高效液相色谱仪的发展和药物中的应用范文

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摘要：色谱分析是当前临床主要的分离分析技术，它在药物的研制、生产以及药品检验部门等相关领域中均有所涉及，并具有不可或缺的作用。高效液相色谱法是20世纪60年代所研发出来的一类集高分离效率、快分析速度以及自动化操作的色谱分析法。高效液相色谱仪操作简单，运用此仪器可以对药物进行准确的分析，使检测结果更为精准，提升检测准确率。本篇论文对高效液相色谱法在药物分析中的常规方法以及在药物分析中的发展情况进行总结。

关键词：高效液相色谱仪；药物分析；应用

1高效液相色谱法的分类

1.1吸附色谱法

在高效液相色谱法中，吸附色谱法是一种较为常见的检测方法，它主要是以吸附剂作为固定相进行的相关测试，其中硅胶是运用最多的吸附色谱固定相，流动相则通常会选择一种或者多种有机溶剂的混合溶剂。不同的组分因与不同的固定相吸附力在吸附色谱中会被分离，在组分极性越大时，固定相吸附力也将越强，它所保留的时间也将更长。流动相的极性若越大，则具有更强的洗脱力，同时，组分的保留时间将会越短。

1.2离子交换色谱法

离子交换色谱法是一类以离子交换剂为固定相的色谱法，离子交换剂与组分会因不同的亲和力而得以分离。在柱填料中含有极性可离子化的基团，如季铵离子、羧酸以及磺酸等，这些在适宜的pH值下会得到解离，并且吸引相反电荷的物质。因为离子型物质可以与柱填料产生相关的关系，从而能够分离。在样品中，各类组分会由于离子交换平衡常数的差异而分离，离子交换色谱的流动相通常为一定pH值的缓冲溶液，在有些时候也会加入少量的有机溶剂（如乙腈、乙醇、四氢呋喃等），从而使组分在流动相中的溶解度增加。流动相的pH值对于离子交换剂的交换容量有一定的影响。流动相的pH值对于弱碱性或者弱酸性的被分离组分来说还会影响其电离情况，流动相的pH值应保持待分离组处于离解状态，如此方能被分离。在测定条件下，离子交换色谱法会呈现出离解状态的组分，反相离子对色谱法在药物分析中的运用也相当广泛，它可运用于磺胺类药物、生物碱、维生素以及抗生素等药物分析。

1.3液-液分配色谱法

在液-液分配色谱法中，其流动相与固定相属于不相溶的两类溶剂，在其分离时，组分会分别溶入两相，对于组织的不同，其分配系数也会有所不同，从而分离。就当前来看，运用得最为广泛的化学键和固定相主要是将固定液的官能团健合于载体上所制成的，运用化学键全固定相的色谱法能够运用分配色谱的原理进行解释。键合相色谱法在高效液相色谱中有着举足轻重的地位，同时也是运用得较为广泛的色谱法。依照流动相与固定相极性的差异可以分为反相色谱法与正相色谱法两类。反相色谱法指的是流动相极性比固定相极性大的分配色谱法，反相色谱法往往运用非极性固定相，十八烷基硅烷键合硅胶是一种较常用的非极性固定相，此外，辛烷基硅烷键合硅胶也运用得相当多。流动相则采用甲醇、水、四氢呋喃或乙腈等混合溶剂。极性较大的组分在反相色谱中会由于分配系数较小选而先从色谱柱流出，极性较小的组分将随后流出。有机溶剂在流动相中的比例上升时，流动相极性会有所降低，洗脱力则会得到增强。反相色谱法在整个高效液相色谱法中运用得较广泛。正相色谱法指的是流动相极性小于固定相极性的分配色谱法，正相色谱法中较常见的固定相为氨基键合硅胶、氰基键合硅胶等极性的化学键合固定相，正相色谱的流动相通常属于极性较小的有机溶剂。极性小的组分在正相色谱中会因为分配系数值较低而选择于极性大的组分流出。通常情况下，正相色谱法被运用在溶于有机溶剂的中等极性或极性分子型物质的分离。

2高效液相色谱法在药物分析中的运用

2.1运用于药物鉴别中

在高效液相色谱法中，组分与保留时间的性质以及结构有一定的关联，它属于一类定性参数，可以用来鉴别药物。比如，我国药典收载的药物头孢羟氨苄的鉴别中有这样的规定：在含量测量项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间必须与对照品主峰的保留时间相同。头孢噻酚钠、头孢拉定等头孢类药物、曲安奈德注射液以及地西泮注射液等多种药物都可以运用高效液相色谱法进行鉴别。有研究学者[1]运用高效液相色谱法指纹图谱法来鉴别树胶与蜂胶，还有一些研究学者[2]运用高效液相色谱法来测定一类新型抗肿瘤药temxolo-mide（替莫唑胺），并为新药申报提供有效的数据。这些运用对于药物的开发与鉴别提供了良好的手段与思路。

2.2运用于蒽醌类化合物的分析中

蒽醌类活性成分在中药中主要存在于何首乌中，它的具体成分为蒽醌类以及相关衍生物，有相关科学家[3]对各产地的何首乌进行过质量的研究，并且通过高效液相色谱的方式来测定何首乌游离型以及结合蒽醌类成分的含量情况，在对其展开严格测定后显示出，何首乌蒽醌类中大黄素甲醚、大黄素与其中含有的芦荟大黄素、大黄酸以及大黄酚相比，其含量更高。同时，根据炮制方法与产地的不同，结合型与游离型的蒽醌类含量比例也会产生相应的变化。随着科学技术的不断发展，各类检测技术的不断提升，一些研究学者[4]已经掌握了采用非水反相液相色谱法对活性蒽醌类成分加以测定的方式，运用此类方法可以更好地完善并简化技术的使用步骤，为此，高效液相色谱仪检测器在检测分析药物时可以缩短时间，让操作更便捷，这在蒽醌类成分的测定中有良好的帮助作用。

2.3运用于黄酮类化合物的分析中

黄酮类化合物的数量相当大，黄酮类化合物在植物体内通常与糖类成分相结合，然而，它存在的形式最终会变为以苷元形式，在葛属植物质量的评定过程中，一般会以异黄酮成分当作具体的参考依照来进行。相关研究学者[5]为了测定多种葛属植物中的异黄酮成分含量，选择了其中七类葛属植物，检测方式则以反相高效液相色谱法为主。并得出葛属植物中异黄酮成分含量有较大的差异性，它对于葛根质量的评价提供了相关的依据。

2.4运用于有机酸类物质分析中

高效液相色谱仪检测器被广泛运用于临床药物的检测中，通过高效液相色谱仪能够使相关研究工作人员更好地测定药物中的各类有机酸含量。有机酸类物质有着较大的生理活性，半数以上的都是从一些药性植物所提取而出的，再将其与治疗的药物相结合。有些药物中含桂皮酸，此类物质属于有机酸类，它在冠心苏合胶囊以及冠心苏合丸中均有一定量的成分，这也是研究工作人员运用高效液相色谱仪检测而出的。为将此类成分测出，研究人员[6]在对其加以研究时会运用100%的甲醇当作提取溶剂加以研究，同时还会加入适量的冰醋酸来分离被测物质。从结果来看，高效液相色谱法实施研究工作可以保证冠心苏合胶囊以及冠心苏合丸中的桂皮酸的高回收率，这对于研究工作的开展起到了一定的推动作用[7]。

3高效液相色谱法在药物分析中的发展

3.1联用技术

在色谱技术发展的过程中，计算机各类软件得到了相应的开发，这使得高效液相色谱与各类检测仪器有了一定的联用，使得高效液相色谱的运用范围得到了有效拓展。比如，高效液相色谱与HPLC-MS（质谱）联用技术是一类以高效液相色谱为分离手段，并且质谱为鉴定工具的分离分析技术，它有着极高的专属性，在药物检测中具备着极高的灵敏度，加快定量测量的速度，并对混合物存在的各类微量组分加以分析，高效液相色谱与HPLC-MS（质谱）联用技术在国外已经成为低浓度生物药品代谢物与药物的主要测定方法。HPLC-CL（高效液相色谱联用化学发光）技术是一类分析超痕量与痕量的技术，它可以分析含量相对较低、复杂的混合物组分。ELSD（蒸发光散射检测器）对于一切不挥发溶质均有检测效果，具有较高的灵敏度，其检出限为10ng，不会受温度以及溶剂成分的影响，也可以在梯度洗脱中使用。ELSD与高效液相色谱的联用情况十分常见。

3.2微柱高效液相色谱法

高效液相色谱法尽管有着一系列的优点，同时还有些不足之处，比如流动相的消耗较大，所使用的溶剂通常含有毒性物质或者价格偏高等。尤其对那些复杂样品进行分析时，单相分离分析法通常不能得到很好的完成。而微柱高效液相色谱法的填充粒度较小，同时也十分密集，它与理论塔板数的增多有着相同的效用，以此来提升色谱柱的整体柱效。运用内径低的柱子能够控制纵向扩散情况，降低峰展宽效应，最终缩短了整体的分析时间，同时也提升了检测灵敏度。运用微柱并且还可对极少量样品加以分析，这样减少了流动相的使用量，并且在环境保护与溶剂节约上有一定的帮助。

4结语

高效液相色谱法是当前临床药物分析运用得最为广泛、最快捷、高效的检测方法，它有着极强的专属性以及较高的灵敏度，不仅可以分离药物，同时还可运用于定性定量分型中，适用范围较大[8]，为此，它在药物成分的测定与分离方面可以发挥其基本优势。此外，随着专家系统的运用以及计算机软件的开发，高效液相色谱法将会逐渐成为质量规范化以及国际化的主要途径。

参考文献

[1]王小平,林励,白吉庆.HPLC指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶[J].陕西农业科学,2009,55(3):133-135.

[2]五维剑,张军仁,庞华.替莫唑胺含量测定方法的研究[J].药物分析杂志,2003,23(5):344.

[3]黄洁琼.高效液相色谱仪与联用技术在药物分析及药物质量控制中的应用[J].科技视界,2015(24):308.

[4]廖林淇.高效液相色谱仪检测器在药物分析中的应用[J].科技创新导报,2015,12(6):236.

[5]于嘉,付凌霄,刘松杭.高效液相色谱仪在兰索拉唑制剂质量分析中的应用及其发展[J].宁波化工,2015(1):7-11.

[6]宋冬梅.基于高效液相色谱及液质联用的化学药品有关物质研究[D].上海:复旦大学,2012.

[7]贾亮平.高效液相色谱酸性化学发光体系检测药物的研究[D].延安:延安大学,2010.

[8]杨杰.高效液相色谱仪检测器进展及其在药物分析中的应用[J].实用药物与临床,2007(3):187-188.

作者:章庆 单位:江苏省淮安市公安局刑事科学研究所