境卫生、低保待遇、邻里矛盾等民间纠纷200余起,调解成功率98%。做到了一把钥匙开一把锁,缓和居民矛盾,秉公调解,维护了社区的稳定、和谐。
第一社区对辖区内刑释解教人员采取引导、扶持、教育、管理相结合的手段和方式,做到一人一档,底数清,责任明。每季度由责任人对其进行面对面思想帮教,促进转化,同时帮助解决就业等生活困难问题。顾硕是年度劳教释解人员,在社区的帮助和教育下,他能积极参与社区的公益性活动。
为进一步确保辖区内安全稳定,社区还充分发挥由辖区民警、居民委工作人员及老党员、老干部、老工人组成“五组一站一队”工作网络,参与社区矛盾纠纷排查工作。义务治安巡逻员每天佩戴标志在居民区巡逻,足迹遍布了社区的每个角落,他们风雨无阻宣传法律知识、排解矛盾、化解纠纷,每月25日反馈收集情况,已形成制度。特别在重大节日期间及特殊敏感时期,对重点人有不良动向的,及时汇报,社区立即采取调解和稳控措施,并将其稳控在居住地。几年来,第一社区已成为无上访、无重大安全事故、无恶性治安案件的“三无”社区。
五年里,局直第一社区的普法工作任重道远。局直城建局、分局司法局领导多次前来检查工作,了解普法动态。遇到新问题,在精神和物资上都给与了指导鼓劲和大力支持。社区在普法材料内容上做到精全齐,这29本普法内业材料,凝聚了他们的心血和汗水,说明了他们工作的丰硕成果。
五年普法,居民群众男女老少法制理念增强,主动学法守法,违法乱纪现象基本杜绝。社区社会风气明显好转,从根本上杜绝了“法盲”的存在。
五年里,社区共评出了文明家庭、五好家庭40余户,这些家庭又以点带面,自觉学法带动了更多的人员守法,社区干部与群众通过共同学法,拉近了彼此的距离。普法成果显着,居民群众在社区活动室娱乐增智,男女老少在广场公园活动健身,社区生活一派和谐景象。
通过深入开展“五五”普法工作,社区居民的法律意识和法制观念得到提高,学法、懂法、守法、用法的氛围逐步形成,既享受权利又自觉履行义务的观念逐渐树立,一些影响社会稳定的老大难问题得到解决,各类矛盾纠纷和上访事件大幅度减少,治安状况明显好转。社区树立“小社区、大文化”的发展战略,组织社区居民群众开展各种形式的文艺演出和体育活动20余场次,使居民文化生活丰富多彩,增强了社区的凝聚力和向心力。
一、高度重视,扎实抓好旅游安全工作
我局牢固树立“安全是旅游业的生命线”这一科学发展理念,始终坚持把安全工作放在首位,严格落实安全生产“一岗双责”,各项安全工作做到了有部署、有计划(安排)、有行动(检查)、有总结。切实把旅行社租用车辆和团队运行安全、旅游道路交通安全、食品卫生安全、消防安全、假日旅游安全、水上安全和特种设施设备安全等作为检点,在落实责任、强化监管、治理隐患、完善制度等方面加大了工作力度,确保全市旅游安全工作督查到位,万无一失。
一是制定了“百日安全”、“安全生产年”和“黄金周”及假日小长假等安全工作,制定了方案、明确了要求、落实了责任。二是在“行业安全大检查”、专项检查行动中,通过明查暗访了解情况,提出整改意见,检查做到了全面、细致,一个单位不漏、一个环节不差,检查内容不仅局限于旅游重点设施安全,还要涉及食品卫生、治安、旅游交通等安全工作,通过检查和整改,切实保障旅游者的生命、财产安全。三是领导带队督查。2月4日和9月30日,分别由市政府副市长李小端和喻双带队,有旅游、规建、安监、卫生等部门负责人参加“春节”、“十·一”节前旅游市场综合检查,分别检查了古蔺太平镇红色旅游区、兰尊大酒店、黄荆景区、天仙硐景区等涉旅单位。局领导分别带队检查了江阳、龙马潭、纳溪三区和合江、古蔺、泸县三县的旅游部门和涉旅企业安全工作情况。
据统计,全年共检查7个区(县)旅游管理部门,出动检查人员700多人次,向涉旅企业发出书面整改和建议300余条,发放旅游安全和卫生健康资料11700份,确保了全市未发生一起旅游安全事故。
二、依法治理、维护旅游市场秩序
1、加强督查工作,推进依法行政。①加强对各区县旅游管理部门的行业指导、检查和监督管理工作,积极推进行政效能建设;在全行业积极开展旅游业政风行风工作;进一步健全旅游市场综合治理、质量监管、行业自律、工作联动和旅游行政执法责任制工作。②按照《旅行社条例》等相关法规的规定,完成了年度旅行社业务年检和导游年审工作。全市20家旅行社顺利通过年检;全市155名导游人员中105名通过年检,6名暂缓通过年审,44名不予通过年审。
2、加强人才培训,提升执法人员素质。组织各区(县)旅游行业管理和执法人员开展旅游法规、安全等方面的培训2期。邀请省上专家和职教院老师对我市旅行社总经理和导游人员共150人进行《旅行社条例》及实施细则和礼仪礼貌等方面的培训。
3、积极开展旅游市场整治工作。认真开展“绿盾行动vi”旅行社合同及服务网点专项治理工作和2010旅游服务质量提升年第一、二次旅游市场检查周活动,活动开展以来,全市旅游执法系统共出去执法人员1200余人次,检查旅行社20家、旅行社分社6家、旅行社门市部26家、导游人员200余人次,提出整改意见和建议200余条。通过检查,进一步规范了我市旅游市场秩序。
4、依法、公平、公正处理旅游投诉。确保所有投诉在第一时间、第一地点得到有效处理,同时,积极做好游客、咨询和维稳工作。全年受理旅游投诉5件,办结5件,结案率100%;接受旅游咨询350余人次;无一例群体性上访事件和较大以上旅游投诉发生以及无行政复议案件发生。
三、大力推进行业精神文明和标准化建设工作
一、加强领导,建章立制
为切实加强中小学校危房排查、鉴定和白蚁防治工作,我局领导高度重视,专门成立了中小学校房屋服务小组,服务小组由工程技术员和白蚁防治骨干组成,并建立了排查、鉴定和防治中小学校危房相关制度,确保中小学校危房排查、鉴定和白蚁防治工作的有序开展。
二、积极履行职能,帮助办理中小学校房屋确权工作
在行政服务中心窗口接到房屋产权办理申请资料后,在资料齐全的基础上,及时踏看,现场办理,在5个工作日内办理完备,办理费用按相关政策予以优惠。
三、认真做好中小学房屋安全鉴定工作,确保房屋安全鉴定工作的科学性、准确性和严肃性
自XX年对全市近54万平方米中小学校房屋校舍进行全面普查和危房进行鉴定以来,教育主管部门与我局积极协作,无偿为各中小学校提供危房安全鉴定工作,建立对中小学校危房鉴定快速通道,在接到校方申请后,我局立即派员到现场勘察、精心踏看,做好笔录,严格填写报告,并提出切实可行的处理意见,并督促乡镇和校方及时整改,限期拆除d级危房,指导维修加固了多处c、b级危房。从而确保师生教学的顺利进行和生命财产安全。
我局对全市各中小学校建立白蚁防治档案,在年初制定了年度工作计划,全年按计划安排做好白蚁防治工作的宣传,防治及灭治工作。发现问题及时处理,几年来共为学校化解了二十余起白蚁侵蚀的安全隐患。
四、建立档案
最近,国内一些超市把贴有“无污染”、“绿色”、“对环境友善”等字样的商品撤下货架。超市的理由是,有媒体报道,中国政府自11月30日起,实施国际ISO14020系列标准。该标准不允许在产品包装和说明书中使用“无污染”、“对环境友善”等8种术语。
环保部门近期也接到大量咨询电话。该部门发言人称,中国早已把ISO14020标准等同转化为GB/T24020系列标准,这是一个推荐性标准,而不是强制性标准。
虽然标准中明确规定:“不得使用含糊或不具体的环境声明,诸如‘对环境安全’、‘对环境友善’、‘对地球无害’、‘无污染’、‘绿色’、‘自然之友’、‘不破坏臭氧层’之类的环境声明均不得使用”,但因为是推荐标准,所以不能认为“无污染”等8种广告术语禁用。
【摘要】 目的: :研究高浓度棕榈酸对肝细胞糖皮质激素受体α亚型(GRα)表达的影响。方法: 用含有10%小牛血清的低糖DMEM培养基培养正常肝细胞株L02。1.0×105细胞接种到6孔板中,并用含有200 mmol/L棕榈酸的低糖DMEM培养基培养72 h,24 h换液1次,用实时荧光定量PCR进行定量分析GRαmRNA。结果: 高浓度棕榈酸培养72 h后,肝细胞内GRαmRNA水平是对照组(用含10%、不含脂肪酸牛血清白蛋白的低糖DMEM培养基培养72 h)的1.67倍。结论: 高浓度棕榈酸可以刺激肝细胞GRα上调表达。
【关键词】 受体 糖皮质激素 代谢综合征X 肝细胞 棕榈酸类
代谢综合征(metabolic syndrome,MS)是一组代谢紊乱性疾病的总称,各种原因引起的糖皮质激素增多症或应用糖皮质激素治疗都可能出现与MS相似的临床表现。Liu等[1]发现db/db糖尿病小鼠肝细胞糖皮质激素受体α亚单位(GRα)水平明显增加,同时发现高浓度葡萄糖上调体外培养原代肝细胞GR表达,在肥胖、MS、糖尿病等疾病状态下,肝脏GR表达水平上调,本研究通过体外肝细胞培养及实时荧光定量的方法,研究高浓度棕榈酸对肝细胞GRα表达的影响。
1 材料与方法
1.1 实验材料
RNAiso Reagent、SYBR Premix Ex Taq购自天泰生物有限公司,RevertAidTM First Strand cDNA synthesis kit购自晶美生物有限公司,油酸、棕榈酸购自Sigma公司。低温高速台式离心机、电泳仪、PCR仪、荧光定量PCR仪。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养 L02正常肝细胞株用含10%小牛血清的DMEM培养基培养,当细胞生长至80%融合时,倾去培养液,用0.25%胰蛋白酶(含0.02 % EDTANa2)消化,以1∶2传代培养,采用生长融合成单层的细胞。按1.0×105个细胞接种于6孔板中,按下述实验分组对细胞进行刺激,24 h换液1次。在下述条件刺激72 h后,1 ml/孔RNAiso Reagent 提取细胞总RNA,琼脂糖凝胶电泳鉴定所提取RNA的完整性。应用紫外分光光度法确定RNA 的浓度。细胞总RNA-80 ℃保存,用于后续实验。
1.2.2 实验分组 对照组(NG):正常浓度葡萄糖(5.56 mmol/L);牛血清白蛋白组(BSA):10%牛血清蛋白(不含脂肪酸)。高浓度游离棕榈酸组(OP):含100 mmol/L油酸及100 mmol/L棕榈酸,配制方法参见文献[2]。
1.2.3 逆转录生成cDNA 按照RevertAidTM First Strand cDNA synthesis kit试剂盒说明书对细胞总RNA(4 μg)进行逆转录反应,制备cDNA模板,用于荧光定量PCR。
1.2.4 标准曲线制定和PCR测定 根据文献报道合成引物。P1:5’- CTTACTgCTTCTCTCTTCAgTTCCT -3’, P2:5’-gCAATAgTTAAggAgATTTTCAACC-3’。荧光定量PCR测定各组糖皮质激素受体mRNA水平,反应体系:SYBG Premix Ex TaqTM 10 μl,上下引物各0.4 μl,模板1 μl,dH2O 8.2 μl;反应条件:95 ℃3 min,95 ℃ 10 s,51 ℃退火10 s,72 ℃ 10 s,50 个循环。
1.2.5 GR基因标准品的制备 用紫外分光光度计对上述回收产物进行定量,倍比稀释得到102~107七个数量级的标准品,用于制作标准曲线。纯化参照基因(ABL)标准品的制备:用紫外分光光度计对上述回收产物进行定量,倍比稀释,得到10~105五个数量级的标准品,用于制作标准曲线。
1.3 统计学分析
采用SPSS 11.0软件对实验结果进行分析,计量资料以(x±s)表示,多组资料比较采用方差分析,两两比较采用最小显著差异法。P
2 结果
2.1 提取总RNA及初步鉴定
通过琼脂糖凝胶电泳法对人肝细胞总RNA进行鉴定,电泳图3条带完整(见图1),分别为28 s、18 s、5 s。
2.2 RTPCR扩增GR基因
以逆转录cDNA为模板、P1和P2为引物进行PCR扩增,扩增产物经1.0% 琼脂糖凝胶电泳后显示出一条大小约为200 bp的DNA条带,与预计目的基因片段大小相符。以纯化参照基因ABL为模板,相应上下引物进行PCR扩增,扩增产物经1.0% 琼脂糖凝胶电泳后显示出一条大小约为100 bp的DNA条带,与预计目的基因片段大小相符。见图2。
2.3 荧光定量PCR检测结果
GR表达水平以GR与ABL浓度的比值(GR/ABL)表示。对照组与牛血清白蛋白组之间的差异并不明显(GR/ABL分别为31.8和49.4),两者之间GR的表达水平差异无统计学意义(P=0.159)。高浓度游离棕榈酸组GR受体表达水平(GR/ABL为82.7)明显高于对照组及牛血清白蛋白组,差异具有统计学意义(P<0.05),图3。
2.4 标准曲线
以102~107拷贝的纯化GR基因作为标准制备标准曲线,每个标准两个复管,结果显示重复性较好;对该标准曲线(图4)进行分析,显示其扩增效率良好(1.885)。以101~105拷贝的ABL作为标准作标准曲线,每个标准两个复管,结果显示重复性较好;对该标准曲线(图4)进行分析,显示其扩增效率良好(1.910)。
2.5 扩增产物特异性
对标准及样品的扩增产物进行95 ℃~37 ℃(以每0.2 ℃/s的速率降温)溶解曲线分析,发现标准及样品的溶解曲线均为单峰,且峰值单一,说A.对照组,B.牛血清白蛋白组,levels in 3 different groups明反应特异性较好(图5);对标准及样品的溶解温度进行分析,显示GR标准Tm值为83.01,样品Tm值与其接近,说明样品与标准扩增产物一致;对标准及样品的溶解温度进行分析,显示参照基因ABL标准Tm值为82.84,样品Tm值与其接近,说明样品与标准扩增产物一致;GR基因与参照基因ABL扩增产物经1 %琼脂糖凝胶电泳,显示其长度分别为预期的200 bp和100 bp,无引物二聚体出现。3 讨论
人类GR属于核激素受体超家族成员,是一种配体依赖的转录活化因子。人类GR可分为α和β两种亚型,两者是GR基因同一转录产物通过不同的剪切方式剪切的结果,GRα表达水平受自身调控和外源性调控。GR α与糖皮质激素结合后可通过自身调控机制在mRNA和蛋白质水平下调节自身表达[3];GRβ通过与α亚型形成六聚体参与GRα的表达调控[4,5]。肥胖及代谢综合征糖皮质激素生物效应紊乱与糖耐量异常和胰岛素抵抗相关[6,7],而且是发生2型糖尿病的危险因素[8]。肝脏特异性GR基因敲除小鼠以及肝脏GRα拮抗剂的应用均表现为糖异生异常[9,10]。此外,Herzig等[11]研究发现肝脏特异性缺失GRα可解除其对Hes1基因表达的抑制作用而改善肝脂肪变性的情况,减少甘油三酯在肝脏异常潴积。由此可见,GR在调节肝脏糖及脂肪代谢方面具有重要的作用,维持其正常表达水平有可能对改善肥胖、MS、糖尿病等代谢性疾病的糖脂代谢异常具有重要意义。
目前,关于在肥胖、MS、糖尿病等代谢性疾病中GRα表达水平的研究并不多,研究结果尚存在争议。对于肥胖、MS、糖尿病等代谢性疾病中有高浓度游离脂肪酸已经达成共识,游离脂肪酸是否对GRα表达水平有影响尚不清楚。本研究通过高浓度游离棕榈酸刺激体外培养的正常肝细胞株L02,结果显示其GRα mRNA水平升高。研究发现,2型糖尿病动物模型db/db小鼠肝脏GRα在mRNA及蛋白质水平均明显高于db/+对照小鼠,并认为这与该动物模型的2型糖尿病表型相关[12];并发现在体外,高浓度葡萄糖可刺激肝细胞GRα表达水平升高,还证实抑制肝脏GR表达有利于改善饮食引起的肥胖及胰岛素抵抗[12],Zucker(fa/fa)大鼠肝脏GRα mRNA水平也明显升高[13]。然而,Brake等[14]研究显示高脂饮食3周及20周对大鼠肝脏GRα表达水平没有影响。
本研究结果显示高浓度棕榈酸刺激体外培养的正常肝细胞株GR mRNA水平升高,但高脂饮食或高游离脂肪酸血症对肝脏GRα表达的影响需要进一步深入的研究。
参考文献
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认真学习党的xx大会议精神和“三个代表”重要思想,牢固树立科学发展、和谐发展和安全发展的观念,始终坚持以人为本、“安全第一,预防为主”的方针,紧紧围绕创建“安全文明校园”的目标,全面贯彻落实安全工作法律法规,深入开展道路交通安全、食品卫生安全、学生假期安全、教育教学安全、消防安全等专项整治活动,进一步强化安全工作责任追究制,大力拓展安全知识宣传教育面,建立健全安全管理长效机制,为全体师生创设良好的校园安全环境,努力保障学校教育事业的可持续健康发展。
二、工作目标
坚决杜绝重特大伤亡事故,尽力控制一般事故,确保在校学生安全,力争实现“零死亡”、“零事故”、“零犯罪”目标,争创安全综合治理先进单位。
三、主要工作
(一)大力加强安全法制教育,进一步增强广大师生的安全防护意识。充分发挥法制副校长、法制辅导员和课任教师的作用,广泛开展安全法制教育,帮助学生牢固树立安全法制意识,把学法、知法、守法、用法化作学生的自觉行动。大队部要根据学生的年龄特点、认知能力和行为能力,有计划、有重点地开展主题鲜明、内容丰富、形式多样的安全常识教育。帮助学生初步树立安全观念,了解安全基本常识,熟悉报警、求助电话的使用,具备对危险的初步判断能力,掌握躲避危险和自救的简易方法。
在搞好宣传教育的基础上,还要结合教学实际,充分利用各种机会和条件,如劳技课、社会实践活动等,积极开展形式多样的安全技能的学习和训练,训练中要突出紧急情况下撤离、疏散、逃生和防暴、抗暴等综合演练。演练每学期不少于一次。突出消防专业训练,强化专业技能,年内训练2次,时间6天。每个班级专门配备一本安全教育备课簿,各班开展的安全教育活动,应在备课簿上得到充分显示,并作为教师完成年度任务和接受上级安全工作检查考评的重要依据
为防止学生在暑期发生溺水死亡事故,学校在放假前集中开展安全常识教育外,开展家访活动,宣传预防溺水常识,提醒家长监管好自己的子女,防止他们私自下河玩水造成溺水死亡。
(二)大力加强安全工作组织制度建设,努力把校园安全及综治工作纳入正规化轨道。
1、加强工作责任制度。层层签订安全工作责任书,进一步明确和强化安全工作职责。建立一支专职或兼职的学校安全及综治工作队伍,动员和组织师生积极参与,群防群治,共同做好学校安全和综治工作。
2、落实定期检查制度。要严格按照“及时排查、各负其责、工作在前、预防为主”的十六字方针,把检查作为做好安全工作的一个重要方面,校每周和重大节假日前必查的基础上,点、重点查、查反复、反复查,横向到边,纵向到底,不疏不漏,不留死角。