电针对雌雄实验性老鼠脂代谢的影响范文

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本文作者：孙东云孙立虹梁玉磊张书义肖红玲吴中秋李文丽李新华马红利单位：河北医科大学中医学院针灸系北京市丰台区兴隆中医院中医科河北医科大学中医学院实验中心

单纯性肥胖症患者脂肪组织摄取能量的效应增强会使甘油三酯（TG）的合成和储存增加，同时高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）的含量下降，其清除胆固醇（TC）的能力减弱，使机体内呈现高TC血症状态；TC含量的增加又可抑制肝脏合成低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）受体，从而使LDL－C含量升高。这种脂类代谢的异常不仅可引起肥胖，还是动脉粥样硬化产生的重要因素之一［1］。大量研究证明，针刺减肥除了可以加快局部脂肪细胞分解代谢的速度［2］，还具有较好的降血脂作用［3－4］，但目前关于针刺对雌雄两性脂代谢影响差异的研究还相对缺乏。由于雌雄两性在激素分泌、新陈代谢、免疫调节等方面都存在显著差异［5－6］，故本实验以雌雄两性单纯性肥胖大鼠为研究对象，电针干预后观察其血脂含量的变化异同，探讨电针刺激对雌雄两性大鼠肥胖调节机制的异同，以期为临床治疗不同性别单纯性肥胖症提供科学的实验依据。

1材料与方法

1．1实验动物出生1d的清洁级SD大鼠8窝（平均每窝10只），雌雄各半，体质量6～9g，由河北医科大学实验动物中心提供（合格证号：1007003）。实验动物处置经河北省实验动物管理委员会审核批准。

1．2试剂与仪器谷氨酸钠注射液（上海旭东海普药业有限公司）；TG、TC试剂盒（保定长城临床试剂有限公司）；LDL－C试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司）；HDL－C试剂盒（长春汇力生物技术有限公司）；一次性无菌针灸针（华佗牌，苏州医疗器械厂，规格0．28mm×15mm）；韩氏电针仪WQ1002F型（北京华卫产业开发公司）；Humalyzer2000型生化分析仪（德国Humalyzer公司）；MSE－25型高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂）。

1．3造模及分组将8窝大鼠置于室温为25℃左右、明暗各12h的清洁级动物实验室，适应性喂养1d后造模。随机从每窝乳鼠中抽取雌、雄各3～4只按每只0．2mL／10g在颈部皮下注射15％谷氨酸钠（L－MSG）0．9％氯化钠溶液，其余乳鼠注射0．9％氯化钠溶液作为对照，连续5d。21d龄断乳，雌雄分笼饲养，经L－MSG处理的大鼠均喂高脂饲料，未经L－MSG处理的大鼠喂普通饲料。36d后测量模型大鼠和正常大鼠体重、体长（鼻至肛门的长度），并计算其体质量指数（Lee’s指数）［Lee’s指数＝体质量（g）1／3×103／体长（cm）［7］，其数值大小反映大鼠体脂含量］，模型大鼠Lee’s指数大于正常大鼠30以上为造模成功［8］。将造模成功的肥胖大鼠随机分为模型雌、模型雄、电针雌及电针雄4组，每组10只，继续喂高脂饲料；注射0．9％氯化钠溶液的雌、雄大鼠各10只作为正常组，继续喂普通饲料。普通饲料和高脂饲料均由河北医科大学实验动物中心提供。

1．4针刺方法电针雌、雄组大鼠：不做麻醉，将其固定于自制束鼠器上，按照《中国兽医针灸学》的方法取穴，并参照人体有关穴位，以动物比较学方法定位［9］。取大鼠“曲池”“后三里”“丰隆”“三阴交”“中脘”和“关元”穴，常规消毒后针刺，平补平泻捻转手法行针1min（捻转角度270°，捻转频率100次／min）。后在同侧“后三里”与“三阴交”及双侧“丰隆”接通韩氏电针仪，频率2Hz，强度1～2mA，30min后停针。每日治疗1次，连续针刺28d。模型雌、雄两组及正常雌、雄两组：用上述方法将实验大鼠在自制束鼠器上固定30min，每日1次，连续28d，不施加其它干预措施。

1．5观察指标及检测方法大鼠的体质量、体长及Lee’s指数的计算：由专人分别在治疗前后测量各组大鼠的体质量、体长，每只大鼠测2次，如果2次所测值相近则取其平均值，如果相差很大，测量第3次，取相近两值的平均值作为测量结果，计算其Lee’s指数。血浆TG、TC、LDL－C、HDL－C含量的测定：治疗结束后各组大鼠禁食12h，用10％水合氯醛（1mL／100g）腹腔注射麻醉后股动脉采血6mL，加入预冷的加有1％肝素和抑肽酶的塑料试管中，4℃、3000r／min离心5min，提取上清液测定血脂各项指标。于生化分析仪上用甘油磷酸氧化酶－过氧化物酶法测TG含量，胆固醇氧化酶法测TC含量，直接一步法测HDL－C和LDL－C含量。1．6统计学处理数据处理运用SPSS13．0统计软件，计量资料数据用均数±标准差（x珚±s）表示，组间比较采用方差分析和q检验法，P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1电针对雌雄两性肥胖大鼠Lee’s指数的影响图1结果显示，造模后，模型雌、雄两组和电针雌、雄两组大鼠的Lee’s指数均高于正常雌、雄两组，差异有统计学意义（P＜0．01），说明造模成功。治疗4周后，模型雌、雄两组大鼠Lee’s指数均高于正常雌、雄两组（P＜0．01）；电针雌、雄两组大鼠Lee’s指数较模型雌、雄两组均有明显降低（P＜0．01），且电针雄组较电针雌组下降明显（P＜0．05）。图3结果显示，模型雌、雄两组血浆LDL－C含量较正常组升高（P＜0．01），HDL－C含量较正常组降低（P＜0．01）；电针雌、雄两组血浆LDL－C含量较模型雌、雄两组均有下降（P＜0．05，P＜0．01），HDL－C含量较模型雌、雄两组均有升高（P＜0．05）；电针雄组与雌组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。

3讨论

脂代谢异常是引起肥胖的重要因素，主要包括TC、TG、LDL－C和HDL－C的代谢异常。TC可合成某些激素，参与机体如糖类等物质的代谢，对维持人体正常的生理功能有重要意义。但长期大量摄入TC，会形成高胆固醇血症，对人体不利。TG在肝脏和脂肪等组织中合成，主要储存在脂肪组织中，分解可供给机体能量，体内TG的合成速度加快，可导致体质量增加。HDL－C是将各组织中的TC运回肝脏代谢，清除血液循环中游离TC，同时它还能够竞争性地与LDL－C受体结合，阻断LDL－C进入动脉壁细胞，清除血管壁中的极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒。肥胖者体内的高TG血症，使TG由乳糜颗粒、VLDL过多转移到HDL－C上，使HDL－C浓度降低，从而导致HDL－C清除TC能力减弱，内源性TC合成增加，同时抑制VLDL异化及循环中TG的降解，使脂肪沉积体内。中医学认为本病病机为脾肾阳虚为本，痰湿瘀停聚为标［10］，故以“健脾益肾、祛湿化痰、通腑泄浊”为法，取足阳明胃经合穴足三里及足三阴经交会穴三阴交，二穴相合具有健脾祛湿，化痰降浊的作用。现代研究也表明针刺“足三里”等穴可以使肥胖大鼠下丘脑腹内侧核（即饱中枢）自发放电频率显著升高，使饱中枢兴奋水平升高，抑制了饥饿中枢的活动，从而降低食欲［11］。取胃之募穴中脘及小肠募穴关元，二者相配具有健脾和胃，分清泌浊，祛湿化痰之功效。此外，胃经络穴丰隆与手阳明大肠经合穴曲池同用可健脾除湿，通利肠腑，降浊消脂。六穴合用共达减脂减肥之效。针刺能通过调节机体紊乱的脂代谢达到减肥的目的，在临床应用中取得较好疗效。目前认为，针刺可通过影响下丘脑单胺类介质［12］、瘦素、神经肽Y［13］、神经－体液系统［14］以及炎性因子表达［15］等方式调节脂代谢，但针刺对不同性别脂代谢影响差异的报道较少，本实验旨在通过观察电针刺激对雌雄两性实验性肥胖大鼠血脂含量的影响，探讨电针刺激对不同性别肥胖者调节异同的可能机制。本实验结果表明，电针刺激上述穴位可以降低雌雄两性肥胖大鼠的Lee’s指数，调节血浆TG、TC、LDL－C、HDL－C的异常水平，起到减肥的作用。电针刺激在降低Lee’s指数方面，对雄性肥胖大鼠的作用优于雌性，可能是由于雄性大鼠受电针刺激后能更加敏感地调节交感－肾上腺系统和下丘脑－垂体－肾上腺皮质系统及甲状腺系统的功能，从而增加能量消耗，促进脂肪的动员与分解［16］。在降低血浆TG、TC的含量方面，电针刺激对雌性肥胖大鼠的作用优于雄性，可能由于电针刺激可更好地调节雌性大鼠饱食中枢，抑制饥饿中枢的兴奋性［17］及下丘脑室旁核的放电频率，并抑制下丘脑神经肽的合成和分泌，同时增强交感神经功能，抑制亢进的副交感神经功能，进而调节体内异常的瘦素和胰岛素含量，纠正异常的脂肪－胰岛内分泌轴［18］，改善糖代谢紊乱，从而对体内异常的脂代谢起调节作用。在调节血浆LDL－C、HDL－C的含量方面，雌雄大鼠之间差异虽不明显，但电针对雌性大鼠的改善趋势优于雄性，可能是由于样本量小，观察时间短所致，也可能与雌性大鼠体内雌激素受体数量及其被激活后的信号传导途径与雄性有差异，在针刺的作用下使雌激素调节血脂和低密度脂蛋白／高密度脂蛋白比值的功能［19］正常发挥有一定关系。通过研究，初步探明了电针刺激对雌雄两性肥胖大鼠血脂调节的差异性及其可能的作用机制，为针灸临床用针刺治疗不同性别的单纯性肥胖症患者提供科学的实验依据。