试剂盒对法医学的重要性范文

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作者：苏艳佳吴微微郝宏蕾任文彦郁丽娟叶新斌单位：浙江省公安物证鉴定中心

成功率比较分析

在12775份样本中有11658份检材采用两种试剂盒进行检验，分别得到15个(IdentifilerTM试剂盒)和8个(AGCUMini试剂盒)完整的STR基因座及性别位点数据，分型均获成功;有625份检材采用IdentifilerTM试剂盒未成功分型，而采用AGCUMini试剂盒分型成功，见图2;其余492份检材，采用两种试剂盒均未获成功分型。计算成功率IdentifilerTM试剂盒为91.3%;AGCUMini试剂盒为96.1%。随机抽取两种试剂盒均获成功分型血样中的10份，以及IdentifilerTM试剂盒未成功分型，而AGCUMini试剂盒分型成功血样中的10份进行定量分析。

结果显示模板DNA浓度前者在0.62～1.17ng/μL之间、后者在0.32～0.46ng/μL之间。说明AGCUMini体系对微量物证的STR分析能力优于IdentifilerTM体系。对不同浓度梯度的模板DNA(9947A)进行分析，结果采用AGCUMini系统，10μL扩增体系中40pg模板DNA(9947A)可得到完整分型，其灵敏度高于IdentifilerTM试剂盒，而与MinifilerTM试剂盒相当。

遗传学数据

AGCUMini系统包含的8个基因座中，D19S253基因座未见浙江人群中的遗传学调查数据。本文对699份浙江汉族无关个体D19S253基因座多态性进行了调查。结果该基因座共检出9个等位基因，37个基因型，分布经χ2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律(P＞0.05)，其基因频率见表1。D19S253基因座杂合度(H)为0.8140、匹配概率(Pm)为0.0690、个体识别力(DP)为0.9130、非父排除率(PE)为0.6250、多态性信息含量(PIC)为0.7729，属高鉴别力的遗传标记(DP＞0.9，H＞0.7)，适于在浙江汉族人群的法医学个体识别和亲权鉴定中选用。

讨论

AGCUMini系统采用MiniSTR技术，通过对引物序列的改进，减短了扩增产物长度，有利于对降解及微量DNA的分型检验。本文结果也显示，以相同量的模板DNA，AGCUMini系统对降解及微量DNA的检验成功率更高。但由于扩增产物片段短，等位基因片段长度范围相互重叠的几率比STR高，因此复合扩增的基因座数目有限，和商品化STR试剂盒相比较，要想达到同样的个人识别力，必须增加复合扩增的次数。而AGCUMini系统联合应用其它相关STR试剂盒，可有效提高识别能力。

本文联合AGCUMini和IdentifilerTM试剂盒，通过分型检测，应用乘积法则进行计算，结果显示单独和联合使用上述两种试剂盒的累积个体识别能力分别为1～3.5×10－11、1～1.7×10－17、1～1.4×10－24，累计非父排除概率分别为0.9999、0.9999984、0.9999999975，能力明显提高。此外，根据文献，三联体亲子鉴定至少应检验15个PE≥0.5741的基因座。而联合应用IdentifilerTM和AGCUMini体系后，基因座数量可达20个，其中PE值满足要求的有15个，可以满足三联体亲子鉴定的要求。

AGCUMini系统包含的STR基因座中除D19S253外，其余7个均包含在常见商业化试剂盒中，这使该系统具备良好的数据兼容性，其分型结果可直接与现有的数据进行检索和比对。在全国“打拐”DNA数据库建库中，本实验室检验的样本中有2名被拐儿童样本分别比中2对被拐儿童父母。联合应用IdentifilerTM和AGCUMini系统，计算累计父权指数为2.76×1011和1.48×1014，从而作出在遗传学角度确信亲子关系的结论。