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白芍配伍桂枝作用体制浅论范文

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白芍配伍桂枝作用体制浅论

白芍为毛茛科植物芍药的干燥根,具有养血敛阴等功效[1]。张仲景《伤寒论》中提及,白芍与桂枝配伍可以调和营卫,缓中和里[2]。近几年,多于白芍的抗炎作用研究比较多,但仍有很多问题不清楚[3]。本实验通过角叉菜胶造模大鼠胸膜炎模型,检测白芍与桂枝配伍的抗炎作用,并探讨其作用机制。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物100只昆明系小鼠,雌雄各半,体质量(30±5)g,动物由锦州医学院实验动物中心提供,动物许可证号:SCXK(辽)2003~0007。

1.1.2药物及配制方法白芍、桂枝均购自广州致信中药饮片有限公司;弹性蛋白酶底物、磷酸二酯酶抑制剂、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、角叉菜胶,均购自Sigma公司;丙二醛(MDA)测定试剂盒,购自南京建成生物工程研究所。白芍与桂枝饮片,加适量蒸馏水煎煮至沸腾,倒出煎液,放冷后,缓缓加入95%乙醇,4℃下放置24h,取上清液。赛多利斯电子分析天平、BIO-RAD550型酶标仪、紫外分光光度计、日立SCR20BA高速冷冻离心机。

1.2方法

1.2.1角叉菜胶大鼠胸膜炎造模及抗炎实验方法100只SD大鼠,雌雄各半,随机分为5组:对照组(生理盐水)、角叉菜胶组(1%角叉菜胶,0.05mL)、白芍组(白芍,100mg/kg)、桂枝组(桂枝,100mg/kg)、配伍组(白芍与桂枝1:1,100mg/kg)。各组给药30min后,分别注入0.05mL角叉菜胶。造模5h后,眼球采血检测。

1.2.2血浆丙二醛(MDA)含量的检测按照试剂盒说明书进行具体操作,于532nm波长,检测其吸光度。

1.2.3血浆弹性蛋白酶含量检测血浆弹性蛋白酶的检测方法,参考文献进行[4]。弹性蛋白酶标准品用PBS稀释(μg/mL),做出标准曲线,计算小鼠血浆弹性蛋白酶含量。

1.2.4中性粒细胞环磷酸腺苷-磷酸二酯酶(CAMP-PDE)活性检测中性粒细胞Camp-PDE活性影响的检测方法,参考张冰等的方法[5]。

2结果

2.1各组小鼠丙二醛(MDA)含量的变化与对照组相比,角叉菜胶组丙二醛含量明显升高(P<0.05)。与角叉菜胶组相比,白芍组和桂枝组,抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高(P<0.05);白芍桂枝配伍组,明显抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高(P<0.01)。见表1和图1。

2.2各组小鼠弹性蛋白酶含量的变化与对照组相比,角叉菜胶组弹性蛋白酶含量明显升高(P<0.05)。与角叉菜胶组相比,白芍组和桂枝组,抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高(P<0.05);白芍桂枝配伍组,明显抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高(P<0.01)。结果见图2。

2.3各组对中性粒细胞CAMP-PDE活性的影响

3讨论

发生炎症时,活化的白细胞促使活性氧自由基的生成,诱发组织细胞的脂质过氧化。丙二醛作为脂质过氧化过程中的主要产物,丙二醛增多,可以造成细胞毒性,使细胞功能受损。而且,丙二醛含量,通过作为机体内脂质过氧化程度的反应指标,间接反应细胞损伤的程度。本研究结果表明(见图1),致炎因子(角叉菜胶)可以使机体产生过量的氧自由基。白芍抑制模型小鼠血浆MDA含量的升高,表明白芍的抗炎作用与此有关。桂枝也抑制模型小鼠血浆MDA含量的升高,表明桂枝的抗炎作用也与此有关。而且,白芍与桂枝(1:1)配伍,明显抑制丙二醛含量的升高,可能抑制炎症细胞CAMP-PDE活性,从而抑制炎症细胞功能。弹性蛋白酶能够较为准确地反映该组织脏器损伤的严重程度[6]。本研究中结果表明(见图2),白芍与桂枝配伍,与抑制中性粒细胞弹性蛋白酶的释放有关。现代药理学证实,桂枝能够扩张血管,改善血液循环。白芍的主要活性成分为芍药苷,能够增强心肌对缺血缺氧的耐受力作用。白芍与桂枝配伍,寒温结合,具有启发心阳,以及益阴止汗的功效。本研究结果表明,白芍和桂枝配伍后,抗炎作用显著增强,两者具有协同作用。