硒对鼠生殖健康状况探索范文

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作者：王文娟宋春英白晓琴杨建一单位：山西医科大学细胞生物与遗传学教研室山西太原山西省人口计生委科研所

硒与雄性生殖系统的关系非常密切，睾丸中硒的含量明显高于其他组织，硒缺乏可降低睾酮水平，延缓生殖系统发育。该研究观察缺硒对小鼠生殖细胞的影响及补硒后生殖细胞的损伤能否得到恢复，旨在为今后硒的补充和临床应用提供理论和实验依据。

1材料与方法

1.1试剂苏木色精(上海润捷化学试剂有限公司进口分装);酚红(北京化学试剂厂);伊红(北京化工厂);硒标准液(国家标准物质中心);盐酸;高氯酸;硝酸(北京化工厂)。

1.2动物分组与处理健康昆明种雄性小鼠，3周龄，体重10～20g，由山医科大学动物中心提供，动物合格证号为SCXK2009-001。将雄性小鼠随机分为4组，即对照组、缺硒组、低剂量补硒组，高剂量补硒组。对照组给予普通饲料;缺硒组，给予缺硒饲料(0.024mg/kg);低剂量组，给缺硒饲料喂养，第6周开始补喂低剂量硒(0.224mg/kg);高剂量组，给硒缺乏饲料喂养，第6周开始补喂高剂量硒(1.024mg/kg)。于第11周处死。

1.3观察指标

1.3.1早期精细胞微核试验:颈椎脱臼法处死小鼠，摘取一侧睾丸，参照本实验室的方法进行。每只动物计数1000个早期精细胞，计算含微核细胞率(一个细胞多个微核时仍计算一个细胞)。

1.3.2精子畸形试验:参照改良的小鼠精子畸形实验方法进行，取制备好的精子悬液1滴，置清洁载玻片上，推片，晾干后甲醇固定，1%伊红溶液染色1h，在高倍镜下检查精子形态，每只动物观察300个精子，记数畸形精子数。

1.4统计学方法数据采用SPSS13.0统计软件，采用方差分析，组间比较采用多重比较，最小显著差法(Least-significantdifference，LSD)。

2结果

2.1早期精细胞微核试验如表1所示，缺硒组的微核发生率显著高于对照组(P＜0.05)。补充硒饲料后，与缺硒组相比较，低剂量补硒组和高剂量补硒组微核发生率发生率略有降低(P＞0.05)，与对照组比较，到11周时降至对照组水平。

2.2精子畸形试验如表2所示，缺硒组小鼠的精子畸形出现率显著高于对照组。补充硒饲料后，第11周低剂量补硒组和高剂量补硒组精子畸形率显著低于硒缺乏组。

3讨论

硒是一种人体必需的微量元素，与雄性生殖系统的关系非常密切，可保护细胞膜和内部结构免受过氧化物的损害与干扰，因缺硒而导致的睾丸组织的过氧化状态是男性不育的一个主要诱发因素。本实验观察了缺硒对小鼠精子发生造成的遗传学损伤，以及补充硒后精子形态的恢复情况。结果显示，缺硒组早期精细胞微核出现率显著高于对照组，而且随硒缺乏时间的延长，这种损伤有逐渐加重的趋势，这与国外文献报道的实验结果一致，其机制可能是由于硒缺乏可降低精原细胞或精母细胞中含硒酶(GPx4)的活力，使小鼠睾丸细胞处于过氧化状态，从而引起小鼠染色体断裂和DNA损伤。本实验结果显示，缺硒组小鼠的早期精细胞微核率和精子畸形出现率显著高于对照组，补充硒饲料后，各剂量补硒组与缺硒组比较，损伤均有明显的恢复，第11周小鼠早期精细胞微核率和精子畸形率明显下降，其中早期精细胞微核率基本恢复到正常水平，但在补充高剂量硒后，畸形率又有所回升，说明补硒可降低体内过氧化水平，对抗氧化应激和脂质过氧化损伤，减少精原细胞和精母细胞微核率的发生。但是大剂量、长时间高硒饮食反而可造成精子畸形率的升高，对硒缺乏的修复是不利的。而关于补硒对于人体的可靠性和安全性仍需要进一步的研究。