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1仪器和材料
1.1仪器
NikonYS100生物显微镜(日本尼康公司),WD??9403C型紫外分析仪(北京六一仪器厂),HK3300H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司),UV??1800型紫外分光光度计(北京瑞利分析仪器公司),硅胶G(青岛海洋化工有限公司),绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所),其余试剂均为分析纯。
1.2材料
少花龙葵采自广州市番禺区广州大学城,经广东药学院中药学院姬生国副教授鉴定为茄科植物少花龙葵SolallumnigrumL.verPauciflorumLiou。
药材全株高约30~100cm,干燥品多破碎。根呈圆锥形,木化,长5~30cm,直径0.5~3cm,有多数须根痕,表面棕黄色,质脆易折断,折断面不平坦;茎长圆柱形,光滑,多分支,近地面部分黄褐色,上部灰绿色,质脆易折断;叶多皱缩,易碎,互生,展开后呈卵形至椭圆形,长4~8cm,先端渐尖,基部楔形,叶近全缘或有不规则角状粗齿,上面深绿色,有小点,下面淡绿色,叶脉于叶背隆起,叶柄细弱,长约1cm,两面具疏柔毛;花两性,花序柄腋生,长1~2.5cm,2~5朵排列成伞形花序,黄白色,花萼5裂,裂片三角形;浆果球形肉质,直径约5cm,绿色或紫黑色,皱缩,花萼宿存;种子细小,黄褐色,单果含种子50粒以上。气微,味苦甘。
3显微鉴别
3.1茎横切面
表皮层数列细胞排列紧密,最外层细胞壁角质化增厚,可见非腺毛,偶见腺毛。非腺毛由1~4个细胞组成,腺毛多由4个腺头细胞和1~2个腺柄细胞组成。表皮细胞内侧有数层厚角细胞,皮层薄壁细胞类圆形。韧皮部细胞小排列紧密。中柱鞘纤维单个散在或数个聚集成束,形成层环明显。木质部较宽,木纤维细胞排列较整齐,壁厚,直径3.5~8μm,导管圆形或类圆形,单个或2~3个连在一起,直径10.1~24.2μm。髓部宽广,细胞圆形、椭圆形,草酸钙砂晶和方晶、簇晶散在。见图1、图2。
1.非腺毛;2.腺毛;3.表皮层;4.皮层;5.中柱鞘纤维束;6.韧皮部;7.形成层;8.木质部;9.草酸钙结晶;10.髓
图1少花龙葵茎横切面详图(略)
Figure1MicrographofthetransversesectionofCacumenofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou3.2叶横切面
上下表皮均由一层细胞组成,类方形、长方形,排列紧密,外层角质增厚,非腺毛由1~4个细胞组成,腺毛腺头1~2个细胞、腺柄1~4个细胞,主脉上下表皮内侧均有厚角组织。上表皮下有栅栏细胞一列,海绵组织细胞排列疏松。维管束为外韧形,半月形。韧皮部窄,细胞较小。薄壁细胞中可见有草酸钙簇晶、方晶和针晶,簇晶直径19.6~69.5μm。见图3、图4。
1.表皮层细胞壁角质化增厚;2.皮层;3.韧皮部;4.形成层;5.中柱鞘纤维束;6.木质部;7.髓部;8.草酸钙结晶
图2少花龙葵茎横切面简图(略)
Figure2MicrographofthetransversesectionofCacumenofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
1.腺毛;2.非腺毛;3.上表皮;4.栅栏组织;5.海面组织;6.下表皮;7.叶脉维管束;8.草酸钙方晶;9.厚角组织
图3少花龙葵叶横切面详图(略)
Figure3MicrographofthetransversesectionofFoliumofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
1.毛茸;2.上表皮;3.栅栏组织;4.海面组织;5.下表皮;6.叶脉维管束;7.草酸钙结晶;8.厚角组织
图4少花龙葵叶横切面简图(略)
Figure4MicrographofthetransversesectionofFoliumofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
3.3粉末
粉末黄绿色。表皮细胞垂周壁弯曲,气孔不定式或直轴式。花粉粒黄色,直径11.1~24.1μm,外壁表面有细密短刺及圆形细颗粒状雕纹,具3个萌发孔。草酸钙针晶较多,长约5.8~16.1μm。腺毛腺头由1~4个细胞组成,内含深黄色分泌物,腺柄1~2个细胞,长35.2~107.5μm。非腺毛由1~4个细胞组成,常弯曲,长108.5~218.7μm,壁上有疣状突起。草酸钙簇晶棱角较尖,直径19.6~69.5μm;方晶较多,直径4.6~8.5μm;砂晶较少。淀粉粒类圆形,椭圆形,单粒或复粒。尚可见色素块,具缘纹孔导管直径61.6~110.1μm。纤维长110.2~327.1μm,平直,多碎断,细胞壁增厚明显。石细胞类圆形单个散在或数个成群,孔沟明显。薄壁细胞呈类圆形或者椭圆形,壁厚,常成群存在。厚角细胞类长方形、多角形,螺纹导管多见。见图5。
1.石细胞;2.具缘纹孔导管;3.草酸钙针晶;4.厚角细胞;5.草酸钙方晶;6.非腺毛;7.腺毛;8.下表皮细胞及气孔;9.纤维;10.草酸钙砂晶;11.草酸钙簇晶;12.淀粉粒;13.螺纹导管;14.上表皮细胞及气孔
图5少花龙葵粉末图(略)
Figure5MicrographofthetransversesectionofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
4理化鉴别
4.1显色沉淀试验
4.1.1生物碱类成分鉴别取本品粗粉1g,加入体积分数70%乙醇溶液20mL,回流提取30min,滤过,滤液蒸干,残渣加HCl溶液(1→100)5mL使溶解,滤过,滤液分置3支试管中,第1管加碘化铋钾试液1~2滴,有橘红色沉淀产生;第2管加入碘化汞钾试液1~2滴,有浅黄色沉淀产生;第3管加入硅钨酸试液,有灰白色沉淀产生。
4.1.2皂苷类成分鉴别取本品粗粉2g,加水200mL,煮沸15min后,滤过,滤液2mL,置具塞试管中,塞紧,用力振摇1min,产生持久性泡沫,15min不消失。
4.1.3黄酮类成分鉴别取本品粗粉0.5g,加入体积分数60%乙醇10mL超声提取30min,滤过,取滤液2份各1mL,分置2支试管中,第1支试管中,加少量的镁粉,再加HCl溶液1mL,溶液显红色;第2支试管中,加入浓氨水1~2滴,溶液呈亮黄色;另取滤液滴于滤纸上,然后滴加AlCl3溶液,置紫外灯(365nm)下观察,液面交界处呈现黄绿色荧光。
4.2薄层层析鉴别
取本品粗粉1g,加入甲醇10mL,超声提取30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取对照药材1g,同法制成对照药材溶液。取绿原酸对照品,加甲醇制成每1mL含1mg的对照品溶液。取供试品、对照品和对照药材溶液各2μL,分别点于同一聚酰胺薄层板上,以体积分数36%醋酸溶液为展开剂,上行展开,取出,晾干,置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的蓝色荧光斑点。
5讨论
5.1显微鉴别中,少花龙葵的茎横切面中柱鞘纤维成束成环,木质部导管单个散在或2~3个连在一起,主脉维管束为外韧形,半月形,以上特征与广西产的少花龙葵的显微特征一致。薄壁细胞中含有草酸钙簇晶、砂晶、方晶,气孔为直轴式和不定式,非腺毛较多,具壁疣,腺毛腺头1~4个细胞柄1~2个细胞,有时形成腺鳞,以上特征与广西产的少花龙葵的显微特征有差别,广西产的少华龙葵中少见腺毛,非腺毛没有说明详细特征,草酸钙结晶中没有具体到何种结晶类型[2]。新晨
5.2通过薄层色谱鉴别发现少花龙葵中含有绿原酸。从定性鉴别试验可见,少花龙葵中含有生物碱、皂苷、黄酮类等成分。
5.3少花龙葵作为药食同源的中草药,具有较好的应用前景,本文较详细报道了少花龙葵的性状、显微以及理化鉴别特征,在这些特征中与广西产的少华龙葵有一定的差别,可能是由于产地的不同而导致的差异,本研究可为开发利用该药材提供参考依据。
【参考文献】
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