沙棘对阿尔茨海默病模型大鼠范文

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【摘要】目的探讨沙棘对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及脑组织SOD（superoxidedismutase，SOD）活性及MDA（malondialdehyde，MDA）含量的影响,为沙棘的开发及临床应用提供科学的理论依据。方法D-半乳糖腹腔注射9周,建立Wistar大鼠亚急性衰老模型后，第4周,Aβ25-35注入大鼠大脑海马内，建立阿尔茨海默病(Alzheimer''''sdisease,AD)模型。成模后第2周开始用沙棘及脑复康治疗8周。行为学采用Morris水迷宫方法检测大鼠学习和记忆能力；取脑组织测定超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量。结果行为学检测结果显示，模型组大鼠学习和记忆能力明显下降(P<0.05)，药物组学习和记忆能力可见有明显提高(P<0.05)；药物组与模型组相比，脑组织SOD活性明显增强(P<0.05)，MDA含量明显降低（P<0.01）。结论沙棘能改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆的能力，降低氧自由基对机体的损伤。

【关键词】阿尔茨海默病；沙棘；学习记忆能力；超氧化物歧化酶；丙二醛

沙棘又名醋柳、酸刺子，为胡颓子科植物沙棘属HippophaerhamnoidesL.,其化学成分主要有黄酮类、萜类、甾体类、维生素类、蛋白质和氨基酸类、挥发油和脂肪酸类、有机酸类、糖及微量元素等，是一种营养丰富，药用价值极高的植物。沙棘对心、脑血管系统疾病及消化系统疾病具有显著的作用，对肝脏具有保护作用，还可以清除人体内的自由基和抗衰老［1,2］。本实验在D-半乳糖亚急性衰老模型基础上建立Aβ25-35脑内注射AD复合模型，探讨沙棘对AD大鼠的作用，为沙棘的开发及临床应用提供理论依据。

1材料与方法

1.1药物沙棘为市售品，取500g生药材加入4000ml(8倍量)60%乙醇,放置1h,在60℃水浴回流2h,残渣加入3000ml(6倍量)60%乙醇水浴回流2h,合并滤液,用旋转蒸发仪回收溶剂,得粗粉59g(每克粗粉相当于生药材8.5g)。D-半乳糖，β-淀粉样蛋白（Aβ25-35），威海亚太药业有限公司产品，SOD试剂盒与MDA试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.2动物及分组Wistar大鼠，雌雄各半，体重为（220±20）g，由延边大学医学部实验动物科提供。实验分组为：正常组正常常规饲养9周；Aβ25-35模型组以D-半乳糖〔50mg／(kg·d)〕腹腔注射9周,并在第4周时以Aβ25-35（1μg／μl）脑内海马定点注射4μl；药物对照组成模后第2周开始脑复康（0.5ml/d）灌胃8周；药物组成模后第2周开始以沙棘水提物（1.0ml/d）灌胃8周。各组均在第4周时以Aβ25-35（1μg／μl）脑内海马定点注射4μl。

1.3指标检测

1.3.1大鼠记忆能力的检测指标各组大鼠给药9周后进行Morris水迷宫测试。连续6d记录大鼠的逃避潜伏期，取其平均值作为大鼠学习能力的检测指标。实验第7天去除站台，记录大鼠的穿台次数即每只大鼠从同一位点入水后，60s内游经站台的次数，以此作为大鼠记忆能力的检测指标。

1.3.2SOD活性和MDA含量的测定取脑组织按SOD测定试剂盒说明书进行，用可见光分光光度计测其OD值，计算SOD活性。MDA测定采用TBA法测得OD值，计算MDA含量。

1.3.3统计学处理实验结果用SPSS10.0统计学软件进行处理。结果数据以±s表示，采用单因素方差分析进行显著性差异比较。

2结果

2.1沙棘对阿尔海默病大鼠逃避潜伏期的影响模型组与药物组比较，大鼠逃避潜伏期有显著性差异(P<0.05)；药物对照组与模型组比较大鼠的逃避潜伏期有显著性差异(P<0.01)。结果见表1。表1沙棘对阿尔茨海默病大鼠逃避潜伏期的影响（略）

2.2沙棘对阿尔茨海默病大鼠穿台次数的影响药物组与模型组比较穿台次数明显增多，有显著性差异(P<0.05)；药物对照组与模型组比较有显著性差异（P<0.05）。结果见表2。表

2沙棘对阿尔茨海默病大鼠穿台次数的影响（略）

2.3沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织SOD活性的影响药物组的SOD活性与模型组比较有显著性差异(P<0.05)；药物对照组与模型组比较有显著性差异（P<0.01）。结果见表3。表3沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织SOD活性的影响（略）

2.4沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织MDA含量的影响药物组脑组织MDA含量与模型组比较有显著性差异(P<0.05)；药物对照组与模型组比较有显著差异（P<0.01）。结果见表4。表4沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织MDA含量的影响（略）

3讨论

AD是病因未明的原发性神经退行性疾病，可以导致学习和记忆力下降。学习和记忆属于高级神经活动或脑的高级功能，学习主要是指人或动物通过神经系统接受外界环境信息而影响自身行为的过程，记忆是指获得的信息或经验在脑内贮存和提取(再现)的神经活动过程，二者密切相关［3,4］。学习和记忆是以行为反应作为测量指标的。因此，本实验选用此方法检测大鼠的空间学习、记忆能力的改变在morris水迷宫测试中，药物组与模型组相比潜伏期缩短、穿台次数增加,说明沙棘水提物对阿尔茨海默病大鼠的学习记忆障碍有明显的改善作用。

近年来研究结果表明，AD患者脑组织SOD活性降低及MDA含量增高等证据，说明自由基与AD的发病关系密切。SOD具有抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、增强人体免疫力的功能。SOD这种酶是自由基损害的主要防御酶，对自由基的毒性具有保护性作用［5～7］。本实验结果显示，与阿尔茨海默病大鼠模型组相比，药物各剂量组脑中SOD活性均显著增高，提示沙棘能提高机体抗自由基氧化的功能。

MDA是体内自由基与不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的主要代谢产物，对细胞具有严重的损伤作用，常被用来间接反映机体的自由基代谢变化。MDA进一步与磷脂酰乙醇胺和蛋白质交联，生成无活性脂褐质，沉积于组织细胞，破坏细胞膜结构，最后导致细胞无法维持正常代谢而死亡［8,9］。因此，自由基导致的脂质过氧化、细胞破裂和退行性病变与阿尔茨海默病有着密切的关系。本研究的结果显示，沙棘组脑中的MDA含量低于模型组，由此推断，沙棘通过对大鼠大脑组织中MDA含量的抑制可减轻阿尔茨海默病模型大鼠机体组织细胞的脂质过氧化程度。

沙棘的此种作用与沙棘的化学成分如黄酮、萜类、甾体类、维生素类、蛋白质和氨基酸类、挥发油和脂肪酸类、有机酸类、糖及微量元素等在心、脑血管系统疾病具有显著的药理作用，以及清除人体内的自由基和抗衰老的作用有关。

因此，本研究认为沙棘对阿尔茨海默病大鼠可以改善其学习记忆能力，其作用机制可能与抗自由基损伤，防止脂质过氧化作用有关。其作用机制方面还有待于今后深入的研究。新晨：

【参考文献】

［1］齐虹凌，于泽源，李兴国,等.沙棘研究概述［J］.沙棘,2005，18（2）：37.

［2］廉永善，陈学林.沙棘属植物天然产物化学成分的时空分布［J］.西北师范大学学报（自然科学版），2000，36（1）：113.

［3］BaoruYang,positionandphysiologicaleffectsofseabuckthorn(hippophae)lipids［J］.TrendsinFoodScience＆Technology,2002,13:160.

［4］VahidBilalogluGuliyeva,MustafaGulb.HippophaerhamnoidesL.chro-matogmphicmethodstodeterminechemicalcomposition,useintraditionalmedicineandpharmacologicaleffects［J］.JournalofChromatographyB,2004,812:291.