绿色环保的生物学功能评估范文

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统计学处理

应用SPSS11.0统计分析软件进行处理。各组实验数据以百分数表示，各因子蛋白之间的比较采用两样本t检验，P<0.01表示差异具有统计学意义。

结果

1胸水细胞HE染色形态学观察

胸水细胞经HE染色行形态学观察。经高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸水细胞核浆固定充分，未见非特异性杂质；经常规95%乙醇固定的胸水细胞胞浆较少，甚至萎缩消失，细胞核有碎裂现象。结果见图1。

2Westernblotting

经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸腹腔积液组织细胞CK、CEA和P53的蛋白表达结果见图2。定量测试其灰度值水平分别是91%、86%和88%，由常规固定液保存的细胞CK、CEA和P53的蛋白表达水平分别是46%、38%和31%，两种保存方法相比具有显著性差异（P<0.05）。

讨论

若胸腹腔积液标本不能立即送检，需加少许防腐剂，以防止细胞自溶。某些胸腹腔积液内含有大量纤维蛋白、粘液蛋白、纤维素、组织凝血活酶等各种凝血因子，极易形成凝块，严重影响检验结果的准确性。因此，对这些病例进行胸腹腔积液穿刺抽液时，应预先在标本器皿内加1/10量的3.8%枸橼酸钠或0.1ml肝素，以防止其发生凝固，但加入抗凝剂后对细胞形态有一定影响。为了改善组织细胞保存液的性能，克服其缺点，我们创新性应用独特技术工艺，开发研制了新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料。此材料将乙醇：冰醋酸：丙酮：链激酶按3∶1∶1∶0.5比例配制，胸腹腔积液经处理后，组织细胞成分按比重沉积于底层，纤维蛋白、粘液蛋白、纤维素及红细胞等杂质经洗脱液洗脱掉。我们进一步应用荧光定量PCR和Westernblotting技术，从mRNA和蛋白水平检测此组织细胞保存材料的生物学性能。

研究结果显示，与常规保存液相比，新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料较好的固定保存了胸腹腔积液组织细胞的抗原性，其CK、CEA和P53的表达水平明显高于经常规保存液处理组。目前广泛应用的薄层液基细胞技术在制作胸腹腔积液细胞涂片时，总体采样量增加、读片面积缩小、背景清晰，利于降低漏诊率和误诊率，提高了与组织学诊断的符合率。但是，由于方法原理限制，这类技术无法对送检标本的细胞进行全面处理，导致被检标本信息失，是其最大不足。我们前期的研究表明，收集胸腹腔积液时加入高性能、绿色环保组织细胞保存材料，可避免细胞自溶，最大限度去除纤维蛋白、粘液、红细胞和各种杂质；经离心、沉淀、制片，可获得高质量的细胞涂片。

传统制片经巴氏染色显示细胞分布均匀，形态完整；免疫组化检测显示涂片背景清晰，抗原染色特异。剩余组织细胞还可用于其他分子生物学指标检测。经高性能、绿色环保组织细胞保存材料处理的胸腹腔积液细胞，性能优越，对于保证后期制片质量、较好保存组织细胞抗原性、提高诊断效率至关重要。

作者：李笑万里燕耿舰白晓燕单位：南方医科大学南方医院急诊科病理科广东省肾脏病研究所