复方芪麝片提取工艺范文

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【摘要】目的确定复方芪麝片中青风藤、防己药味提取工艺。方法采用正交实验法以粉防己碱和青藤碱含量为指标，考察乙醇浓度、乙醇量、提取时间、提取次数4个因素对青风藤等药味提取工艺的影响。结果药材以70%的乙醇为提取液，加醇量为药材的14倍，提取3次，2h/次。结论该优化工艺可行。

【关键词】复方芪麝片；正交实验；提取工艺；粉防己碱和青藤碱

复方芪麝片为主治气虚血瘀兼痰湿阻络型颈椎病的中药复方制剂,由黄芪、麝香、青风藤、川芎等中药组成,具有益气活血、化痰通络、消肿止痛的作用，临床效果较好。方中青风藤为臣药，防己为佐药，其主要有效成分均为生物碱，即粉防己碱和青藤碱。现代药理研究证实青藤碱具有抗炎、免疫抑制、镇痛、降压、抗心律失常等药理作用［1,2］。易丹丹等［3］研究发现青藤碱凝胶对大鼠佐剂性关节炎具有治疗作用,且效果良好。粉防己碱具有广谱抗炎作用,对局部和全身的多种急、慢性炎症、免疫性炎症、烟雾吸入性肺损伤、四氯化碳性肝损伤均有显著的抑制作用，其抗炎作用是多方面的,对炎症的各个环节均有不同程度的抑制作用［4,5］。此外粉防己碱还具有抗心肌缺血、抗肿瘤等作用［6,7］。根据方中两药味有效成分理化性质的特征，本研究选择乙醇作为提取溶剂，拟通过正交实验对醇提工艺中乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数这4个因素进行考察，以粉防己碱和青藤碱含量为指标成分筛选工艺条件。

1材料与仪器

防己购自上海养和堂药材有限公司，经上海中医药大学生药教研室鉴定为防己科植物粉防己StephaniatetrandraS.Moore的干燥根。

青风藤购自上海养和堂药材有限公司，经上海中医药大学生药教研室鉴定为防己科植物青藤Sinomeniumacutum(Thunb.)Rehd.etWils.及毛青藤S.acutum(Thunb.)Rehd.etWils.var.CinerumRehd.etWils.的干燥藤茎。

粉防己碱、青藤碱对照品：含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供。Agilent1100色谱工作站。

2方法与结果

2.1因素水平表根据文献资料和预实验结果，采用正交实验法以乙醇浓度（A）、乙醇用量（B）、提取时间（C）、提取次数（D）为考察因素，各取3水平，具体因素水平见表1。表1提取工艺优选水平（略）

2.2醇提实验根据表1，选用L9正交表，按各实验号进行实验。每次实验按处方量称取青风藤120g，防己90g，加热回流，提取液进行浓缩，称重，计算得膏率，分别称取各组浸膏适量，甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中，得9组供试品，分别测定青藤碱和粉防己碱的含量，测定青藤碱的HPLC条件：十八烷基硅烷为填充剂；甲醇乙腈水二乙胺（18∶14∶58∶0.1）为流动相；检测波长为265nm。测定粉防己碱含量的HPLC条件：十八烷基硅烷为填充剂；甲醇乙腈水二乙胺（70∶10∶20∶0.1）为流动相；检测波长为283nm。

2.3正交实验及方差分析见表2～3。表2正交实验设计（略）表3方差分析（略）

X：青风藤为方中臣药，防己为佐药，所以经过加权后，X=青风藤×60%+防己×40%。X1，X2分别表示两次重复实验所得数据经加权后的数值。

F0.05(2,17)=3.59,F0.01(2,17)=6.11,由方差分析表可知，4因素均有显著性差异，根据实验结果,因素D应取D3，即提取3次。因素B应取B3，即加10倍量醇。因素A应取A2,即70%醇提。因素C应取C2，即提取时间为2h。

2.4乙醇用量的单因素考察在其他因素确定的前提下，以粉防己碱和青藤碱含量为指标成分考察乙醇用量为14倍，18倍时工艺提取情况。结果见表4。表4乙醇用量的单因素考察（略）

乙醇用量为14倍时，提取的指标成分含量高，因此确定乙醇用量为14倍。

2.5工艺验证取同样药材，按上述优选工艺进行操作，粉防己碱含量为0.34%。青藤碱含量为0.58%（与药材比）。

3讨论

根据正交实验，确定防己和青风藤最佳提取工艺为以70%醇浓度的乙醇为提取液，加醇量为药材的16倍，提取3次，2h/次。

防己、青风藤提取工艺中所依据的指标，采用的是将粉防己碱和青藤碱含量进行加权后的数值。加权系数应根据两味药物在方中所起的作用进行慎重选择，本实验确定臣药青风藤的加权系数为0.6，佐药防己的加权系数为0.4。

正交实验中，因素B和D均具有显著性差异，根据极差分析，所取水平均为设定的最高水平，因此应考察加醇量在10倍以上，提取次数在3次以上时的情况。结合大生产的实际情况和两因素的交互作用，确定提取次数为3次，在此基础上，对乙醇用量进行单因素考察，实验结果表明，当乙醇用量为药材量的14倍时，成分含量较高，提取较完全。新晨：

【参考文献】

1］王勇,方勇飞,周新,等.青藤碱对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞表达细胞因子的影响［J］.中华风湿病学杂志,2003,7(7):415.

［2］陈光星,刘良,赵诗哲,等.青藤碱对胶原诱导型关节炎大鼠滑膜细胞增殖及凋亡影响的研究［J］.中华风湿病学杂志,2005,9(5):284.

［3］易丹丹,蔡鸿生,罗顺德，等.青藤碱凝胶对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用［J］.中国医院药学杂志，2002，22（8）：465.

［4］张乐之，何华美，李新芳，等.粉防己碱的抗炎作用与炎症白细胞cAMP的关系［J］.中国药理学通报，2003，19(7):791.

［5］张乐之,何华美,李新芳，等.粉防己碱抗炎作用的研究进展［J］.解放军药学学报，2002，18（3）：172.

［6］王丽敏，吕宏彦，李庆勇，等.粉防己碱的抗肿瘤药理研究新进展［J］.时珍国医国药，2008，19（10）：2558.

［7］常超,王裕勤,杨刚,等.粉防己碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制［J］.中国临床康复，2006，10（43）：88.